高 佳，王躍生

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外科，黑龍江佳木斯154003)

當(dāng)今對(duì)人類(lèi)的身體健康危害嚴(yán)重的幾種慢性病當(dāng)中，糖尿病位居前列。當(dāng)前據(jù)統(tǒng)計(jì)全世界的糖尿病患者已經(jīng)超過(guò)1.7億[1]，糖尿病患者長(zhǎng)期高血糖可通過(guò)多種機(jī)制促進(jìn)小血管的粥樣硬化，使血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受到損害，微血管發(fā)生病變，釋放組織因子，激活凝血系統(tǒng)后形成高凝血癥和纖溶亢進(jìn)，致使多種器官受到損害，尤以糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)、糖尿病腎病(DN)等微血管病變常見(jiàn)[2]，是患者致死、致殘的主要原因。近年來(lái)國(guó)外醫(yī)學(xué)專(zhuān)家通過(guò)分析接受減肥手術(shù)的病理性肥胖患者發(fā)現(xiàn)。Roux－en－Y胃轉(zhuǎn)流術(shù)(Roux－en－Y gastric bypass，GBP)不僅在治療病理性肥胖方面能夠取得滿(mǎn)意的療效，而且對(duì)2型糖尿病的控制具有意料之外的作用[3]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究糖化血紅蛋白，血小板參數(shù)等對(duì)2型糖尿病微血管病變有顯著意義的參數(shù)，在對(duì)T2DM大鼠行GBP術(shù)前后的變化進(jìn)行分析。嘗試探索GBP術(shù)是否是預(yù)防并治療2型糖尿病微血管病變風(fēng)險(xiǎn)最有效的治療方法，準(zhǔn)確地把握手術(shù)時(shí)機(jī)能否使早期2型糖尿病輕微的微血管病變可逆。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級(jí)近交系雄性Wistar大鼠50只，體重170～220g。藥品與試劑，器械:0.5% 戊巴比妥鈉由佳木斯大學(xué)生化實(shí)驗(yàn)室提供。鏈脲佐菌素(STZ)購(gòu)自美國(guó)Sigma公司?；A(chǔ)飼料，高脂高糖飼料由佳木斯大學(xué)生化實(shí)驗(yàn)室提供。全自動(dòng)血液分析儀，全自動(dòng)生化分析儀Olympus 640羅康全卓越型全自動(dòng)血糖儀(德國(guó)羅氏公司)由佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)造模

雄性Wistar大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，隨機(jī)分為造模組35只及非造模組15只。制作2型糖尿病大鼠的模型，非造模組喂養(yǎng)普通飼料，正常飲食8周;造模組給予高糖分高脂肪飼料持續(xù)4周后按30mg/kg于左下腹穿刺，腹腔注射1%的STZ溶液(pH4.20.1 mmol/L的檸檬酸鈉一檸檬酸緩沖液冰浴中新鮮配置)，1周后測(cè)血糖，選取連續(xù)2次空腹血糖＞7.8mmol/L大鼠作為造模組，再連續(xù)高糖分高脂肪飼料喂養(yǎng)4周，然后測(cè)大鼠尾靜脈血糖值＞13.6mmol/L、穩(wěn)定5d為成功模型，共有33只成模。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組

分組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，將非造模組大鼠隨機(jī)取10只作為普通對(duì)照組(P)，成模大鼠隨機(jī)選取30只，每10只一組，分別分為行GBP干預(yù)組(A)，經(jīng)不規(guī)律內(nèi)科治療組(B)和不行干預(yù)繼續(xù)高糖分高脂肪飼料喂養(yǎng)組(C)。

1.2.3 干預(yù)方法

A組行 GBP術(shù):大鼠術(shù)前停止喂食12h，不限飲水，0.5%戊巴比妥鈉(50mg/kg)注射入腹腔內(nèi)，麻醉后固定于手術(shù)臺(tái)上，無(wú)菌條件下上腹部正中切口長(zhǎng)3cm切開(kāi)進(jìn)腹，閉合胃遠(yuǎn)端，距Treitz韌帶10cm切斷空腸，空腸遠(yuǎn)端與近端的胃后壁吻合，距胃腸吻合口遠(yuǎn)端10cm行空腸端側(cè)吻合，完成后均用慶大霉素20mL沖洗腹腔后關(guān)腹。

