梅麗春，王 凡，蔣紅君，黃秀群

（1.云南省昭通市第一人民醫(yī)院檢驗科 657000；2.云南省第一人民醫(yī)院檢驗科，昆明 650032）

根據(jù)美國《臨床實驗室改進法案修正案》以及2003年國際標準化組織發(fā)布的醫(yī)學實驗室認可標準ISO15189，均要求臨床實驗室在開展某一檢測項目前，需提供并保留相關(guān)的方法學驗證實驗數(shù)據(jù)，即某一檢測項目在正式用來檢測患者標本、發(fā)出檢驗報告前，實驗室需對其相關(guān)方法學分析性能予以驗證，對廠商提供的評價資料中的主要性能予以確認。對封閉系統(tǒng)只需做基本性能驗證實驗，即精密度、準確度、臨床可報告范圍和參考區(qū)間驗證實驗［1］。作者參照相關(guān)文件，對電化學發(fā)光法檢測甲胎蛋白（AFP）的精密度進行驗證，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 羅氏Elecsys2010全自動電化學發(fā)光免疫分析儀。羅氏電化學發(fā)光AFP試劑盒，批號為152172，配套校準品，批號為181641，通用稀釋液。

1.2 標本 英國朗道公司高、低值免疫質(zhì)控品，批號分別為637EC、642EC；混合高、低值A(chǔ)FP標本各1份。

1.4 方法 按照操作說明書的要求對儀器進行常規(guī)的保養(yǎng)和維護，每天進行常規(guī)質(zhì)控（兩個濃度水平），質(zhì)控在控后進行驗證實驗。精密度驗證實驗：按照EP10-A2《臨床實驗室定量方法的初步評價》對AFP測定的精密度進行驗證，通過實驗得到估計的批內(nèi)標準差（S批內(nèi)）和總的標準差（S總），并與廠家聲明的批內(nèi)標準差和總標準差比較［2］。

2 結(jié) 果

羅氏公司聲明Elecsys2010電化學發(fā)光法檢測AFP的批內(nèi)精密度為3%，總精密度為6%，因為S批內(nèi)＜2／3S總，所以作者每天分析兩個濃度水平的室內(nèi)質(zhì)控品，每個濃度重復測定4次，連續(xù)5d［1］。結(jié)果見表1及表2。

表1 電化學發(fā)光法檢測AFP精密度驗證實驗數(shù)據(jù)（低值）（U／mL）

表2 電化學發(fā)光法檢測AFP精密度驗證實驗數(shù)據(jù)（高值）（U／mL）

從表1可以看出，對低值標本（測定均值為11.90U／mL）廠家聲明S批內(nèi)＜0.36U／mL，S總＜0.71U／mL，驗證的S批內(nèi)為0.28U／mL，S總為0.45U／mL，均處于廠家聲明的允許范圍內(nèi)。

從表2可以看出，對高值標本（測定均值為237.23U／mL），廠家聲明S批內(nèi)＜7.11U／mL，S總＜14.23U／mL，驗證的S批內(nèi)為2.85U／mL，S總為3.50U／mL，均小于廠家聲明的允許范圍。從表1、表2可知，對于高值和低值標本，驗證的AFP測定批內(nèi)精密度及總精密度均與廠家聲明一致。

3 討 論

臨床實驗室修正法規(guī)（CLIA）規(guī)定了檢測系統(tǒng)性能評估的最基本要求為精密度、準確度、可報告范圍和參考區(qū)間，即醫(yī)學實驗室至少必須對所選用的檢測系統(tǒng)的上述4項性能指標進行驗證。臨床實驗室的驗證實驗不同于廠家在建立檢測系統(tǒng)時進行的建立實驗，也不同于廠家確認其檢測系統(tǒng)性能時的確認實驗，要求使用簡便快捷、便于操作的方法來驗證廠家已經(jīng)聲明的性能參數(shù)。

對于精密度的驗證，目前國內(nèi)主要參考臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）EP6-A，準確度的驗證主要參考EP9-A2。精密度性能是檢測系統(tǒng)的基本分析性能之一，也是其他方法學評價的基礎(chǔ)，國內(nèi)臨床實驗室對樣品只作單次測量便發(fā)出報告，所以精密度性能更是至關(guān)重要［3］。EP10-A2《臨床實驗室定量方法的初步評價》使用戶通過最小的努力即可核實廠家聲明的精密度性能，作者使用該方案對電化學發(fā)光測定AFP的批內(nèi)不精密度和總不精密度進行驗證，廠家聲明的批內(nèi)不精密度為3%，總不精密度為6%，表1及表2結(jié)果顯示，低AFP測定值標本驗證的S批內(nèi)為0.28U／mL，S總為0.45U／mL，高 AFP測定值標本驗證的S批內(nèi)為 U／mL，S總為3.50U／mL，均小于廠家聲明值。

上述結(jié)果顯示，對于高值和低值標本，電化學發(fā)光檢測AFP測定批內(nèi)精密度及總精密度均符合廠家聲明的范圍，此驗證方案和實驗方法簡便可行，可用于其他項目的性能驗證。

［1］ 楊有業(yè)，張秀明.臨床檢驗方法學評價［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008.

［2］ 畢波，呂元.定量檢測方法學性能驗證的系統(tǒng)設(shè)計［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2007，30（2）：143-145.

［3］ 楊志釗，繆麗韶.利用CLSI EP15-A指南驗證精密度和準確度［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2010，31（3）：231-232.