胡向陽，李 安，林春淑，楊 璇

（中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，廣東 珠海 519000）

布渣葉水煎液對非酒精性脂肪肝大鼠血脂及血液流變影響研究

胡向陽，李 安，林春淑，楊 璇

（中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，廣東 珠海 519000）

目的：觀察布渣葉水煎液對非酒精性脂肪肝大鼠血脂及血液流變的影響。方法：采用高脂飲食法制備非酒精性脂肪肝大鼠模型， 48只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組、非諾貝特組、布渣葉水煎液組，分別給予生理鹽水、非諾貝特、布渣葉水煎灌服。檢測各組大鼠血清和肝組織TC、TG、肝指數(shù)及血液流變學(xué)指標(biāo)。結(jié)果：布渣葉水煎液可降低血清和肝組織TC、TG及肝指數(shù)，降低血液黏度。結(jié)論：布渣葉水煎液對非酒精性脂肪肝大鼠血脂及血液流變學(xué)指標(biāo)有改善作用。

布渣葉；大鼠；非酒精性脂肪肝；血脂；血液流變學(xué)

非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD），又稱非酒精性脂肪性肝病，是一種無過量飲酒史，以肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為特征的臨床病理綜合征。NAFLD已成為目前僅次于慢性病毒性肝炎和酒精性肝病的重要肝硬化前期病變［1］。布渣葉又名破布葉、山茶葉、爛布渣等，為椴樹科破布葉屬植物破布葉（Microcos paniculata Linn）的干燥葉，主要分布于我國廣東、廣西、海南等地，味甘、淡，性微寒，無毒，有清熱消滯、利濕退黃功效，多用于治療感冒，濕熱食滯，濕熱黃疸等疾?。?］。藥理研究表明，布渣葉中含有黃酮類、生物堿、有機(jī)酸、氨基酸、蒽醌等成分，具有解熱、鎮(zhèn)痛、退黃及促消化等作用［3，4］。我們觀察了布渣葉水煎液對NAFLD大鼠血脂及血液流變學(xué)的影響，總結(jié)如下。

1 材 料

實(shí)驗(yàn)動物：Wistar大鼠，SPF級，雄性，體質(zhì)量（140±20）g，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號粵檢證字2011C539，室溫適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后用于實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)藥物：非諾貝特膠囊（商品名力平之），法國利博福尼制藥公司（Laboratoires Fournier S.A.）生產(chǎn)，注冊證號H20100602，產(chǎn)品批次18246，臨用前以生理鹽水溶解濃度為40mg/mL。布渣葉飲片由廣東省中醫(yī)院提供，布渣葉3.0kg，以1g生藥加水5mL，冷水浸泡30min后，開始武火煎煮，煮沸后用文火慢煎20min，趁熱過濾。煎煮第2遍按1g生藥加水4mL，煎法同上，合并濾液。60℃恒溫下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，濃縮為含生藥6g/mL的水煎液，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

試劑與儀器：高脂飼料（膽酸鈉0.2%、膽固醇2%、食用油10%、基礎(chǔ)飼料87.8%），膽固醇、膽酸鈉、丙基硫氧嘧啶（廣州天馬精細(xì)化工廠）。膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）試劑盒（南京建成生物試劑公司）。LDZ5-2型離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠），MVIS-2035全自動血液流變分析系統(tǒng)（重慶天海醫(yī)療設(shè)備有限公司），DY89-I型電動玻璃勻漿機(jī)（寧波新芝），AU600型全自動生化分析儀（日本OLYMPUS株式會社）。

2 方 法

動物分組：Wistar大鼠48只，按數(shù)字隨機(jī)分組法分正常對照組、模型對照組、非諾貝特組、布渣葉水煎液組各12只。

動物模型制備：分別給予各模型組大鼠高脂飲食（膽固醇3%、膽酸鈉0.5%、丙基硫氧嘧啶0.2%、白糖5%、豬油10%、基礎(chǔ)飼料81.3%），正常對照組給予普通飼料，連續(xù)8周。從第9周開始給予藥物治療，布渣葉水煎液組灌服劑量為150g/（kg·d），非諾貝特組灌服劑量為1 000mg/（kg·d），對照組和模型組給予等體積的生理鹽水，連續(xù)至第12周。

