鄒韶紅趙宗峰馬瑞董紅斌佟鈣玉

家庭暴力不僅是一個社會問題，也是一個醫(yī)學(xué)、公共衛(wèi)生和精神衛(wèi)生問題。開展家庭暴力的預(yù)防研究是當(dāng)前精神應(yīng)激研究領(lǐng)域的重要任務(wù)，尋找家庭暴力的危險因素，又是開展預(yù)防研究的重要手段。以往的研究可以將酒依賴患者家庭暴力的相關(guān)因素概括為：生物學(xué)因素、社會文化因素和社會心理學(xué)因素。迄今為止，有關(guān)酒依賴患者家庭暴力的生物學(xué)研究無論國內(nèi)國外都十分有限[1]。暴力行為除與社會、心理因素有關(guān)外，還與一些中樞神經(jīng)遞質(zhì)及其相關(guān)的基因和基因表達有關(guān)[2]。其中，人類兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶（Catechoi-O-methyltran-sferase，COMT）基因多態(tài)性成為暴力攻擊行為基因研究的熱點之一。國內(nèi)和國外的部分研究顯示rs4680位點低活性Met/Met基因型與攻擊行為有關(guān)[3-5]，但也有相反的研究結(jié)果認(rèn)為，高活性Val/Val基因型更富有攻擊性[6]。針對不同民族酒依賴患者家庭暴力行為的遺傳學(xué)研究目前還未見報道，故本研究以新疆地區(qū)漢族與維吾爾族酒依賴家庭施暴者和酒依賴無施暴者為研究對象，探討暴力行為與COMT基因rs4818、rs4680兩位點多態(tài)性的關(guān)聯(lián)性。

1 對象和方法

1.1 研究對象 來自新疆精神衛(wèi)生中心戒酒科及我院臨床心理科，符合中國精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)第三版（Chinese Classification and Diagnostic Criteria of Mental Disorder，CCMD-3）和國際疾病分類（International Statistical Classification of Diseases，ICD-10）酒依賴診斷分類，年齡25歲～65歲，排除嚴(yán)重軀體疾病和其他精神疾病等情況。共有194例酒依賴患者納入研究，均為男性，年齡25～64歲，平均（42.25±7.04）歲。其中漢族126例，平均年齡（42.14±7.63）歲；維吾爾族68例，平均年齡（42.47±6.92）歲，兩組年齡無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。

全部入組對象及家屬對本研究知情，并簽署知情同意書。本研究通過院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 家庭暴力問卷調(diào)查 自行設(shè)計家庭暴力調(diào)查表，內(nèi)容包括社會人口學(xué)資料（年齡、性別、族別、婚姻狀況、職業(yè)和受教育年限等）和對家人施暴情況。對施暴的評定標(biāo)準(zhǔn)主要依據(jù)家庭暴力的定義（指對配偶進行傷害、折磨、摧殘和壓迫等人身方面的強暴行為，其手段有毆打、捆綁、凌辱人格、殘害身體、限制人身自由、精神摧殘、遺棄以及性虐待等）[7－8]，具體調(diào)查內(nèi)容為：①在家中您對家人是否采取過以下行為（可多項填）：羞辱或吵架漫罵；摔東西；限制家人衣食住行、超負(fù)荷勞動等；徒手毆打(拳打腳踢)；持械毆打(如捆綁、鞭打)；非意愿性性行為。②如果對家人曾發(fā)生過這種行為，請問發(fā)生次數(shù)：1周3次以上；1周1～2次；1月2～3次；半年2～3次；1年2～3次。如果1年至少有2～3次任1項施暴行為則認(rèn)為屬于施暴組。

由1名經(jīng)過系統(tǒng)學(xué)習(xí)和訓(xùn)練的精神科主治醫(yī)師在安靜獨立的房間分別對各研究對象進行訪談。有關(guān)家庭暴力的問題由研究者與患者進行深入訪談后記錄。對精神摧殘方面，被施暴者是否感到痛苦，詢問其家屬以落實。

1.2.2 基因組DNA的提取及特定片段的PCR擴增 問卷調(diào)查后，于次日晨采集空腹外周靜脈血3～4mL，放置于5mL的EDTA－Na2抗凝管中，－80℃冰箱儲存。用TIANGEN血液基因組DNA提取試劑盒提取樣本DNA。PCR引物序列由北京鼎國生物技術(shù)工程有限責(zé)任公司合成，上游引物為5’－TCGTGGACGCCGTGATTCAGG－3’，下 游 引 物 為5’－ACAACGGGTCAGGCATGCA－3’。PCR反應(yīng)總體系為40μL，反應(yīng)液為 10×buffer（含 Mg2+，20μM/μL）4μL，dNTP（10μM/μL）1μL，TaqDNA 聚合酶（2U/μL）1μL，模板 DNA 1μL，上下游引物各1μL（10μM/μL），加ddH2O至40μL，在PTC－100 PCR擴增儀上擴增。反應(yīng)程序：95℃預(yù)變性3min，進入循環(huán)，95℃變性30s，68℃退火1min，72℃延伸90s，共35個循環(huán)；72℃延伸7min，4℃保存。反應(yīng)結(jié)束后取5μL擴增產(chǎn)物于1×TAE緩沖液中用1%瓊脂糖凝膠電泳20min（恒壓150V），電泳結(jié)果在凝膠成像系統(tǒng)拍照保存。

