陳芳芳，李家亮，王國洪

(本文編輯:張仲書; 英文編輯:王建東)

隨著國家《實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》(ISO 15189實驗室認(rèn)證)在國內(nèi)大中型醫(yī)院的開展，使得化學(xué)發(fā)光等檢驗項目的方法學(xué)性能評價已提到日程上來［1］。參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)有關(guān)文件要求和國家ISO 15189認(rèn)證的規(guī)定［2］，凡參加醫(yī)學(xué)實驗室認(rèn)證的實驗室，在開展某一檢測項目之前，需提供并保留相關(guān)的方法學(xué)驗證實驗數(shù)據(jù)。為了正在申報的ISO 15189實驗室認(rèn)可工作，本實驗室參照相關(guān)要求，對BECKMAN DxI800全自動化學(xué)發(fā)光儀上的5項甲狀腺激素(TT3、TT4、FT3、FT4、TSH)的精密度、線性范圍及參考區(qū)間等方面進(jìn)行驗證和評價，結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 儀器為美國BECKMAN UniCel DxI 800全自動化學(xué)發(fā)光儀。標(biāo)本均取自本院患者及健康體檢者新鮮血清。質(zhì)控品為美國伯樂公司高、低值質(zhì)控品，批號分別為:40271、40273。

1.2 方法

1.2.1 批內(nèi)精密度 參考CLSIEP5-A2［3］文件，選擇新鮮高值(H)、低值(L)混合血清標(biāo)本進(jìn)行驗證實驗，每個濃度樣本連續(xù)重復(fù)測定20次，計算出均值(x)、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)和變異系數(shù)(CV)。與廠商聲明的CV值進(jìn)行比較，如實驗結(jié)果小于廠商聲明結(jié)果，則接受廠商提供的批內(nèi)精密度聲明。

1.2.2 批間精密度 參考CLSIEP5-A2［3］文件，選擇新鮮混合血清標(biāo)本(H、L)進(jìn)行驗證實驗，每個濃度樣本每工作日重復(fù)測定4次，連續(xù)測定5工作日，計算出x、SD和CV。與廠商聲明的CV值進(jìn)行比較，如實驗結(jié)果小于廠商聲明，則接受廠商提供的批間精密度結(jié)果。

1.2.3 線性范圍驗證 參考CLSIEP6-A2［4］文件，選取新鮮血清H和L各一份，將H和L按5L、4L+1H、3L+4H、2L+3H、1L+4H、5H 配制成6 個濃度，每個濃度每個項目分別測定2次，2次檢測結(jié)果的均值為實測值。將各項目檢測數(shù)據(jù)，分別輸入Excel表評估數(shù)據(jù)，以實測值為橫坐標(biāo)(X)，理論值為縱坐標(biāo)(Y)，做線性圖Y=aX+b，如斜率(a)=1.00±0.05，相關(guān)系數(shù)(r)≥0.975則驗證通過。

1.2.4 參考區(qū)間驗證 參考CLSIC28-A2［5］文件，選取本院健康體檢者(年齡為28～67歲，均無心、肝、肺、胃等重要臟器疾病，肝、腎功能正常，家族中無腫瘤及遺傳病史)男、女性各10名，檢測其正常新鮮血清樣本，超過95%的結(jié)果如在廠商建議的參考區(qū)間內(nèi)，則驗證通過。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用Excel 2003軟件進(jìn)行分析。各項檢測數(shù)值以x與SD表示，并計算CV與r等數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。

2 結(jié)果

2.1 精密度驗證結(jié)果 5項甲狀腺激素(TT3、TT4、FT3、FT4、TSH)的批內(nèi)精密度和批間精密度檢測結(jié)果顯示，各檢測項目的CV均小于廠商聲明的CV(≤8.33%)，與廠商聲明一致，在允許范圍內(nèi)，驗證通過。結(jié)果見表1和表2。

2.2 線性范圍驗證結(jié)果 按照線性標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證結(jié)果的a值均在(1±0.05)范圍內(nèi)，r值均≥0.975(表3)。

表1 5項甲狀腺激素批內(nèi)精密度驗證結(jié)果(n=20)