指標(biāo)檢測：從造模開始算，第12周末當(dāng)晚大鼠禁食不禁水12h，腹腔注射麻醉，打開腹腔，采用真空采血管腹主動脈取血，用MVIS-2035全自動血液流變學(xué)分析系統(tǒng)檢測全血黏度、血漿黏度和紅細(xì)胞壓積。血樣4℃靜置2h后，3 000rmp離心10min，分離血清，采用酶比色法在全自動生化分析儀測定血清TC、TG含量。游離并提取肝臟，4℃生理鹽水沖洗，去除薄膜，稱肝濕重，用以計(jì)算肝指數(shù)，肝指數(shù)（%）=肝濕質(zhì)量/體質(zhì)量×100%。冰盤上剪取一小塊肝葉，剪碎，移入玻璃勻漿器，加入預(yù)冷的生理鹽水，研磨制備10%肝組織勻漿，3 500r/min離心10min，取上清液，采用GPO-PAP酶法測定肝組織中TC、TG含量。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS14.0系統(tǒng)軟件包，計(jì)量資料以（）表示，采用t檢驗(yàn)和單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié) 果

各組大鼠血清和肝組織TC、TG及肝指數(shù)變化見表1。

表1 各組大鼠血清和肝組織TC、TG及肝指數(shù)比較（）

表1 各組大鼠血清和肝組織TC、TG及肝指數(shù)比較（）

注：與正常對照組比較，**P＜0.01，*P＜0.05；與模型對照組比較，△△P＜0.01，△P＜0.05；與非諾貝特組比較，#P＜0.05。

組別n血清TC（mmol/L）血清TG（mmol/L）肝組織TC（mg/g）肝組織TG（mg/g）肝指數(shù)（%）正常對照組122.62±0.460.53±0.101.37±0.120.56±0.112.32±0.13模型對照組129.26±1.33**3.34±0.52**3.57±0.46**1.62±0.35**4.15±0.31**非諾貝特組122.28±0.46△△0.64±0.32△△1.66±0.31△△0.41±0.34△△2.36±0.12△△布渣葉水煎液組123.46±0.34*△△#0.83±0.10*△△2.12±0.35*△△0.60±0.51△△2.61±0.30△△

各組大鼠全血黏度、血漿黏度和紅細(xì)胞壓積變化情況見表2。

表2 各組大鼠全血黏度、血漿黏度及紅細(xì)胞壓積比較（）

表2 各組大鼠全血黏度、血漿黏度及紅細(xì)胞壓積比較（）

注：與正常對照組比較，**P＜0.01，*P＜0.05；與模型對照組比較，△△P＜0.01，△P＜0.05；與非諾貝特組比較，#P＜0.05。

組別n全血黏度（mps）血漿黏度（mps）紅細(xì)胞壓積（%）低切中切高切正常對照組128.22±1.123.35±0.433.64±0.321.56±0.4317.56±3.11模型對照組1216.32±3.21**6.25±1.04**6.25±1.13*4.48±0.25**21.32±4.21*非諾貝特組128.27±1.25△△3.27±0.33△△4.11±1.34△1.48±0.23△△18.31±3.25布渣葉水煎液組1211.53±2.12*△#3.62±0.25△△4.44±1.12△2.36±0.12△19.26±3.41

4 討 論

高脂飲食是導(dǎo)致NAFLD發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素。陳晶等［5］將432例受檢者按“四高”（高脂、高糖、高鹽和高味精）、飲酒和應(yīng)酬多與“四低”（低脂、低糖、低鹽和低味精）、不飲酒和應(yīng)酬少分組，去掉界限模糊者（33例），結(jié)果在2種飲食習(xí)慣者中，脂肪肝的患病率有明顯差別，前組脂肪肝的發(fā)病率32.97%（91/276），后組脂肪肝的發(fā)病率7.32%（9/123）。

