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        腎虛質(zhì)大鼠免疫相關(guān)因子含量變化與腎藏象理論的相關(guān)性研究*

        2013-07-20 03:20:30孫理軍黨照麗陜西中醫(yī)學(xué)院咸陽(yáng)712046
        陜西中醫(yī) 2013年8期
        關(guān)鍵詞:藏象腎虛批號(hào)

        孫理軍 黨照麗 王 震 陜西中醫(yī)學(xué)院(咸陽(yáng)712046)

        本研究以中醫(yī)學(xué)理論為指導(dǎo),采用貓嚇鼠的經(jīng)典造模方法[1],造成具有中醫(yī)體質(zhì)理論特色的腎虛質(zhì)動(dòng)物模型,并在大量文獻(xiàn)研究和臨床研究的基礎(chǔ)上,將腎藏象理論和現(xiàn)代免疫學(xué)知識(shí)結(jié)合,提出了腎虛體質(zhì)防御、修復(fù)適應(yīng)能力降低與免疫功能失調(diào)密切相關(guān)的假設(shè),從差異性角度研究腎藏象理論,根據(jù)腎虛體質(zhì)的生理病理特點(diǎn),結(jié)合前期研究成果,以及細(xì)胞因子在免疫調(diào)節(jié)中的作用特性,進(jìn)一步篩選出腎虛質(zhì)的特異血清免疫分子標(biāo)志物,為腎藏象理論的現(xiàn)代研究提供范式,豐富和發(fā)展腎藏象理論。

        1 實(shí)驗(yàn)材料 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 3月齡SPF級(jí)SD 雄性大鼠30只,體重350g±20g,3月齡SPF級(jí)SD 雌性大鼠30只,體重250g±20g,購(gòu)自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,生產(chǎn)許可證是SCXK(陜)2007-001,自由飲食飲水,室溫飼養(yǎng)。3月齡貓2只,兇狠善叫,喂食鮮活大鼠,室溫飼養(yǎng)。

        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑 桂附地黃丸(原名金匱腎氣丸,蘭州佛慈制藥有限公司提供,批號(hào)10c7,每丸含生藥量0.375g),水合氯醛(上海山浦化工有限公司,批號(hào):20090205),氯化鈉注射液(西安京西雙鶴藥業(yè)有限公司,批號(hào)091116122),無(wú)水乙醇(天津市紅巖化學(xué)試劑廠(chǎng),批號(hào)20091016),IFN-γ、TNFα、IL-6ELISA 試劑盒(均由上海西唐生物科技有限公司提供,批號(hào)分別為:1007231,1007181,1007271),IL-10ELISA 試劑盒(由武漢博士德生物工程有限公司提供,批號(hào)為:138658)

        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及耗材 全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國(guó)Bio-Tek ELX808IU),電子精密天平(美國(guó)賽多利斯),醫(yī)用低溫冰箱(MDF-330,日本產(chǎn)),全自動(dòng)高壓滅菌器(日本三洋mLS-3780),低速離心機(jī)(科大創(chuàng)新股份有限公司KDC-40),電熱恒溫振蕩水槽(上海一恒科學(xué)儀器有限公司DKZ系列)。

        2 實(shí)驗(yàn)方法 2.1 模型建立 參照我們以往建立腎虛質(zhì)大鼠模型的方法[2],經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周無(wú)異常后,將30只雌性大鼠隨機(jī)分為2組:腎虛質(zhì)雌鼠組20只,正常質(zhì)雌鼠組10只,將雄性大鼠與雌性大鼠按1:1比例合籠配對(duì)5d后,檢測(cè)雌鼠陰栓判斷其是否懷孕,然后將腎虛質(zhì)組孕鼠放于特制大鼠籠內(nèi),于每天定時(shí)進(jìn)行恐嚇,直到其生產(chǎn)為止。正常組孕鼠,不予恐嚇,讓其自然待產(chǎn)。待兩組孕鼠分娩后,將生產(chǎn)的子鼠在不予恐嚇的情況下飼養(yǎng)滿(mǎn)60日齡后進(jìn)行分組,隨機(jī)選取正常組孕鼠所產(chǎn)雄性子鼠8只作為空白組,選取腎虛質(zhì)組孕鼠所產(chǎn)雄性子鼠16只,隨機(jī)分為模型組及藥物組,每組8只。將模型組和藥物組的16 只子代鼠于每日定時(shí)進(jìn)行恐嚇,持續(xù)1 個(gè)月。空白組不予恐嚇,其余時(shí)間各組均置于同一實(shí)驗(yàn)室,保證非處理因素一致。

