夏明萬，李青

（郴州市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，湖南郴州423000）

細菌性腦膜炎患兒腦脊液和血清中TNF-α和IL-1β的表達及其臨床意義

夏明萬，李青

（郴州市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，湖南郴州423000）

目的觀察急性期細菌性腦膜炎(BM)和病毒性腦膜炎(VM)患兒血清和腦脊液中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）的水平變化，探討其臨床意義。方法收集在本院治療的BM患兒22例、VM患兒18例的急性期腦脊液和血清。采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測兩組對象血清和腦脊液中TNF-α和IL-1β的表達水平。結(jié)果BM組腦脊液TNF-α及IL-1β水平明顯高于VM組（P＜0.05），BM組血清TNF-α水平明顯高于VM組（P＜0.05），BM組和VM組血清IL-1β的變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。BM腦脊液TNF-α及IL-1β水平呈明顯正相關(guān)(r=0.635)。結(jié)論腦脊液和血清TNF-α與IL-1β的聯(lián)合檢測可以用于對BM患兒的鑒別診斷。

細菌性腦膜炎；腫瘤壞死因子α；白細胞介素-1β

細菌性腦膜炎(Bacterial meningitis，BM)均為化膿菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，是一種發(fā)病迅速的疾病。BM患兒大多有典型癥狀，但是臨床上有些發(fā)病常不伴有典型癥狀和體征，而是出現(xiàn)易激或嗜睡。實驗室腦脊液(CSF)檢查的內(nèi)容包括白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、蛋白含量、糖及氯化物濃度等，但是這些都只能作為參考，因此需要行之有效及更為準確的方法進行鑒別診斷。

IL-1β是一種細胞因子，具有促炎、促凝功能，在機體免疫調(diào)控中發(fā)揮重要作用，眾多研究已表明其參與機體炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答等過程。研究表明其在成人牙周炎患者牙齦組織中表達明顯高于正常組織[1]。另有研究證實腦脊液中TNF-α與IL-1β在BM中水平升高[2]。本文擬通過檢測腦膜炎患兒腦脊液中TNF-α與IL-1β的水平以評估TNF-α、IL-1β及聯(lián)合檢測在腦膜炎患兒鑒別診斷中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2009年7月至2011年12月來我院就診的BM患兒22例，男12例，女10例，年齡2～9歲；其臨床癥狀表現(xiàn)為持續(xù)性或短暫性發(fā)熱、頭痛、嘔吐者14例，煩躁、嗜睡者6例，并發(fā)意識障礙者2例。選擇18例同期入院的病毒性腦膜炎(Viral meningitis，VM)患兒18例，男11例，女7例，年齡2～12歲。兩組患兒的年齡、性別比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。診斷標準符合《諸福棠實用兒科學(xué)》第7版BM、VM診斷標準[3]。

1.2TNF-α及IL-1β的檢測方法通過腰椎穿刺采集未經(jīng)治療的患者腦脊液(Cerebrospinal Fluid，CSF)標本，除送檢常規(guī)、生化、細胞學(xué)等指標查外，同時收集外周靜脈血5 ml，離心15 min，留取上清液-80℃儲存?zhèn)溆谩NF-α及IL-1β測定采用ELISA方法(Ray-Biotech公司)，按照試劑盒說明書進行檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x-±s)表示，非配對t檢驗分析組間各指標的差異性。P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒腦脊液TNF-α與IL-1β水平BM組腦脊液TNF-α的均值為(0.88±0.11)pg/L，VM組為(0.49±0.07)pg/L，統(tǒng)計分析顯示BM組TNF-α明顯高于VM組(P＜0.05)。BM組腦脊液中IL-1β平均為(383.6±32.9)ng/ml，VM組平均為(159.8±19.8)pg/ml，統(tǒng)計分析顯示BM組IL-1β明顯高于VM組(P＜0.05)，見表1。提示BM組中TNF-α與IL-1β均顯著高于VM組。

表1 兩組患兒的腦脊液TNF-α與IL-1β水平比較

表1 兩組患兒的腦脊液TNF-α與IL-1β水平比較

組別BM組VM組t值P值例數(shù)22 18 TNF-α(pg/L) 0.88±0.11 0.49±0.07 3.978＜0.05 IL-1β(ng/L) 383.6±32.9 159.8±19.8 4.658＜0.05

2.2 兩組患兒的血清TNF-α與IL-1β水平比較BM組血清TNF-α的均值為(27.8±2.6)pg/L，VM組為(14.9±1.5)pg/L，統(tǒng)計分析顯示BM組TNF-α明顯高于VM組(P＜0.05)。BM組腦脊液中IL-1β平均為(22.7±2.4)ng/ml，VM組平均為(18.9±1.8)pg/ml，統(tǒng)計分析顯示BM組與VM組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 兩組患兒的血清TNF-α與IL-1β水平比較

表2 兩組患兒的血清TNF-α與IL-1β水平比較

組別BM組VM組t值P值例數(shù)22 18 TNF-α(pg/L) 27.8±2.6 14.9±1.5 4.552＜0.05 IL-1β(ng/L) 22.7±2.4 18.9±1.8 0.895＞0.05

