林啟權(quán)

（廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系，廣西 南寧 530023）

灰毛漿果楝提取物對菜青蟲拒食活性的初步研究

林啟權(quán)

（廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系，廣西 南寧 530023）

對灰毛漿果楝根的95%乙醇提取物分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等進行萃取獲得各部分萃取物，分別對菜青蟲進行拒食活性測試，結(jié)果顯示灰毛漿果楝根的95%乙醇提取物的石油醚和氯仿萃取部分對菜青蟲具有較好的拒食活性。

灰毛漿果楝；菜青蟲；拒食活性

防治害蟲一直是人類存在以來的課題，化學(xué)合成農(nóng)藥的問世，是人類同害蟲斗爭史上的一個里程碑。雖然化學(xué)農(nóng)藥的出現(xiàn)有它不可比擬的優(yōu)勢，但化學(xué)農(nóng)藥的大量應(yīng)用，也帶來了種種弊端，導(dǎo)致害蟲抗藥性的產(chǎn)生、環(huán)境的污染、人獸的中毒、生態(tài)平衡的破壞等等問題。隨著人們健康意識和環(huán)保意識的提高，人們越來越重視農(nóng)產(chǎn)品的安全性，努力開發(fā)新型植物源農(nóng)藥已經(jīng)成為趨勢。

在豐富的植物資源中，楝科植物中含有大量的活性成分,在藥用和殺蟲等方面都具有獨特的效果,是目前研究比較深入的植物種類之一。楝科（Meliaceae）在全球共有50屬550種以上，楝科植物中的次生物質(zhì)對許多重要農(nóng)業(yè)害蟲具有觸殺胃毒，拒食及抑制生長發(fā)育的作用，其中印楝屬的印楝和楝屬的苦楝，川楝都含有殺蟲活性成分,可作為植物源殺蟲劑的首選植物，楝科植物有很多種，必定有很多有待開發(fā)，灰毛漿果楝就是其中一種?；颐珴{果楝（Cipadessa cinerascens（Pell.） Hand.-Mazz.），又名亞洛輕、假茶辣等，為楝科漿果楝屬植物。分布廣西、四川、貴州、云南等地。其根和葉入藥，為常用傣藥，有祛風(fēng)化濕、行氣止痛的功效，主治傷風(fēng)感冒、風(fēng)濕麻痹、痢疾、腹痛、燙傷、及皮膚燒癢等癥[1]從灰毛漿果楝中報道的化學(xué)成分主要為黃酮苷[2-4]。從同屬植物中發(fā)現(xiàn)了二萜[5-6]，甾體，香豆素，脂肪醇[7]和四降三萜等多種成分。為了尋找得到更多具有植物源農(nóng)藥作用的物質(zhì)，本實驗采用楝科的漿果屬植物灰毛漿果楝，對菜青蟲的拒食作用進行初步研究，進而為開發(fā)利用這一植物提供信息。

表2 灰毛漿果楝的氯仿提取液對菜青蟲的拒食活性

表3 灰毛漿果楝的石油醚萃取物對菜青蟲的拒食活性

1 材料與方法

1.1 供試材料

灰毛漿果楝根，（Cipadessa cinerasc（Pell.）Hand.-Mazz.）2005年10月采自四川省攀枝花市鹽邊縣菁河鄉(xiāng)，由中科院成都生物研究所趙佐成研究員鑒定，標(biāo)本（A-186）保存于中國科學(xué)院成都生物研究所天然產(chǎn)物中心。自然干燥后用植物粉碎機粉碎后備用。

1.2 實驗對象

菜青蟲Piseris rapaeL.。采自廣西南寧市郊，沒有施用過任何農(nóng)藥的甘藍(lán)農(nóng)田。室內(nèi)飼養(yǎng)兩天以上，試驗時挑選大小一致發(fā)育整齊的3齡幼蟲，實驗前將試蟲饑餓6h。以甘藍(lán)葉為飼料。

1.3 實驗方法

1.3.1 供試藥液制備

將灰毛漿果楝供試樣品用95%乙醇充分浸泡兩周后，浸泡液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45℃減壓濃縮得總浸膏。將總浸膏溶于1 L 50℃的水中，依次用和水等體積的石油醚、氯仿、乙酸乙紙、正丁醇萃取得不同萃取部分，分別減壓濃縮后得萃取浸膏。以50%丙酮為溶劑配置成不同濃度備用。

