張建平,彭 朋,薄 海,張 磊,刁秋霞,王大寧,秦永生
在軍事體能訓(xùn)練過(guò)程中,全面系統(tǒng)地對(duì)參訓(xùn)者進(jìn)行運(yùn)動(dòng)醫(yī)務(wù)監(jiān)督,是科學(xué)安排訓(xùn)練方法、確定合理訓(xùn)練負(fù)荷、預(yù)防訓(xùn)練傷病不可或缺的一項(xiàng)工作[1],而探尋簡(jiǎn)便易行的生理生化指標(biāo)是運(yùn)動(dòng)醫(yī)務(wù)監(jiān)督順利開展的重要保證[2]。筆者前期的研究顯示,血乳酸(blood lactic acid,Bla)[3]、肌酸激酶(creatine kinase,CK)[4]和血漿游離DNA(cell-free plasma DNA,cf-DNA)[5]可作為大強(qiáng)度無(wú)氧訓(xùn)練的監(jiān)控指標(biāo),但在訓(xùn)練實(shí)踐應(yīng)用中均存在不足。本研究以90名武警某部戰(zhàn)士為受試對(duì)象,分析武警戰(zhàn)士無(wú)氧訓(xùn)練科目(100 m 跑、400 m 障礙和蛙跳)前后血氨(blood ammonia,BA)的變化及與其他生化指標(biāo)的相關(guān)性,探討B(tài)A 作為軍事體能訓(xùn)練監(jiān)控簡(jiǎn)便易行指標(biāo)的可行性。
1.1 對(duì)象 隨機(jī)選取武警某部戰(zhàn)士90 名,男性,年齡(22.6 ±2. 7)歲,身高(1. 74 ± 0. 05)m,體重(73.1 ±4.2)kg,訓(xùn)練年限(2.5 ±0.7)年。受試者身體健康,無(wú)服藥史,無(wú)心血管疾病、糖尿病、感染、骨關(guān)節(jié)及其他嚴(yán)重疾患病史和家族史。
1.2 分組及訓(xùn)練手段安排 受試者隨機(jī)分為3組,每組30 人,分別進(jìn)行100 m 跑、400 m 障礙和蛙跳訓(xùn)練。訓(xùn)練安排如下,100 m 跑組:100 m×4 次全力跑,共3 組,每次之間間歇90 s,組間間歇3 ~5 min;400 m 障礙組:進(jìn)行2 次400 m 障礙跑,跑次間隔10 ~15 min;蛙跳組:30 m 蛙跳×4 次,每次間隔3 ~5 min。訓(xùn)練過(guò)程中所有受試者均佩戴遙測(cè)心率表(Polar FT1,芬蘭)以記錄心率(heart rate,HR)。
1.3 指標(biāo)測(cè)試 所有受試者在實(shí)驗(yàn)前24 h 內(nèi)均未進(jìn)行過(guò)劇烈運(yùn)動(dòng)。各組訓(xùn)練前和訓(xùn)練后即刻分別取指尖血與靜脈血測(cè)定各生化指標(biāo)。取指尖血20 μl測(cè)定BA(日本產(chǎn)PA-4130 型便攜式血氨分析儀)和Bla(日本產(chǎn)LT-1710 型便攜式血乳酸儀)含量,單位分別為:μmol/L 和mmol/L。肘正中靜脈取血3 ml,于上海產(chǎn)TGL-20M 型臺(tái)式低溫離心機(jī)中以3000 r/min 離心取血漿,測(cè)定血CK 和cf-DNA。CK 活性測(cè)定方法:取20 μl 血漿用酶動(dòng)力學(xué)法測(cè)定血漿CK 活性,試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所,儀器:半自動(dòng)生化分析儀(A6,北京),單位:U/L。cf-DNA 含量測(cè)定方法[6]:用微量基因組DNA提取試劑盒(QIAamp DNA Blood Mini Kit,Qiagen,德國(guó))提取cf-DNA,方法按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。取20 μl cf-DNA 用Quant-iT dsDNA HS 試劑盒和Qubit 熒光儀測(cè)定cf-DNA 含量。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)用SPSS 15.0 統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理。各組訓(xùn)練前后的指標(biāo)比較使用配對(duì)t 檢驗(yàn),BA 與其他各生化指標(biāo)的關(guān)系使用簡(jiǎn)單相關(guān)分析并計(jì)算Pearson 相關(guān)系數(shù)。以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 各組生化指標(biāo)的變化 3 組各指標(biāo)基礎(chǔ)值(訓(xùn)練前水平)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P >0.05)。訓(xùn)練后與訓(xùn)練前比較,100 m 跑組BA、CK、cf-DNA 和HR 均顯著升高(P <0. 01),而Bla 無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)變化(P >0.05);400 m 障礙組和蛙跳組所有指標(biāo)均顯著升高(P <0.01,表1)。
表1 各組體能訓(xùn)練后生化指標(biāo)的變化(n=30;±s)
表1 各組體能訓(xùn)練后生化指標(biāo)的變化(n=30;±s)