B組行不規(guī)律內(nèi)科治療:將二甲雙胍片按每日5000mg起混于飼料內(nèi)喂養(yǎng)，隨機(jī)加大或減少給藥量，模擬內(nèi)科用藥時(shí)的不確定性，可將高糖高脂飼料和普通飼料隨機(jī)混合喂養(yǎng)，模擬患者對(duì)于生活習(xí)慣的不自律性。

C組則不行任何干預(yù)，繼續(xù)高糖高脂飼料喂養(yǎng)。

1.2.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

術(shù)前與術(shù)后1，2，4周檢測(cè)各大鼠糖化血紅蛋白(GHb)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血小板平均容積(MPV)、血小板分布寬度(PDW)、血小板比容(PCT)參數(shù)值。大鼠隔夜禁食12～14h，采用斷尾取血法采血。切割鼠尾取血約4mL，分別加入肝素抗凝管(測(cè)GHb)和EDTA－K2(測(cè)血常規(guī))抗凝管各2mL，混勻后2h內(nèi)測(cè)定，GHb采用免疫比濁法用全自動(dòng)生化分析儀Olympus 640測(cè)定，MPV、PDW、PLT用佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科提供全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS15.0軟件進(jìn)行兩因素方差分析和t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1～3。

表1 術(shù)前各組間血小板參數(shù)和糖化血紅蛋白的關(guān)系(±s)

表1 術(shù)前各組間血小板參數(shù)和糖化血紅蛋白的關(guān)系(±s)

＊P＜0.01

PLT MPV PDW PCT普通組(P) 4.58±1.76 313.0±132.4 5.8±1.2 17.5±0.9 0.27 HbA1C1(%)±0.07手術(shù)造模組(A) 7.41±2.51＊ 155.52±48.87＊ 11.67±5.51＊ 35.21±4.12＊ 0.35±0.14不規(guī)律內(nèi)科治療組(B)7.38±2.91＊ 164.38±50.12＊ 10.78±4.41＊ 34.13±+3.89＊ 0.26±+0.11不經(jīng)干預(yù)組(C) 7.37±2.89＊ 158.72±49.64＊ 11.04±5.13＊ 32.78±3.46＊0.28±0.16

表2 術(shù)后1周各組間血小板參數(shù)和糖化血紅蛋白的關(guān)系(±s)

表2 術(shù)后1周各組間血小板參數(shù)和糖化血紅蛋白的關(guān)系(±s)

＊P＜0.01

HbA1C1 PLT MPV PDW PCT P 5.16±1.37 307.0±130.45 5.6±1.1 16.8±0.87 00.26±0.04.26±0.09 A 6.37±1.41 303.39±104.87 6.53±0.43 16.60±0.69 0.24±0.17 B 7.42±1.13* 186.42±101.76* 11.70±2.21* 37.84±3.91* 0.24±0.06 C 7.78±1.82* 159.14±140.23* 12.93±1.60* 39.71±3.38*

表3 術(shù)后4周各組間血小板參數(shù)和糖化血紅蛋白的關(guān)系(±s)

表3 術(shù)后4周各組間血小板參數(shù)和糖化血紅蛋白的關(guān)系(±s)

＊P＜0.01

.45 0.25±0.05 A 4.97±2.14 316.45±128.11 5.75±1.2 17.1±0.86 0.26±0.07 B 10.64±2.16＊ 81.59±25.67＊ 32.29±2.70＊ 46.31±9.41＊ 0.27±0.08 C 12.32±2.14＊ 51.54±9.26＊ 40.52±1.10＊ 66.31±3.42＊HbA1C1 PLT MPV PDW PCT P 5.08±2.03 311.46±123.77 5.56±1.28 16.27±00.26±0.12

