肖 翔，張偉龍，潘理想，張達秀

（廣東省東莞市塘廈醫(yī)院檢驗科 523721）

DXI800是美國Beckman公司推出的全自動磁性微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，根據(jù)檢測項目的不同，其檢測方法分為競爭法和雙抗體夾心法兩種，其中每種方法又分為一步法和兩步法。根據(jù)ISO15189和美國CAP的要求，新的檢測系統(tǒng)在用于臨床標本的檢測之前需要對其分析性能進行評價。本研究在每一種檢測方法中選擇一個項目作為代表（雌二醇為兩步競爭法、促卵泡生成素為兩步夾心法、泌乳素為一步夾心法、三碘甲狀腺原氨酸為一步競爭法），應(yīng)用臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）頒布的《臨床實驗室定量檢測試驗的初步評價批準指南》第2版（EP10-A2）對這4個項目的分析性能進行初步評價。

1 材料與方法

1.1 試驗標本 伯樂公司生產(chǎn)的Lyphochek免疫分析質(zhì)控物高、低兩個水平的質(zhì)控品，高值質(zhì)控品（批號40253，有效期2014年2月28日），低值質(zhì)控品（批號40251，有效期2014年2月28日），中值質(zhì)控品由高值質(zhì)控品和低值質(zhì)控品等比例混合而成。雌二醇（E2）均值：高值650pg／mL，低值150pg／mL。促卵泡生成素（FSH）均值：高值6.58mIU／mL，低值42mIU／mL。泌乳素（PRL）均值：高值4.7ng／mL，低值33ng／mL。三碘甲狀腺原氨酸（TT3）均值：高值0.96ng／mL，低值3.15 ng／mL。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 美國Beckman公司Unicel DXI800全自動磁性微粒子化學發(fā)光免疫分析儀。

1.2.2 試劑與校準品 試劑和校準品都使用美國Beckman公司的產(chǎn)品，E2試劑批號017612，有效期至2012年3月12日，校準品批號919196；FSH試劑批號019511，有效期至2012年2月21日，校準品批號011716；PRL試劑批號023640，有效期至2012年2月28日，校準品批號018583；TT3試劑批號023640，有效期至2012年2月28日，校準品批號018583。

1.3 方法

1.3.1 在開始試驗之前，參加試驗操作的人員必須進行儀器的操作培訓并熟練掌握儀器的檢測操作、日常維護保養(yǎng)和常見故障的排除等技能，熟悉性能驗證方案。

1.3.2 開始試驗之前按照廠家說明使用校準品校準檢測系統(tǒng)，在整個試驗過程不應(yīng)該對檢測系統(tǒng)進行再校準。在整個試驗過程中按照廠家說明進行日常維護和保養(yǎng)。

1.3.3 根據(jù)試驗要求計算試驗樣品的用量，嚴格按照質(zhì)控品說明書的規(guī)定溶解質(zhì)控品。并按照1∶1的比例用高值質(zhì)控品和低值質(zhì)控品配制出中值質(zhì)控品。一次性溶解和配制出整個試驗所需的試驗樣品用量，避免溶解質(zhì)控品過程帶來的誤差。

1.3.4 將高、中、低3個水平的質(zhì)控品上機檢測，檢測順序為中、高、低、中、中、低、低、高、高、中（其中第一個中值標本為試驗啟動的灌注樣品，其值不進行統(tǒng)計分析），這個順序不應(yīng)該改變、插入或中斷。無論何種原因，如果最后的9個標本中任何一個被拒絕、丟失或沒有報告，整個過程需要重做。按照上述順序連續(xù)測定5d，得到高、中、低值各15個。

1.3.5 每天試驗結(jié)束后都需要對數(shù)據(jù)進行初步判斷，看是否有明顯的離群點，若有需要盡最大努力找出原因，繼續(xù)試驗。

1.3.6 偏倚和總不精密度的判斷使用基于生物學變異的質(zhì)量規(guī)范［1］。（1）允許偏倚：E2、FSH、PRL、TT3 4個項目的允許偏倚分別為8.3%、7.8%、15.4%、4.2%。（2）允許總不精密度：E2、FSH、PRL、TT3 4個項目的允許總不精密度分別為11.3%、5.1%、3.5%、4.4%。（3）截距、斜率、攜帶污染率、非線性、線性漂移：計算所得的校正值進行t檢驗，t檢驗值介于－4.6到4.6之間表示無統(tǒng)計學意義，可接受。