        2.2 給藥方法 大鼠給藥量按文獻(xiàn)折算[3],大鼠的用藥量約為人的6.25倍。桂附地黃丸每8丸含生藥量為3g,成人每日服生藥量為9g,則大鼠每日服生藥量為0.9375g/kg,用蒸餾水配成0.09375g/mL 混懸液,備用。對(duì)子代鼠恐嚇的同時(shí)開(kāi)始灌胃,藥物組給予桂附地黃丸混懸液,空白組和模型組皆給予等量生理鹽水,10mL/kg,每日1次,共30d。

        2.3 標(biāo)本采集與處理 灌胃60d后分別處死,處死前禁食12h,翌日采用心臟取血方式,取血2mL,然后將其以3000轉(zhuǎn)/分離心15min,分離血清,置離心管內(nèi),保存于-20℃冰箱待測(cè)。

        2.4 指標(biāo)檢測(cè) IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α的檢測(cè):使用美國(guó)Bio-Tek公司產(chǎn)品ELX808IU 型全自動(dòng)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè),試劑盒是采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),具體操作步驟按照R&D 公司的試劑盒說(shuō)明書(shū),進(jìn)行檢測(cè)及計(jì)算。

        3 結(jié) 果各組大鼠血清IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α的比較,見(jiàn)表1

        表1 各組大鼠血清IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α 的比較(±s)

        表1 各組大鼠血清IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α 的比較(±s)

        注:與空白組比較△P<0.05。

        組別n IL-6(pg/mL)IL-10(pg/mL)IFN-γ(pg/mL)TNF-α(pg/mL)空白組8 53.29±37.11 135.91±94.74 49.27±18.55 177.92±67.27模型組8 89.95±37.11 62.59±50.57 27.91±9.51△337.70±80.58△藥物組8 76.72±25.22 107.52±93.60 34.49±10.16 277.48±73.48

        如表1所示,與空白組相比,模型組IL-10、IFN-γ的含量均降低,IL-6、TNF-α含量升高,其中IFN-γ的降低和TNF-α的升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與模型組比,藥物組IL-10、IFN-γ的含量均升高,IL-6,TNF-α含量降低,均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        4 討 論 腎為先天之本,正氣之根,腎中精氣的盛衰是決定機(jī)體正氣強(qiáng)弱的重要因素。腎中精氣充足,則正氣旺盛,機(jī)體能夠抵抗外邪的侵襲,不易發(fā)??;反之,腎中精氣不足,則機(jī)體正氣化生不足,致使防御能力下降,外邪易乘虛侵襲而發(fā)病?,F(xiàn)代研究表明,腎與免疫功能密切相關(guān)[4],細(xì)胞因子的研究進(jìn)展是免疫學(xué)研究中最為突出的成果之一。細(xì)胞因子在免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中起著重要的介質(zhì)作用,它的含量改變必然會(huì)破壞這一網(wǎng)絡(luò)的平衡狀態(tài),進(jìn)而破壞機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定及內(nèi)外環(huán)境的統(tǒng)一,導(dǎo)致疾病的發(fā)生[5]。前期實(shí)驗(yàn)研究表明腎虛質(zhì)與細(xì)胞因子參與免疫應(yīng)答有一定的關(guān)系,為了全面探討腎虛質(zhì)大鼠免疫穩(wěn)態(tài)失衡的分子機(jī)理,可深入研究在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用的細(xì)胞因子,進(jìn)一步篩選出腎虛質(zhì)的特異性免疫分子標(biāo)志物。