1.2.3 測序分型 擴增產(chǎn)物由北京鼎國生物技術(shù)工程有限責(zé)任公司進行目的片段測序，結(jié)果返回后對相應(yīng)位點分型并記錄。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法根據(jù)施暴情況，將漢族與維吾爾族酒依賴患者分別分為施暴和無施暴兩亞組。使用SPSS 10.0，應(yīng)用χ2檢驗計算基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡法則，χ2檢驗比較同一民族兩亞組之間基因型以及等位基因頻率的分布差異，并應(yīng)用QUANTO version1.2計算統(tǒng)計檢驗功效（1-β）值。應(yīng)用SHEsis軟件，經(jīng)χ2檢驗進行兩位點聯(lián)合分析，D’值>0.7定義為強連鎖[9]。檢驗水準(zhǔn)α為0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)果

漢族酒依賴患者組中，有70例（55.6%）施暴者，平均年齡（40.79±7.24）歲，無施暴者平均年齡（41.84±7.92）歲，二者無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）；維吾爾族酒依賴患者組中，有34例（50.0%）施暴者，平均年齡（41.69±6.70）歲，無施暴者平均年齡（41.25±6.11）歲，二者無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。兩民族酒依賴患者中，施暴者的分布無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。

2.1 Hardy-Weinberg平衡檢驗 漢族酒依賴患者中兩亞組 的 rs4680（χ2=0.155，P=0.694；χ2=0.140，P=0.708）和rs4818（χ2=2.649，P=0.104；χ2=0.024，P=0.876）位點基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡法則；維吾爾族酒依賴患者中兩亞組的 rs4680（χ2=3.316，P=0.069；χ2=0.105，P=0.746）和 rs4818（χ2=3.316，P=0.069；χ2=1.492，P=0.222）位點基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡法則。

表1 兩民族施暴組與無施暴組rs4680位點基因型與等位基因頻率分布

表2 兩民族施暴組與無施暴組rs4818位點基因型與等位基因頻率分布

2.2 rs4680位點基因型與等位基因頻率分布的比較 兩民族酒依賴施暴組與酒依賴無施暴組rs4680位點基因型和等位基因頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。漢族兩亞組統(tǒng)計檢驗功效（1-β）值為0.760，維吾爾族兩亞組統(tǒng)計檢驗功效（1-β）值為0.570。

2.3 rs4818位點基因型與等位基因頻率分布的比較 兩民族酒依賴施暴組與酒依賴無施暴組rs4818位點基因型和等位基因頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表2。漢族兩亞組統(tǒng)計檢驗功效（1-β）值為0.769，維吾爾族兩亞組統(tǒng)計檢驗功效（1-β）值為0.615。

2.4 兩位點聯(lián)合作用分析 兩個SNPs的連鎖不平衡檢驗以及雙位點聯(lián)合分析結(jié)果表明，漢族兩組rs4818-rs4680之間 D’=1.000，r2=0.235；維吾爾族兩組 rs4818-rs4680之間D’=1.000，r2=0.519。兩民族兩個SNPs位點之間存在強連鎖不平衡，兩個SNPs處于同一個單倍型，可以進行單倍型分析。漢族、維吾爾族酒依賴施暴組與酒依賴無施暴組進行單倍型頻率的比較，兩民族兩組間rs4818-rs4680組成的單倍型頻率差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

3 討論

COMT基因是暴力攻擊行為研究的重要候選基因之一，到目前為止已發(fā)現(xiàn)COMT基因編碼區(qū)至少有8個單核苷酸多態(tài)性變異[10],COMT基因的rs4818、rs4680多態(tài)性均位于第四外顯子。本研究采用病例對照研究方法，選擇rs4818、rs4680兩個位點進行分析，試圖了解新疆漢族與維吾爾族酒依賴患者家庭暴力行為與COMT基因多態(tài)性的關(guān)系。結(jié)果提示，rs4680與rs4818位點兩民族酒依賴施暴組與無施暴組基因型與等位基因頻率差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），這說明COMT基因rs4818、rs4680位點可能不是新疆漢族與維吾爾族暴力行為的單一易感基因，此與Jones等[11]的推測不一致，他認(rèn)為COMT基因不僅與精神分裂癥患者的攻擊行為有關(guān)，也可能與普通人群的攻擊行為有關(guān)。另外，劉文英等[12]和黃雄等[13]研究國內(nèi)精神分裂癥患者暴力行為與rs4680位點基因多態(tài)性的關(guān)系，未發(fā)現(xiàn)二者之間相關(guān)，從側(cè)面支持了本研究的研究結(jié)果。

單倍型分析能夠檢測出變異的連鎖不平衡，比單個位點的分析更具效能[14]。對rs4818、rs4680兩位點聯(lián)合作用分析提示，兩民族兩組間rs4818-rs4680組成的單倍型頻率差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

針對酒依賴患者家庭暴力行為的遺傳學(xué)研究非常有限，本研究雖然得出新疆漢族與維吾爾族酒依賴患者家庭暴力行為與COMT基因rs4818和rs4680位點可能無關(guān)聯(lián)性的結(jié)論，但考慮到樣本數(shù)量偏少，且統(tǒng)計檢驗功效（1-β）值并不高，結(jié)論有出現(xiàn)假陰性的可能，后續(xù)的工作需要擴大樣本數(shù)量，尤其是維吾爾族樣本數(shù)量，結(jié)合環(huán)境因素的交互作用，進一步探討家庭暴力行為與COMT基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)及連鎖。

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