注:與本組訓(xùn)練前比較,①P <0.01
組別BA(μmol/L)Bla(mmol/L)CK(U/L)cf-DNA(pg/μl) HR(次/min)100 m 跑組訓(xùn)練前82.2 ±17.31.86 ±0.12175.3 ±56.565.5 ±8.668 ±5訓(xùn)練后239.1 ±18.5①2.19 ±0.67286.5 ±67.9①138.1 ±12.9①189 ±15①400 m 障礙組訓(xùn)練前75.3 ±15.21.75 ±0.16184.6 ±45.872.6 ±9.866 ±3訓(xùn)練后186.6 ±27.9①12.41 ±2.98①365.8 ±58.4①186.2 ±21.1192 ±17①蛙跳組訓(xùn)練前78.8 ±19.41.69 ±0.30194.3 ±64.375.0 ±12.670 ±8訓(xùn)練后194.6 ±30.1①7.71 ±1.25①415.2 ±85.0①285.7 ±32.6①185 ±14①
2.2 BA 與其他生化指標(biāo)的相關(guān)分析 100 m 跑組BA 與CK、cf-DNA 均呈顯著正相關(guān)(P <0.05 或P<0.01),而與Bla 無(wú)顯著相關(guān)性(P >0.05);400 m障礙組和蛙跳組BA 與Bla、CK、cf-DNA 均呈顯著正相關(guān)(均為P <0.01)。見表2。
表2 體能訓(xùn)練后BA 與其他生化指標(biāo)的相關(guān)分析
在士兵體能訓(xùn)練中,典型的無(wú)氧訓(xùn)練項(xiàng)目包括100 m 跑、400 m 障礙和力量訓(xùn)練(如蛙跳)。無(wú)氧訓(xùn)練中產(chǎn)生的主要代謝產(chǎn)物是Bla 和BA。通常情況下,以Bla 濃度評(píng)定糖酵解供能能力和功率,以BA 的濃度評(píng)定ATP-CP 系統(tǒng)供能能力和功率,對(duì)這兩種物質(zhì)的監(jiān)測(cè)是無(wú)氧訓(xùn)練強(qiáng)度的主要生化監(jiān)控手段[3]。本研究中,100 m 跑組訓(xùn)練后BA 顯著升高,而Bla 變化不大,BA 與Bla 無(wú)顯著相關(guān)性,說(shuō)明100 m 跑屬于典型磷酸原系統(tǒng)供能的無(wú)氧訓(xùn)練科目,BA 可用于監(jiān)測(cè)其訓(xùn)練負(fù)荷。正常生理?xiàng)l件下,血液中氨主要以氨離子(NH4+)形式存在,游離形式的比例小于5%。BA 水平是氨進(jìn)入血液和從中消除的綜合反映。安靜時(shí)人體內(nèi)血氨保持相對(duì)較低的水平,肝可以有效的消除。短時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)氨基酸代謝過(guò)程產(chǎn)生的氨很少,骨骼肌中的氨主要由腺酐酸脫氨酶催化AMP 脫氨生成[7],氨進(jìn)入血液引起體內(nèi)氨的生成和消除平衡被破壞,使BA 水平升高。所以,短時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)BA 水平的變化,反映磷酸原系統(tǒng)的代謝平衡狀況。400 m 障礙組和蛙跳組在訓(xùn)練后BA 和Bla 均顯著升高,且BA 與Bla呈正相關(guān),說(shuō)明上述科目屬于磷酸原與糖酵解混合供能的無(wú)氧訓(xùn)練方式,BA 與Bla 均可監(jiān)測(cè)其運(yùn)動(dòng)負(fù)荷大小。由于便攜式乳酸儀一次只能測(cè)試一個(gè)樣品,測(cè)試時(shí)需要多個(gè)乳酸儀,而一臺(tái)便攜式血氨測(cè)試儀則可多個(gè)樣品同時(shí)測(cè)試,因此,可用BA 代替Bla對(duì)此類科目進(jìn)行機(jī)能監(jiān)控。此外,有研究表明,BA水平隨運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的遞增明顯升高,當(dāng)運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度高于BA 上升的臨界強(qiáng)度(HR 處于180 次/min 左右)時(shí),AMP 脫氨基作用顯著增強(qiáng)[8]。本實(shí)驗(yàn)中,各科目訓(xùn)練后所有受試者HR 均高于180 次/min,因此可將BA 作為監(jiān)測(cè)無(wú)氧訓(xùn)練運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的理想指標(biāo)。