表2 5項甲狀腺激素批間精密度驗證結(jié)果(n=20)

表3 5項甲狀腺激素線性范圍驗證結(jié)果(n=20)

2.3 參考區(qū)間驗證結(jié)果 參考 CLSIC28-A2［5］要求，20例健康成人樣本作為參考個體，比較小樣本參考區(qū)間和廠商提供參考區(qū)間之間的可比性。如果20例參考個體中有超過95%的結(jié)果在建議的參考區(qū)間內(nèi)，則驗證通過，可以直接引用廠商提供的參考區(qū)間。結(jié)果顯示(表4)，20個參考值數(shù)據(jù)的驗證結(jié)果均在廠商提供的參考區(qū)間內(nèi)，驗證通過。

表4 5項甲狀腺激素生物參考區(qū)間驗證結(jié)果

3 討論

醫(yī)療質(zhì)量評價是醫(yī)療質(zhì)量管理的一個重要環(huán)節(jié)，對提高醫(yī)療質(zhì)量起著重要的作用［6］。BECKMAN DxI 800全自動化學(xué)發(fā)光檢測是利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)和磁性微粒子分離技術(shù)相結(jié)合的測定技術(shù)。根據(jù)《臨床實驗室改進(jìn)法規(guī)修正案》和ISO 15189要求，在儀器用于臨床之前，實驗室必須對其主要分析性能進(jìn)行驗證［7］。

精密度是指重復(fù)測定值間的一致性。它反映儀器整體性能的首要指標(biāo)，是其他方法學(xué)評價的基礎(chǔ)，也是進(jìn)行其他方法學(xué)驗證實驗的前提［8-10］。本文測定的5項甲狀腺激素高值、低值的批內(nèi)和批間CV值均小于廠商聲明的范圍，說明BECKMAN DxI 800全自動化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)檢測5項甲狀腺激素的精密度良好，符合廠商要求，達(dá)到評價目的。

線性范圍是指測定值與稀釋倍數(shù)呈線性關(guān)系的范圍，以保證樣本的檢測結(jié)果在線性范圍內(nèi)準(zhǔn)確可靠，少數(shù)標(biāo)本超過線性范圍，應(yīng)按要求用適當(dāng)?shù)南♂屢汉头椒ㄟM(jìn)行稀釋后重新測定，否則檢測的結(jié)果與真值的誤差就超過了臨床可接收范圍。本文用線性實驗對甲狀腺5項檢測的線性范圍作了評價，表3結(jié)果顯示，各檢測項目的a值均在(1±0.05)范圍內(nèi)，r≥0.975，說明實測值與理論值具有良好的相關(guān)性，與廠商聲明一致，結(jié)果符合要求。

生物參考區(qū)間是指某項檢查結(jié)果在正常人群中的分布范圍，是解釋檢驗結(jié)果分析檢驗信息的一個基本尺度和依據(jù)［11］。實驗室給臨床提供檢驗項目可靠的生物參考區(qū)間，才能使臨床對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引，因此確立可靠的檢驗項目生物參考區(qū)間是實驗室的重要任務(wù)［12］。本實驗結(jié)果顯示，各驗證結(jié)果均在廠商提供的參考區(qū)間內(nèi)，因此認(rèn)為本實驗室5項甲狀腺激素的參考區(qū)間符合臨床要求。

綜上所述，通過對5項甲狀腺激素的精密度、線性范圍及生物參考區(qū)間的方法學(xué)性能評價，顯示各項分析參數(shù)的性能均符合臨床和廠商的相關(guān)要求，可用于臨床分析。按照美國病理學(xué)協(xié)會(CAP)要求，每年至少一次需要對儀器進(jìn)行性能評價的驗證，其結(jié)果也應(yīng)符合相應(yīng)的要求［13］。通過對 BECKMAN DxI 800全自動化學(xué)發(fā)光儀上5項甲狀腺激素檢測性能的評價，可以保證其分析性能能達(dá)到實驗室認(rèn)可的目標(biāo)，使檢驗結(jié)果更加可靠，達(dá)到持續(xù)性質(zhì)量改進(jìn)的目的，更好地服務(wù)于臨床。

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