阮汝明張學(xué)寧

1.鶴慶縣人民醫(yī)院檢驗科，云南大理671500；2.昆明醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗科，云南昆明650101

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）有多種自身抗體存在，一般認為抗核抗體（ANA），抗ds-DNA抗體對SLE診斷有著重要的價值[1]。為進一步探討ANA與抗ds-DNA抗體的滴度高低與SLE的活動性的關(guān)系，該文報告了2007年6月—2012年6月21例SLE活動期患者與47例SLE非活動期患者的ANA與抗ds-DNA抗體的檢測結(jié)果，探討有關(guān)問題如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

21例活動期患者，全為女性。47例非活動期患者，其中男性患者5例，女性患者42例。全組患者年齡介于12～64歲之間。

1.1.1 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) 所選患者均為確診的SLE患者。其分期標(biāo)準(zhǔn)符合JiangX,Chen,F的標(biāo)準(zhǔn)[2],即ANA、抗ds-DNA、ENA三項抗體均為陽性，且IgG>16.8 g/L，補體C3,C4降低的 患者為活動期患者。凡有一條不符合以上條件的為非活動期患者。

1.2 檢測方法及操作步驟

1.2.1 ANA的檢測方法及操作步驟 ①檢測方法：用間接免疫熒光法（IIF）檢測ANA。采用ANA檢測試劑盒，其每個反應(yīng)測試區(qū)都有人上皮細胞（HEP-2）和靈長類肝冰凍組織切片。②操作步驟：將待測血清用 PBS-T ween緩沖液稀釋為 1：100、1：1000等不同稀釋度，然后加樣25 uL于反應(yīng)區(qū)上，在室溫下溫育30 min后，用PBS-T ween緩沖液沖洗并浸泡1 min以上，然后加20uL IgG熒光抗體至反應(yīng)區(qū)上，同前溫育及沖洗。最后滴加甘油-PBS封片，置于熒光顯微鏡下觀察。

1.2.2 抗ds-DNA抗體的檢測方法及操作步驟 ①檢測方法：用金標(biāo)免疫斑點法測抗ds-DNA抗體。采用抗ds-DNA抗體檢測試劑盒。②操作步驟：加TBS緩沖液2滴于反應(yīng)區(qū)→加樣品4滴→去除濾蓋→加膠體金標(biāo)記抗體3滴→加 TBS緩沖液1～2滴→觀察結(jié)果[3]。

1.3 統(tǒng)計方法

2 結(jié)果

2.1 ANA滴度與SLE活動期和非活動期的關(guān)系

21例活動期患者均ANA陽性，陽性率為100%。47例非活動期患者ANA陽性為27例，陰性20例，陽性率為57.4%。兩組比較活動期陽性率明顯高于非活動期（P＜0.05），而且活動期患者抗體的滴度也明顯高于非活動期患者，經(jīng)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表 1。

表1 ANA滴度與SLE活動期、非活動期的關(guān)系

2.2 抗dsDNA抗體滴度與活動期與非活動期的關(guān)系

21例活動期患者抗ds-DNA抗體陽性為21例，陽性率為100%。47例非活動期患者抗ds-DNA抗體陽性為27例，陽性率為57.4%。兩組比較活動期陽性率明顯高于非活動期 （P＜0.05），而且活動期患者抗體的滴度也明顯高于非活動期患者，兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表 2。

表2 抗ds-DNA抗體滴度與SLE活動期、非活動期的關(guān)系

3 討論

ANA是自身對各種細胞核成分產(chǎn)生相應(yīng)抗體的總稱，常見于SLE，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病和干燥綜合癥等，在SLE中包含有抗糖蛋白抗體、抗脫氧核糖核酸（DNA）抗體和抗鹽水可提取性核抗原（ENA）抗體。目前診斷SLE和觀察SLE病情的常見檢測為間接免疫熒光法測定ANA，ANA陽性率及陰性率，在活動期患者與非活動期患者之間有著明顯的差異，且滴度變化也存在明顯的差異[4]。故對患者ANA及抗ds-DNA滴度的檢測可估計SLE患者的病情。但據(jù)謝紅付等的報道[5]，憑借單純的ANA陰性既不能排除SLE的診斷，也不能否定病情的活動性。

抗ds-DNA抗體變化與ANA試驗結(jié)果在一些方面存在一致性，但也不完全等同?？筪s-DNA陽性患者，ANA也為陽性，而抗ds-DNA陰性者，ANA可能為陽性[6]。該研究表明，SLE活動期組患者的抗體滴度顯著大于非活動期組患者，同樣也能用于估計患者的病情及預(yù)后。而徐世正等的報道[7]也指出了ANA、抗ds-DNA的消長同臨床活動有著非常密切的聯(lián)系，因而定期檢查患者抗ds-DNA、ANA等，對于監(jiān)察患者的病情變化，預(yù)測復(fù)發(fā)和指導(dǎo)治療，提供實驗室依據(jù)。

[1] 葉任高，陸再英.內(nèi)科學(xué)[M].5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：909-915.

[2] Jiang X，Chen F.Clin Immunol and Immunol pathology[J].American Journd of patndogy,1992.63(1)：152.

[3] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：655-660.

[4] Maddison PJ,Provost TT,Reichlin M.Serological findings in patients with “ANA-negative”systemic lupus erythematosus[J].Medicine,1981,60(2)：87-94.

[5] 謝紅付，劉稚然，朱武.抗核抗體對系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷與活動性的研究[J].湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1997，22（2）：177-178.

[6] 林海青，龔燕，張紅逵，等.抗核抗體測定診斷SLE的臨床意義[J]山東醫(yī)藥，1991，31（5）：29-91.

[7] 徐世正，李洪迥，王惠珍.抗雙鏈DNA抗體、抗核抗體的消長同SLE臨床表現(xiàn)的關(guān)系[J].中華皮膚科雜志，1983，16（3）：138-142.