研究證實(shí),CK[4]和cf-DNA[5]均是監(jiān)測(cè)軍事訓(xùn)練強(qiáng)度和肌肉損傷的重要指標(biāo)。大強(qiáng)度劇烈運(yùn)動(dòng)通過(guò)機(jī)械牽拉及誘導(dǎo)肌細(xì)胞內(nèi)能量代謝紊亂造成肌節(jié)降解、膜通透性增加,細(xì)胞內(nèi)附于肌節(jié)的CK 漏出入血從而造成血CK 增高[9];同時(shí)伴有氧化應(yīng)激導(dǎo)致肌細(xì)胞DNA 損傷甚至凋亡與壞死[10],DNA 片段釋放入血形成cf-DNA[11,12]。在本研究中,CK 與cf-DNA 在各組訓(xùn)練后均顯著升高,與本課題組前期的研究一致[3,5]。由于CK 和cf-DNA 測(cè)定只能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)完成且需要較長(zhǎng)時(shí)間,限制了其在軍事訓(xùn)練中的應(yīng)用。筆者發(fā)現(xiàn),各訓(xùn)練科目前后BA 與CK、cf-DNA 均顯著正相關(guān),進(jìn)一步提示BA 不僅可作為訓(xùn)練負(fù)荷監(jiān)控的標(biāo)志物,而且其檢測(cè)設(shè)備具有便攜、簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、快捷、有效等特點(diǎn),在訓(xùn)練過(guò)程中可迅速反饋機(jī)體生理變化的信息,以便教練員及時(shí)調(diào)整訓(xùn)練負(fù)荷,避免訓(xùn)練傷病的發(fā)生。
[1] 秦永生,彭 朋. 在武警戰(zhàn)士體能訓(xùn)練中建立以醫(yī)務(wù)監(jiān)督為核心的科學(xué)施訓(xùn)方案[J]. 武警醫(yī)學(xué),2011,22(10):829-832.
[2] 彭 朋,薄 海,王大寧,等. 連續(xù)3 d 大負(fù)荷軍事訓(xùn)練對(duì)武警戰(zhàn)士淋巴細(xì)胞亞群的影響[J]. 武警醫(yī)學(xué),2012,23(11):941-943.
[3] 雷志勇,秦永生,吳志東,等. 一次大強(qiáng)度體能訓(xùn)練對(duì)戰(zhàn)士某些生化指標(biāo)的影響[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2007,32(8):877-878.
[4] 彭 朋,薄 海,陳 鋒,等. 血清肌酸激酶在軍事訓(xùn)練中的應(yīng)用展望[J]. 中國(guó)急救復(fù)蘇與災(zāi)害醫(yī)學(xué)雜志,2011,6(4):355-357.
[5] 彭 朋,薄 海,張 磊,等. 長(zhǎng)期軍事訓(xùn)練對(duì)氧化應(yīng)激水平和DNA 損傷的影響[J]. 中國(guó)急救復(fù)蘇與災(zāi)害醫(yī)學(xué)雜志,2011,6 (11):948-950.
[6] Kadam S K,F(xiàn)armen M,Brandt J T. Quantitative measurement of cell-free plasma DNA and applications for detecting tumor genetic variation and promoter methylation in a clinical setting[J]. J Mol Diagn,2012,14(4):346-356.
[7] Yges C,Urena R,Leon C,et al. Blood ammonia response during incremental and steady-state exercise in military staff[J]. Aviat Space Environ Med,1999,70(10):1007-1011.
[8] Bassini-Cameron A,Monteiro A,Gomes A,et al.Glutamine protects against increases in blood ammonia in football players in an exercise intensity-dependent way[J]. Br J Sports Med,2008,42(4):260-266.
[9] Kenney K,Landau M E,Gonzalez R S,et al. Serum creatine kinase after exercise:drawing the line between physiological response and exertional rhabdomyolysis[J]. Muscle Nerve,2012,45(3):356-362.
[10] Kruger K,F(xiàn)rost S,Most E,et al. Exercise affects tissue lymphocyte apoptosis via redox-sensitive and Fasdependent signaling pathways[J]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2009,296(5):R1518-1527.
[11] Fatouros I G,Jamurtas A Z,Nikolaidis M G,et al.Time of sampling is crucial for measurement of cell-free plasma DNA following acute aseptic inflammation induced by exercise[J]. Clin Biochem,2010,43(16-17):1368-1370.
[12] Beiter T,F(xiàn)ragasso A,Hudemann J,et al. Short-term treadmill running as a model for studying cell-free DNA kinetics in vivo[J]. Clin Chem,2011,57(4):633-636.