1.4 統(tǒng)計學方法 每天的原始數(shù)據(jù)記錄在EP10-A2文件提供的原始數(shù)據(jù)記錄表上，錄入Excel軟件進行統(tǒng)計學分析。

2 結(jié) 果

2.1 總不精密度 根據(jù)EP10-A2提供的計算表格和公式計算總不精密度，4個項目的總不精密度結(jié)果見表1和表2。

2.2 偏倚分析 計算各濃度試驗樣品5d檢測結(jié)果的均值，以廠商提供的各濃度質(zhì)控品的均值為靶值，計算二者的差值，再計算差值的百分偏倚，結(jié)果見表1和表2。

2.3 截距、斜率、非線性、攜帶污染率、線性漂移的回歸分析結(jié)果見表3和表4。

表1 E2和FSH總不精密度和偏倚計算

表2 PRL和TT3總不精密度和偏倚計算

表3 E2和FSH截距、斜率、攜帶污染率、非線性、漂移計算

表4 PRL和TT3截距、斜率、攜帶污染率、非線性、漂移計算

3 討 論

近年來隨著實驗室認可的發(fā)展，質(zhì)量意識已經(jīng)深入廣大檢驗人的心中，根據(jù)ISO15189的規(guī)定實驗室應(yīng)評估所選方法和程序，在用于醫(yī)學檢驗之前應(yīng)證實其可給出滿意的結(jié)果，因此在新的分析系統(tǒng)實施臨床標本的檢測之前需要對其分析性能進行評價［2－5］。本文的研究對象DXI800是新購入的配套檢測系統(tǒng)，廠家在出廠之前已經(jīng)對其進行了嚴格的分析性能評價，其性能參數(shù)已通過試劑說明書給出。實驗室如果再使用EP5－A、EP9-A等文件來對分析系統(tǒng)的精密度和準確度等性能指標進行評價就會延長分析系統(tǒng)投入使用的時間，且試驗過程需要耗費大量的人力和物力。EP10-A2提供了一個具有操作簡單、時間短、評價參數(shù)多的試驗方案，可以快速地對分析系統(tǒng)的分析性能進行初步評價，可以縮短分析系統(tǒng)投入使用的周期。

在使用EP10-A2進行檢測系統(tǒng)性能的初步評價時，需要嚴格按照廠家的說明書進行操作，因為中值質(zhì)控品是通過高值和低值質(zhì)控品等比例混合而成的，且混合后的理論值將作為靶值使用，故在混合的時候特別需要注意吸樣體積的準確。在開始試驗之前應(yīng)該根據(jù)試驗的需要計算出試驗樣品的用量，最好能多制備一些以便在出現(xiàn)離群值時重復(fù)測試。如果使用溶解干粉質(zhì)控品最好在穩(wěn)定期內(nèi)一次性溶解足夠的量，避免溶解質(zhì)控品帶來的誤差。如果使用液體質(zhì)控品最好統(tǒng)一每次溶解的時間、溫度和復(fù)溶操作。

本文的研究對象為配套檢測系統(tǒng)，且為新品，通過EP10－A2方案對其進行初步性能評價后證實了廠家試劑說明書介紹的分析性能，滿足本科室規(guī)定的質(zhì)量要求。分析系統(tǒng)在使用過程中應(yīng)該按照廠家的建議制定和執(zhí)行維護保養(yǎng)，定期對分析系統(tǒng)的性能進行驗證。

［1］ 楊有業(yè)，張修明.臨床檢驗方法學評價［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：59-66.

［2］ 王佳，蔡新.Unicel DIX800全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)性能評價［J］.臨床檢驗雜志，2008，26（2）：157-158.

［3］ 吳躍軍，姚莉.同一實驗室2臺DXI800化學發(fā)光儀6個常規(guī)項目的偏倚評估及應(yīng)用分析［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33（3）：360-362.

［4］ 李觀強，葉應(yīng)嫵，萬彥彬，等.某型號免疫分析儀甲胎蛋白分析性能驗證［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2011，32（13）：1502-1504.

［5］ 王瑜敏.應(yīng)用EP10-A初步評價DXI800發(fā)光分析儀性能［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2010，20（9）：3229-3230.