2.3 相關(guān)性分析急性期BM組腦脊液TNF-α與IL-1β呈正相關(guān)(r=0.635，P＜0.05)。BM組血清TNF-α與IL-1β無相關(guān)性(r=0.178，P＞0.05)。VM組腦脊液TNF-α與IL-1β無相關(guān)性(r=0.028，P＞0.05)。VM組血清TNF-α與IL-1β無相關(guān)性(r=0.034，P＞0.05)。

3 討論

在細菌性腦膜炎的早期診斷中，常規(guī)的實驗室檢查可能會誤診。腦脊液F白細胞計數(shù)低于100/μl提示病情嚴重，而腦脊液白細胞分類并不是十分準確的診斷標準，因為當白細胞計數(shù)低于1 000/μl時，30%的患者會出現(xiàn)淋巴細胞增多[4]。因此，潛在的診斷生物學(xué)靶點可能為細菌性腦膜炎的診斷提供很大幫助。

有研究表明，TNF-α可誘導(dǎo)多種細胞因子的產(chǎn)生，引起發(fā)熱、休克，還可使內(nèi)皮細胞活化而導(dǎo)致血管通透性增加[5]，幼兒發(fā)生急性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時，TNF-α水平明顯增高，并且與病情密切相關(guān)[6]。IL-1β是典型的致炎細胞因子[7]，在正常情況下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)僅有微量的IL-1β以及其受體表達，但在顱腦損傷和顱內(nèi)感染致腦損傷等病理情況下，IL-1β的水平及活性明顯增高[8]。

本研究證實，腦脊液和血清中TNF-α在細菌性腦膜炎組顯著高于病毒性腦膜炎，說明TNF-α在細菌性腦膜炎的診斷中具有重要作用。同時本研究還證實，腦脊液IL-1β在細菌性腦膜炎患兒中顯著高于病毒性腦膜炎。相關(guān)性分析顯示TNF-α與IL-1β中度相關(guān)，說明TNF-α與IL-1β聯(lián)合診斷細菌性腦膜炎具有較高的靈敏度和特異度，為鑒別診斷新的潛在生物學(xué)靶點。

綜上所述，腦脊液和血清TNF-α與IL-1β的聯(lián)合檢測可以用于對BM患兒的鑒別診斷。

[1]吳亞菲.IL-1β mRNA、TNF-α mRNA在成人牙周炎患者牙齦組織中表達的研究[J].華西口腔醫(yī)學(xué)雜志,2001,19(5):318-321.

[2]Boci?ga-Jasik M,Garlicki A,Cie?la A,et al.The diagnostic value of cytokine and nitric oxide concentrations in cerebrospinal fluid for the differential diagnosis of meningitis[J].Adv Med Sci,2012, 57(1):142-147.

[3]薛辛東.兒科學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:411-420．

[4]Jesse S,Steinacker P,Lehnert S,et al.A proteomic approach for the diagnosis of bacterial meningitis[J].PLoS One.2010,5(4):10079.

[5]黃白麗,馬志超,付姣.IL-18、IL-13與TNF-α在慢性阻塞性肺疾病中的變化及意義[J].海南醫(yī)學(xué),2010,21(22):25-27.

[6]潘雪峰,鄭定容,劉志偉.急性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒IL-6和TNF-α的變化及臨床意義[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2009,6(9):30-31.

[7]周曉莉.IL-1β在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病及治療應(yīng)用中的研究現(xiàn)狀[J].海南醫(yī)學(xué),2010,21(3):101-104.

[8]Chen T,Liu W,Chao X,et al.Salvianolic acid B attenuates brain damage and inflammation after traumatic brain injury in mice[J]. Brain Res Bull,2011,84(2):163-168.

Expressions and significance of TNF-α and IL-1 β in the serum and cerebrospinal fluid of children with bacterial meningitis.

XIA Ming-wan,LI Qing.Department of Neurosurgery,Chenzhou People's Hospital,Chenzhou 423000,Hunan,CHINA

ObjectiveTo evaluate the levels of TNF-α and IL-1β in the serum and cerebrospinal fluid of children with bacterial meningitis(BM)and those with virus meningitis(VM).MethodsSerum and cerebrospinal fluid samples were collected from 22 children with BM(BM group)and 18 children with VM(VM group).The levels of TNF-α and IL-1β in the samples were evaluated by ELISA.ResultsThe levels of B7-H3 and IL-1β in cerebrospinal fluid of BM group were significantly higher than those of VM group(P＜0.05).The levels of TNF-α in serum of BM group was significantly higher than that of VM group(P＜0.05).The levels of IL-1β in serum of BM and VM group showed no statistically significant difference(P＞0.05).The levels of TNF-α and IL-1β in cerebrospinal fluid of BM group were positively correlated(r=0635,P＜0.05).ConclusionCombined test of TNF-α and IL-1β could be used for the differential diagnosis of children with bacterial meningitis.

Bacterial meningitis;TNF-α;IL-1β

R725

A

1003—6350（2013）09—1318—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.09.0555

2012-11-22)

夏明萬。E-mail：5645033@qq.com