        本研究選擇細(xì)胞因子中具有代表性的IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α作為觀察指標(biāo)從分子水平研究其含量變化與腎藏象理論的相關(guān)性。其中IFN-γ和TNF-α是由Th1淋巴細(xì)胞分泌,介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答;IFN-γ、TNF-α由Th2淋巴細(xì)胞分泌,輔助體液免疫應(yīng)答,在過(guò)敏性疾病和感染性疾病中發(fā)揮作用。IFN-γ是重要的免疫調(diào)節(jié)因子,能通過(guò)增強(qiáng)Th1細(xì)胞的活性而增強(qiáng)細(xì)胞免疫;通過(guò)抑制Th2的細(xì)胞增殖而抑制體液免疫。通過(guò)其細(xì)胞表面受體,誘導(dǎo)產(chǎn)生多種蛋白和酶,通過(guò)不同途徑、不同機(jī)制發(fā)揮抗病毒和免疫調(diào)節(jié)作用。IL-10是免疫過(guò)程中重要的負(fù)調(diào)節(jié)因子,具有很強(qiáng)的抗炎和免疫抑制活性,它能抑制IL-6、TNF-α等促炎因子的產(chǎn)生和釋放[6]。TNF-α是炎癥反應(yīng)過(guò)程中出現(xiàn)最早、最重要的炎性介質(zhì),由活化的巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌,能激活中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,使血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性增加,可調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能,參與炎癥多方面病理變化。IL-6也是炎癥反應(yīng)中一種重要的細(xì)胞因子,可促進(jìn)B 細(xì)胞增殖分化,并誘導(dǎo)其分泌抗體,促進(jìn)T 細(xì)胞產(chǎn)生IL-2,并作為致熱原刺激下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞引起機(jī)體發(fā)熱,參與調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答及機(jī)體的炎癥反應(yīng)。

        本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)模型組大鼠IL-6、IL-10、的含量與空白組大鼠比均降低,IL-6、TNF-α含量與空白組大鼠比則升高。IFN-γ則可增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能,而模型組大鼠可見(jiàn)其均降低,反映大鼠在受驚嚇之后機(jī)體免疫功能的降低;IL-6、TNF-α為促炎因子,其血清含量的升高可提示大鼠在長(zhǎng)期受驚嚇的情況下會(huì)導(dǎo)致機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)而產(chǎn)生促炎因子的升高,IL-10是公認(rèn)的抑炎因子,模型大鼠IL-6、TNFα產(chǎn)生增多,IL-10生成減少,出現(xiàn)致炎因子與抑炎因子之間失衡,而致機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂。使用藥物對(duì)模型組大鼠進(jìn)行干預(yù)后,可見(jiàn)IL-10、IFN-γ的含量升高,IL-6,TNF-α含量降低,可證機(jī)體的免疫功能的降低及紊亂得到了一定的糾正。研究結(jié)果表明:腎虛質(zhì)大鼠與細(xì)胞因子參與的免疫應(yīng)答有一定的關(guān)系。

        [1] 王米渠,馬向東,段光周,等.“腎為先天之本”行為遺傳中關(guān)于“恐傷腎”的表征[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,1997,3(4):23-25.

        [2] 孫理軍,李翠娟,王 震,等,腎虛質(zhì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的構(gòu)建方法與評(píng)價(jià)[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2013,24(1):247-249.

        [3] 施新猷.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2000:332-335.

        [4] 孫理軍,郝 蕊,薛 昶,等.腎虛質(zhì)大鼠CD4+、CD8+T 淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)水平的研究[J].陜西中醫(yī),2008,29(12):1671-1672.

        [5] 朱長(zhǎng)庚,李正莉.細(xì)胞因子與免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)[J].解剖學(xué)報(bào),1996,27(4):339-344.

        [6] Skapenko A,Gerald U,Niedobitek,J R,et al.Generation andregulation of human Th1-biased immune responsesin vivo:acritical role for IL-4and IL-10[J].J Immunol,2004,172(10):6427-6434.

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