正常肝臟內(nèi)脂質(zhì)含量占肝濕質(zhì)量的2%～4%，當(dāng)肝內(nèi)脂質(zhì)含量超過肝濕質(zhì)量的5%就會成為脂肪肝。研究表明，脂肪肝患者血中TG和TC明顯高于非脂肪肝患者［6］。因此，降低血脂、清除肝臟內(nèi)聚集的脂質(zhì)是治療NAFLD的重要方法之一。非諾貝特是目前臨床上常用的調(diào)脂藥，其為氯貝丁酸衍生物類血脂調(diào)節(jié)藥，可通過抑制極低密度脂蛋白（LDL-C）和TG的生成，降低血液LDL-C、TC和TG［7］。布渣葉水煎液給藥治療4周后，可以降低大鼠NAFLD大鼠血清TC、TG，同時降低肝組織TC、TG含量和肝指數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，布渣葉水煎液可以顯著降低NAFLD大鼠體內(nèi)的脂質(zhì)含量，并可改善肝臟脂肪變性的程度，提示對NAFLD具有較好的脂質(zhì)調(diào)節(jié)作用。

高血脂患者血液中的TC、TG等附著于紅細(xì)胞膜，隨著血脂的增高而增加，促進(jìn)了紅細(xì)胞的硬化，使紅細(xì)胞的變形能力下降，增加了血流的黏稠性，致使細(xì)胞膜流動性下降，使紅細(xì)胞的聚集性增高，造成血液流變學(xué)指標(biāo)明顯異常。血液黏稠度增加可使血流速度減慢，促進(jìn)血液高凝狀態(tài)，故血脂代謝紊亂和血液流變學(xué)異常相互促進(jìn)［8］。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD模型組大鼠全血黏度（低、中、高切）、血漿黏度和紅細(xì)胞壓積顯著升高，給予布渣葉水煎液可以降低血液流變學(xué)指標(biāo)。布渣葉水煎液對NAFLD模型大鼠具有明顯改善作用，其機(jī)制與降低血和肝臟中TC、TG及血液流變學(xué)指標(biāo)等有關(guān)。

［1］胡承雷，劉明.非酒精性脂肪肝的診療現(xiàn)狀及展望［J］.山西醫(yī)藥雜志，2011，40（12）：1213-1215.

［2］廣東省食品藥品監(jiān)督管理局.廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)（第一冊）［M］，廣州：廣東科學(xué)技術(shù)出版社，2004：66.

［3］曾聰彥，梅全喜，高玉橋，等.布渣葉水提物解熱退黃作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國藥房，2010，21（11）：973-974.

［4］李坤平，潘天玲，高崇凱，等.大孔吸附樹脂富集純化布渣葉總黃酮的研究［J］.中藥材，2009，32（4）：601-603.

［5］陳晶，石成玉，李小茜.脂肪肝危險(xiǎn)因素的流行病學(xué)調(diào)查［J］.解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2010，28（3）：197-198.

［6］徐正婕，范建高.非酒精性脂肪性肝病的綜合治療［J］.世界臨床醫(yī)藥，2010.31（9）：513-515.

［7］Belfort R，Berria R，Comen J，et a1.Fenofibrate reduces systemic infammation markers independent of its efects on lipid and glucose metabolism in patients with the metabolic syndrome［J］.Clin Endocrinol Metab，2010，95（2）：829-836.

［8］Musso G，Gambino R，Cassader M.Recent insights into hepatic lipid metabolism in non-alcoholic fatty liver disease［J］.Prog Lipid Res，2009，48（1）：19-21.

Objective：To observe the effect of water extract of Microcos paniculata on blood lipid and hemorheology of nonalcoholic fatty liverrats.Method：Nonalcoholic fatty liverrat models were made with high-fat diet.48 wistar male rats were divided into 4 groups randomly，the normal control group，the model control group，fenofibrategroup and water extract of Microcos paniculata group.They were gavaged with normal saline，fenofibrate and water extract of Microcos paniculata respectively.The liver index TC，TG in serum and liver tissue and hemorheology index of each group were detected.Result：The water extract of Microcos paniculata could decrease the liver index TC，TG in serum and liver tissue and decrease blood viscosity.Conclusion：The water extract of Microcos paniculata has improvement effect on blood lipid and hemorheology index of nonalcoholic fatty liverrats.

Microcos paniculata;rat；nonalcoholic fatty liver；blood lipid；hemorheology

R256.497.55

B

1004-2814(2013)07-517-02

2013-03-07