1.3.2 拒食活性測定

樣品液按梯度稀釋后將30.00 g新鮮的甘藍(lán)葉的小葉片放入供試樣品的丙酮溶液中浸漬2～3 s，自然揮發(fā)后放入養(yǎng)蟲缸內(nèi)。對照用50%丙酮。給處理組中的菜青蟲飼喂樣品液處理過的葉片，對照組飼喂對照液丙酮處理過的葉片。挑選大小一致并饑餓6 h適齡試蟲幼蟲，每養(yǎng)蟲缸內(nèi)放置20頭，分別于處理后24 h 、48 h觀察，另外考慮到菜葉有水分的自由揮發(fā)，另取一養(yǎng)蟲缸放上等質(zhì)量的菜葉做水分揮發(fā)對照實驗。最后用稱取重量的方法測出成蟲的拒食率。重復(fù)實驗5次。拒食率%=（對照組-處理組）/對照組×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 拒食活性測定結(jié)果與分析（表1）

表1 灰毛漿果楝的不同萃取部分對菜青蟲的拒食活性

實驗結(jié)果表明（表1），經(jīng)過比較可以看出在濃度較大而且相同濃度的情況下，四個不同萃取物對菜青蟲都顯示出一定拒食活性，而石油醚和氯仿部分相對乙酸乙酯和正丁醇部分具有較好的拒食活性，24h拒食率分別為42.73%和19.52%。因此選擇這兩部分作進一步梯度分析。

2.2 氯仿部分的梯度拒食活性（表2）

應(yīng)用和上述同樣的測試方法對氯仿部分做進一步分析，將氯仿樣品液稀釋成不同的濃度，測試氯仿不同濃度梯度都顯示出拒食活性，而且隨著濃度的增大拒食活性也出現(xiàn)遞增趨向。根據(jù)數(shù)據(jù)處理處理得到的拒食中濃度很大很大，沒有實際意義，因此表格沒有將這一數(shù)據(jù)列出。

2.3 石油醚部分的梯度拒食活性（表3）

應(yīng)用和上述同樣的測試方法對石油醚部分做進一步分析，在和氯仿相同濃度梯度下，石油醚部分顯示出更強的拒食活性，同樣隨著濃度的增強拒食活性也出現(xiàn)遞增趨向。說明主要的拒食活性物質(zhì)存在于石油醚萃取部分中。

3 結(jié)論與討論

初步研究結(jié)果顯示，灰毛漿果楝根的95%乙醇提取物的石油醚部分和氯仿部分對菜青蟲3齡幼蟲具有較好的拒食活性，可作為進一步開發(fā)利用的參考。從實驗數(shù)據(jù)可以看出石油醚部分的拒食活性要比氯仿部分強，這與植物活性成分的性質(zhì)有關(guān)，有文獻指出從楝科植物中提取的殺蟲活性物質(zhì)均為四環(huán)三萜類化合物，其他結(jié)構(gòu)的物質(zhì)均無殺蟲活性。因為三萜類物質(zhì)極性比較小，用石油醚萃取的時候易溶于石油醚因此應(yīng)用以往的經(jīng)驗來解析石油醚的萃取物拒食活性是可通的，因為四降三萜主要存在石油醚部分里。但以往研究到的楝科植物有效成分均為四環(huán)三萜類化合物，是不是所有這一科屬的都這樣，仍有待進一步探索，具有殺蟲和拒食作用的植物源物質(zhì)有多種，直接用提取物在做活性測試而沒有純化出活性成分來做測試是本實驗的一個很大不足。另外，實驗測定拒食活性所采用的方法有別于常用的浸漬葉碟法，但作為初步探索，本實驗提供的數(shù)據(jù)依然可以作為參考，植物殺蟲模型可以建立多種，我們可以通過不同實驗加以驗證。最后需要進一步研究證實的是灰毛漿果楝除了對菜青蟲有拒食作用外，是否還具有胃毒、觸殺、生長抑制等作用，這些可作為深一步的探討。

[1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院編.中藥大辭典.上海:上海人民出版社,1997:2183.

[2] 梁龍,鐘熾昌,蕭倬殷.傣藥“亞洛輕”化學(xué)成分的研究(Ⅰ)[J].中草藥,1990,21(11):2-4.

[3] 梁龍,鐘熾昌,蕭倬殷.傣藥“亞洛輕”化學(xué)成分的研究(Ⅱ)[J].中草藥,1991,22(1):6-8.

[4] 梁龍,鐘熾昌,蕭倬殷.傣藥“亞洛輕”化學(xué)成分的研究(Ⅲ)[J].中草藥,1994,25(5):236-237.

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1671-8194（2013）19-0095-03