張仁芳，金 陽，施關林

(1.浙江紹興大地園藝有限公司，浙江 紹興 312000;2.紹興文理學院，浙江 紹興 312000;3.紹興市越城區(qū)農(nóng)技推廣中心，浙江紹興 312000)

橘皮具有理氣健脾、燥濕化痰、抗菌、平喘、抗胃潰瘍、抗腫瘤等多種藥理作用［1－3］，其主要成份是D-檸檬烯。通過D-檸檬烯對果蠅的熏蒸作用、趨避作用、觸殺作用等生物活性作用的研究，旨在為深入了解和開發(fā)橘子皮源綠色農(nóng)藥以及 D-檸檬烯功能性產(chǎn)品提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

果蠅由紹興文理學院生命科學學院提供蛹，經(jīng)室內(nèi)飼養(yǎng)后挑選整齊一致的初期幼蟲供試。試劑有D-檸檬烯 (標準分析純)，無水乙醇，A溶液2%D-檸檬烯乙醇溶液，B溶液4%D-檸檬烯乙醇溶液，C溶液6%D-檸檬烯乙醇溶液等;飛利浦二合一攪拌機 (珠海經(jīng)濟特區(qū)飛利浦家庭電器有限公司)及玻璃儀器若干。

1.2 生物活性的測定

測定方法參考文獻 ［4］。

1.2.1 驅(qū)避作用

將20只果蠅用乙醚麻醉之后置于紗布隔層之間，待到乙醚對果蠅的麻醉作用消失以后，分別把果蠅連同紗布一起置于事先裝有15 mL不同D-檸檬烯濃度的乙醇溶液培養(yǎng)皿上，再將其整個放入2 L的大燒杯內(nèi)，大燒杯口用保險膜密封，保險膜上刺孔，保證燒杯內(nèi)空氣的流通。于藥后4 h檢查試蟲逃離以及死亡情況，同時用乙醇做對照試驗。

1.2.2 觸殺毒力作用

先用乙醚麻醉果蠅，再分別用不同濃度的D-檸檬烯乙醇溶液用毛細管將試液點滴于果蠅體背，每種試劑處理10頭，處理后的果蠅放在培養(yǎng)皿濾紙上，置溫室條件下飼養(yǎng)，觀察果蠅受試液接觸后的反應，同時用乙醇做對照試驗。

1.2.3 熏蒸作用

將10頭果蠅用培養(yǎng)基飼養(yǎng)在12 cm×1.5 cm培養(yǎng)皿中，用紗布扎口，在另一同樣大小的培養(yǎng)皿底部墊上直徑9 cm的濾紙，濾紙分別滴加不同濃度的D-檸檬烯乙醇溶液，迅速將2培養(yǎng)皿對合，試蟲皿在上，藥皿在下，并用透明膠布將接合處封嚴，置于室溫條件下飼養(yǎng)，觀察果蠅反應，同時用乙醇做對照試驗。

2 結果與分析

2.1 驅(qū)避作用

由表1可知，果蠅在酒精的長期熏蒸下，會從紗布的小孔中努力鉆出到紙盒中但是并不能完全逃離。但隨著D-檸檬烯濃度的加大驅(qū)避作用增強。

2.2 觸殺作用

由試驗可知，試蟲在點滴試液后無明顯的中毒反應，先是多動不安，后逐漸活動正常化。隨著時間的延長，果蠅并沒有死去。

由表2可知，120 min時不同處理僅有1～2頭死亡，藥劑和酒精效果無顯著差異。由此可見，各種溶液D-檸檬烯乙醇溶液對果蠅的觸殺效果都很弱。

表1 D-檸檬烯對果蠅的趨避效果

表2 D-檸檬烯對果蠅的觸殺效果

2.3 熏蒸作用

在受到各種試液熏蒸的時候，果蠅大都有局促不安的癥狀。在酒精處理中，果蠅并沒有出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，而在D-檸檬烯的4組溶液的作用下，果蠅漸漸失去活力直至死亡。

由表3可知，盡管D-檸檬烯溶液濃度不一樣，但其同樣具有一定的殺蟲效果，能在較短時間內(nèi)殺死果蠅。

表3 D-檸檬烯對果蠅的熏蒸效果

3 小結

D-檸檬烯乙醇溶液對果蠅有較強趨避性，且隨著濃度增加其驅(qū)避效果逐漸增加。

不同濃度的D-檸檬烯乙醇溶液對果蠅幾乎都沒有觸殺作用。

酒精對果蠅無熏蒸作用，扣除酒精的背景作用，D-檸檬烯對果蠅具有很好的熏蒸效果，且在很短的時間即可達到100%的熏蒸效果。

［1］趙雪梅，朱大元，葉興乾，等．柑橘屬中類黃酮的研究進展 ［J］．天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2002，14(1):89－92．

［2］謝麗瓊，馬東建，薛淑媛，等．維藥刺山柑果實揮發(fā)油和脂肪酸成分的 GC-MS研究 ［J］．食品科學，2007，28(5):262－264．

［3］錢士輝，袁麗紅．柑橘不同入藥部位的成分比較與評價［J］．中藥材，2001，24(9):632．

［4］金陽，何平勇，金玫．莰酮及其衍生物的生物活性 ［J］．農(nóng)藥，2006，45(8):565－566．