付慧敏 歐陽(yáng)江 左鋒華

（江西省血液中心 南昌330046）

輸血技術(shù)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)不可或缺的重要治療手段，目前的血液檢測(cè)由于受檢測(cè)技術(shù)、檢測(cè)項(xiàng)目等因素的影響，無(wú)法完全阻斷經(jīng)血液傳播疾病的發(fā)生，血漿病毒滅活技術(shù)能有效地阻斷經(jīng)輸血傳播病毒的傳播。本中心自2009年7月開(kāi)始全面推廣應(yīng)用亞甲藍(lán)病毒滅活血漿成分，在這期間對(duì)血漿進(jìn)行亞甲藍(lán)病毒滅活前、滅活后的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)分析，經(jīng)臨床使用取得滿意的療效?，F(xiàn)報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 材料 醫(yī)用病毒滅活箱（上海輸血技術(shù)有限公司），無(wú)菌接合機(jī)（日本泰爾茂公司），一次性使用滅活輸血過(guò)濾器材（上海輸血技術(shù)有限公司），一次性熔接片（日本泰爾茂公司），BACTBC9050全自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)儀，721分光光度計(jì)，SUPELCO.VISIPREPTM亞甲藍(lán)濾取裝置，收集來(lái)自南昌地區(qū)5家綜合醫(yī)院住院期間輸注亞甲藍(lán)病毒滅活血漿3次以上的輸血漿患者200例情況，由醫(yī)生和護(hù)士記錄報(bào)告給本中心。

1.2 亞甲藍(lán)病毒滅活血漿成分制備 采用一次性使用病毒滅活輸血過(guò)濾器在無(wú)菌接管機(jī)上通過(guò)無(wú)菌熔接片與本中心制備好的普通冰凍血漿相連接，將血漿緩緩轉(zhuǎn)移至一次性使用病毒滅活輸血過(guò)濾器材中的光照袋中，在此過(guò)程中亞甲藍(lán)也隨血漿緩緩加入到光照袋中，直至全部轉(zhuǎn)移完成。隨后將光照袋放入醫(yī)用滅活箱進(jìn)行可見(jiàn)光光照，光照強(qiáng)度30 000-35 000 LUX，時(shí)間為35m in，溫度恒定在2～6℃，且整個(gè)過(guò)程都在水平振動(dòng)，以確保在可見(jiàn)光光照下亞甲藍(lán)與血漿充分混合，達(dá)到病毒滅活的作用。光照結(jié)束后，再將血漿進(jìn)行過(guò)濾，將光照袋中的血漿通過(guò)病毒滅活輸血過(guò)濾器（光照袋自帶）過(guò)濾，濾除血漿中的亞甲藍(lán)。病毒滅活輸血過(guò)濾器是一種血漿過(guò)濾器，用于濾除臨床使用的亞甲藍(lán)病毒滅活血漿中殘留病毒滅活劑亞甲藍(lán)和可能攜帶病毒的白細(xì)胞，屬于一次性使用醫(yī)療用品[1]。過(guò)濾完成，血漿流入終產(chǎn)品袋中，熱合封口，留樣進(jìn)行檢測(cè)。每次滅活后留取5份樣本進(jìn)行檢測(cè)，目前本中心只對(duì)普通冰凍血漿進(jìn)行滅活，共留取140份標(biāo)本。依據(jù)《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-全血及成分血質(zhì)量要求》，主要測(cè)定：（1）血漿蛋白含量，亞甲藍(lán)殘留量和無(wú)菌試驗(yàn)；（2）病毒滅活效果的測(cè)定：委托上海血液中心上海輸血研究所輸血傳染病研究室進(jìn)行病毒滅活效果檢測(cè)。采用啖皰疹病毒（VSV）和Sindbis病毒作為指示病毒，以細(xì)胞病變法檢測(cè)滅活前后病毒滴度，Vero細(xì)胞作為指示細(xì)胞，病毒滴度按Karber法計(jì)算。

2 結(jié)果

2.1 病毒滅活效果 見(jiàn)表1。Sindbis病毒滅活前病毒滴度（lgTCID50/m L）為 4.5～6.5，滅活后為 0.5；VSV病毒滅活前病毒滴度為4.5～6.5，滅活后為0.5，病毒降低量均≥4，病毒滅活效果符合國(guó)家規(guī)定要求[2]。

表1 病毒檢測(cè)結(jié)果

2.2 亞甲藍(lán)病毒滅活后血漿（普通血漿）質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表2。完全符合《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-全血及成分血質(zhì)量要求》GB18469-2012對(duì)病毒滅活冰凍血漿質(zhì)量控制的要求。質(zhì)量指標(biāo)：血漿容量及血漿蛋白含量、亞甲藍(lán)最終殘留量均能達(dá)到質(zhì)量要求。亞甲藍(lán)殘留量根據(jù)臨床輸注量，用最大濃度輸注量不超過(guò)臨床較低劑量0.5%，屬于安全的劑量范圍內(nèi)。

表2 病毒滅活冰凍血漿質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果

3 討論

當(dāng)前輸血存在兩大風(fēng)險(xiǎn)，即輸血免疫反應(yīng)和輸血疾病的傳播。血站在防止經(jīng)輸血的疾病傳播投入很大，對(duì)常見(jiàn)的傳播性病毒采取不同試劑不同人員檢測(cè)兩次來(lái)把關(guān)，這種做法仍存在風(fēng)險(xiǎn)，疾病處于窗口期，試劑靈敏度和操作人員因素都可能導(dǎo)致病毒傳播的發(fā)生，還有很多沒(méi)有被要求檢測(cè)的病毒都可能在輸血過(guò)程中發(fā)生傳播。據(jù)報(bào)道[3]，采用血清學(xué)試驗(yàn)方法，美國(guó)輸血傳播HBV、HCV和HIV病毒感染的殘余風(fēng)險(xiǎn)分別為1/63 000、1/103 000和1/493 000。目前我國(guó)國(guó)內(nèi)乙肝感染和攜帶人數(shù)已達(dá)到1.3億，占全國(guó)人口數(shù)近10%，HIV的感染和攜帶也不容樂(lè)觀，輸血后丙肝感染率也是與日俱增，檢測(cè)方法一直都是血清學(xué)試驗(yàn)為主，因此輸血后病毒傳播風(fēng)險(xiǎn)是無(wú)法避免的。

應(yīng)用亞甲藍(lán)進(jìn)行病毒滅活能夠有效地抑制輸血傳播病毒，其原理：亞甲藍(lán)是臨床用于亞硝酸及氰化物中毒的解毒劑，它能在可見(jiàn)光誘導(dǎo)下使氧化損傷病毒的核酸斷裂，包膜破損，從而使病毒失去感染能力。血漿中沒(méi)有細(xì)胞等有形成分，可能殘存的病毒含量高，應(yīng)用亞甲藍(lán)病毒滅活技術(shù)處理方便，無(wú)殘留，不影響血漿中其它成分的含量和功能。

[1]張霞,周雯,王友森.環(huán)氧乙烷在滅菌物品中殘留量測(cè)定及毒性研究進(jìn)展[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2005,22(2):217-218

[2]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部,中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2012.11

[3]Schreiber GB,Busch MP,Kleinman SH,et al.The risk of transfusion-transmitted viral infections.The retrovirus epidemiology donor study[J].N Engl JMed,1996,334(26):1 685-1 690