萬(wàn)磊

Sonic Hedgehog(Shh)信號(hào)通路在胚胎發(fā)育過(guò)程中起到重要作用，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和組織形成，該信號(hào)通路的異常激活與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)［1］。胃癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常參與其發(fā)生發(fā)展，Shh蛋白是Sonic Hedgehog信號(hào)通路的重要組成部分。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Shh蛋白在胃癌組織中的表達(dá)，分析Shh信號(hào)通路在胃癌發(fā)生中的作用。

1 資料與方法

1．1 一般資料 隨機(jī)選取2009年1月至2012年1在我院普外科住院經(jīng)過(guò)病理證實(shí)胃癌手術(shù)患者71例，其中男49例、女22例，平均年齡51歲。按國(guó)際抗癌聯(lián)盟TNM組織學(xué)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期3例，Ⅱ期21例，Ⅲ期34例，Ⅳ期13例；高分化腺癌15例，中分化腺癌13例，低分化腺癌43例；另外取正常胃粘膜組織10例。

1.2 主要試劑和方法 兔抗人Shh單克隆抗體、EDTA(PH=9.0)修復(fù)液、超敏SP(鼠/兔)免疫組化染色試劑盒、濃縮型DAB試劑盒等。組織標(biāo)本按照免疫組織化學(xué)染色(SP法)的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行免疫組化染色。每次染色均設(shè)有對(duì)照作為質(zhì)量控制，以PBS替代一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷 Shh蛋白主要在胞漿及細(xì)胞膜中著色，免疫組化結(jié)果按染色強(qiáng)度分為：無(wú)色，淡黃，棕黃色，棕褐色；定義淡黃、棕黃色、棕褐色的組織標(biāo)本為表達(dá)陽(yáng)性，無(wú)色或基本無(wú)色為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，利用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Shh蛋白在胃癌與正常胃組織中表達(dá)如表1。

表1

2.2 Shh蛋白在不同分化程度胃癌中的表，如表2。

表2

2.3 Shh蛋白表達(dá)與胃癌TNM分期的關(guān)系，表3。

表3

3 討論

胃癌在我國(guó)是發(fā)病率和致死率均較高的惡性腫瘤［2］，其發(fā)生是多基因多信號(hào)多系統(tǒng)共同參與的結(jié)果。Sonic Hedgehog信號(hào)通路與胃癌分化、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。Hedgehog信號(hào)通路由三種Hedgeho的同源基因分別是Sonic Hedgehog、Indian Hedgehog和Desert Hedgehog編碼的相應(yīng)蛋白和下游的相關(guān)分子組成，其中Sonic Hedgehog對(duì)哺乳動(dòng)物的骨骼、皮膚、胰腺和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育發(fā)展起到重要作用，并在胃腸生理功能形成和癌變中起作用［3］。研究表明在正常成人體內(nèi)Hedgehog信號(hào)通路不表達(dá)或很少表達(dá)，但在腫瘤組織中可見(jiàn)Hedgehog信號(hào)通路的異常激活，過(guò)多的Shh蛋白表達(dá)使Shh蛋白與Ptch蛋白結(jié)合，解除了Ptch蛋白對(duì)Smo的抑制，Smo被激活，繼而激活轉(zhuǎn)錄因子Gli，進(jìn)而啟動(dòng)下游基因的表達(dá)，Hedgehog信號(hào)通路通路不僅參與了腫瘤的發(fā)生，還在腫瘤的分化與侵潤(rùn)中起作用［4］。

本研究表明，Shh蛋白在胃癌組織中表達(dá)明顯高于正常胃組織，具有顯著性意義，并且在低分化胃癌的表達(dá)高于高中分化胃癌組織的表達(dá)，且TNM分期越差表達(dá)陽(yáng)性率越高，顯示Shh蛋白有可能作為胃癌的診斷標(biāo)志物之一，并有可能成為基因治療的靶位點(diǎn)。

［1］ Samarzija I，Beard P．Hedgehog pathway regulators influence cervical cancer cell proliferation，survival and migration．Biochem Biophys Res Commun，2012，425(1)：64-69.

［2］ 陳建國(guó)，陸建華．國(guó)內(nèi)外癌癥防治現(xiàn)狀．腫瘤，2007，9．

［3］ Merchant JL．Epub 2011 Dec 5.Hedgehog signalling in gut development，physiology and cancer．J Physiol，2012，590(Pt 3)：421-432.

［4］ Lee SY，Han HS，Lee KY，et al．Sonic hedgehog expression in gastric cancer and gastric adenoma．Oncol Rep，2007，17(5)：1051-1055.