3 討論

近年的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，糖尿病微血管病變中，血小板參數(shù)的改變起到了重要作用。但血小板參數(shù)的改變并不是糖尿病微血管病變所獨(dú)有的，所以在動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血小板參數(shù)的同時(shí)，聯(lián)合測(cè)定HbA1c1才能了解糖尿病有無(wú)微血管病變的存在。傳統(tǒng)治療并不能確切治愈2型糖尿病。近年相關(guān)臨床病例表明，GBP是確切治愈2型糖尿病的唯一方法[4]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示術(shù)前四個(gè)組的血小板參數(shù)、糖化血紅蛋白造模組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而造模組與健康對(duì)照組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而術(shù)后第一周B、C組與P、A組對(duì)比PLT、MPV、PDW、HbA1c1均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.01);P組與A組，B組與C組相比較則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，四組PCT比較則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。術(shù)后四周B、C組與P、A組對(duì)比 PLT、MPV、PDW、HbA1c1均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);B組與C組相比較MPV、PDW有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);P組與A組相比較則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);四組PCT比較則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。說(shuō)明A組術(shù)后 PLT不再下降，MPV，PDW也不再上升，HbA1c1趨于恒定。而B(niǎo)組PLT、MPV、PDW、HbA1c1值上下波動(dòng)明顯，且MPV與HbA1c1值趨于升高。C組各項(xiàng)指標(biāo)均趨向于加重糖尿病微血管病變風(fēng)險(xiǎn)。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，PLT降低可能由于2型糖尿病患者持續(xù)高血糖水平，導(dǎo)致血紅蛋白糖基化，引起細(xì)胞氧交換不足和脂類(lèi)代謝異常，血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，血小板活化功能增強(qiáng)，血小板數(shù)量降低，從而刺激骨髓巨核細(xì)胞過(guò)度再生，釋放體積不均的大體積血小板，MPV增大，PDW增加，血小板的體積與功能關(guān)系密切，體積大的血小板相對(duì)壽命長(zhǎng)，含致密體多，酶活性高。血小板大量黏附、凝集和釋放，形成微血栓。微血栓進(jìn)一步促進(jìn)血小板的黏附、凝集和釋放，使微血管長(zhǎng)期處于缺血、缺氧和內(nèi)皮損傷狀態(tài)。這是糖尿病產(chǎn)生微血管并發(fā)癥的病理基礎(chǔ)之一[5]。本實(shí)驗(yàn)觀察的B、C組的MPV明顯高于行GBP術(shù)后的A組和健康組也證實(shí)了這一點(diǎn)。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血小板參數(shù)的變化，可輔助判斷微血管病變發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)，從而對(duì)糖尿病血管并發(fā)癥的早期診斷有確切的作用。因此，糖尿病患者存在微血管病變風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，PLT、MPV、PDW 結(jié)合起來(lái)可反映微血管病變的風(fēng)險(xiǎn)程度。

本文在術(shù)前造模組的HbA1c1、MPV、PDW 均高于健康對(duì)照組，術(shù)后未行GBP術(shù)組高于行GBP術(shù)干預(yù)組和健康對(duì)照組，三組之間具有顯著性差異(P＜0.01)，說(shuō)明糖尿病患者的HbA1c1增高和微血管病變的發(fā)生有直接關(guān)系，HbA1c1越高發(fā)生微血管病變的風(fēng)險(xiǎn)越大。檢測(cè)HbA1c1聯(lián)合測(cè)定血小板參數(shù)有利于2型糖尿病患者早期診斷微血管病變，同時(shí)血小板參數(shù)的改變與糖尿病微血管病變的形成關(guān)系密切。對(duì)于早期微血管病變患者，盡早行GBP術(shù)是唯一避免微血管病變加重的方法，盡早行GBP術(shù)或可逆轉(zhuǎn)微血管病變。

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[4]王躍生，史洪軍.2型糖尿病大鼠血清C反應(yīng)蛋白動(dòng)態(tài)變化及胃轉(zhuǎn)流術(shù)干預(yù)后改變[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2010，24(4):32-34

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