羅清平

（石門縣人民醫(yī)院，湖南 常德 415300）

不規(guī)則抗體篩查在臨床輸血中的應(yīng)用研究

羅清平

（石門縣人民醫(yī)院，湖南 常德 415300）

目的 探討微柱凝膠抗人球蛋白試驗在臨床輸血不規(guī)則血型抗體篩查中的應(yīng)用價值。方法 對 4125 份血清樣本采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗進行不規(guī)則抗體篩查。結(jié)果 本次研究共篩查出不規(guī)則血型抗體患者 72 例（1.75%），經(jīng)微柱凝膠抗人球蛋白法采用鑒定譜細胞1～11 號進行不規(guī)則抗體的特異性鑒定，其中抗 D26 例，抗 E27 例，抗 E、抗 C8 例，抗 C6 例，抗 Ce5 例；在 72 例陽性患者中，男 26 例，均有輸血史；女 46 例，其中 15 例有妊娠史，18 例有輸血史，13 例既有妊娠史又有輸血史。結(jié)論 采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗進行不規(guī)則血型抗體篩查可有效檢出常見的不規(guī)則血型抗體，從而最大程度地避免輸血并發(fā)癥的發(fā)生，方法簡便易行，值得臨床推廣。

輸血；不規(guī)則血型抗體；微柱凝膠抗人球蛋白試驗；篩查

紅細胞不規(guī)則抗體（irregular antibodies）常可導(dǎo)致輸入的紅細胞存活期縮短甚至可引起致命的免疫溶血性輸血反應(yīng)[1]。因此，篩選和鑒定不規(guī)則抗體是避免免疫溶血性輸血反應(yīng)、保證臨床輸血安全的有效措施，尤其是對孕婦或患有腫瘤、自身免疫性疾病、嚴重消耗性疾病以及多次輸血的患者顯得更為重要[2]。為探討微柱凝膠抗人球蛋白試驗在臨床輸血不規(guī)則血型抗體篩查中的應(yīng)用價值。2009年1月至2011年12月，我院對4125份血清樣本采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗進行不規(guī)則抗體篩查，獲得了滿意的篩查效果，現(xiàn)總結(jié)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 檢測對象

本組檢測對象共4125例，男2180例，女1945例，年齡2～79歲，均為符合臨床輸血適應(yīng)癥的輸血患者，其中孕婦483例，腫瘤及其他嚴重消耗性疾病患者685例，合并有自身免疫性疾病患者282例，單次輸血量為200～2600mL。

1.1.2 儀器與試劑

微柱凝膠專用孵育器、BYL型血型血清學(xué)多用離心機及抗人球蛋白微柱凝膠卡、不規(guī)則抗體篩查細胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型）等均由長春博訊生物技術(shù)公司提供；鑒定譜細胞1～11號由上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供。

1.2 方法

所有操作均嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[3]中的方法進行，所有受檢者均于清晨8點采用促凝管抽取靜脈血5mL后常溫下靜置30min，在其完全凝固后，低速離心2min，分離出血清并剔除其中的纖維蛋白。取抗人球蛋白微柱凝膠篩檢卡按使用說明做好標記，分別向3個微柱凝膠管中加入0.8%Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型不規(guī)則抗體篩查細胞試劑各50μL后，再立即分別加入待檢血清50μL，在免疫微柱孵育器內(nèi)孵育15min后，放入BYL型血型血清學(xué)多用離心機內(nèi)以900r/min離心2min，再以1500r/min離心3min，取出肉眼判斷結(jié)果。結(jié)果判斷標準：陽性（+）：紅細胞相互凝集，懸浮于凝膠柱上端或中間；陰性（-）：游離篩檢紅細胞沉降到凝膠柱底部。最后，對初篩抗體陽性的標本采用1～11號鑒定譜細胞進行對照，以判定不規(guī)則抗體的特異性，二者相符則為該種抗體陽性。

2 結(jié) 果

本次研究共篩查出不規(guī)則血型抗體患者72例（1.75%），經(jīng)微柱凝膠抗人球蛋白法采用鑒定譜細胞1～11號進行不規(guī)則抗體的特異性鑒定，其中抗D26例，抗E27例，抗E、抗C8例，抗C6例，抗Ce5例；在72例陽性患者中，男26例，均有輸血史；女46例，其中15例有妊娠史，18例有輸血史，13例既有妊娠史又有輸血史。

3 討 論

紅細胞抗體分為天然抗體和免疫性抗體兩種。人體血清中抗-A和抗-B抗體是人類最重要的天然抗體，為無明確抗原刺激產(chǎn)生的抗體。由外來的類似血型抗原物質(zhì)免疫所產(chǎn)生的抗體，稱為不規(guī)則血型抗體或免疫性抗體，主要存在于患有腫瘤、自身免疫性疾病、嚴重消耗性疾病以及多次輸血的患者中[4]，不規(guī)則血型抗體特異性結(jié)合紅細胞上的相應(yīng)抗原并由此引起快速免疫反應(yīng)為其最主要的生物學(xué)功能[5]，可致溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的發(fā)生，嚴重時可危及患者生命[6,7]。因此，對需要輸血治療的患者進行不規(guī)則抗體篩查，有助于選擇正確的血液，從而防止因輸注含有某種不規(guī)則抗體的血液而發(fā)生的輸血反應(yīng)。

Rh血型是ABO血型系統(tǒng)之后抗原抗體最為復(fù)雜的血型系統(tǒng)，5種抗原的抗原性強弱依次為D＞E＞C＞c＞e[8]?？笵主要通過Rh血型不合的輸血和妊娠產(chǎn)生，抗D的產(chǎn)生可引起嚴重的輸血反應(yīng)，并可能導(dǎo)致受血者新生兒或胎兒死亡；而多次輸血的患者則容易因產(chǎn)生抗E而導(dǎo)致溶血；抗c僅能通過免疫產(chǎn)生，在Rh血型系統(tǒng)中，其重要性僅次于抗D和抗E[9]。輸血時在做好ABO血型分型的同時必須做好Rh血型分型，做到同型輸血，以免產(chǎn)生不規(guī)則抗體而導(dǎo)致不良輸血反應(yīng)?？谷饲虻鞍孜⒅z試劑卡采用六支微柱型管，包括反應(yīng)腔和凝膠分離柱兩個部分，管中填充葡聚糖凝膠和抗人球蛋白(多抗）。當受檢血清中含有某種不規(guī)則抗體時，則與已知血型抗原的篩檢細胞發(fā)生反應(yīng)，并在抗人球蛋白試劑的橋聯(lián)作用下，紅細胞相互凝集，通過多用離心機的低速離心，利用凝膠的空間位阻效應(yīng)，凝集后的紅細胞懸浮于凝膠柱上端或中間，即為陽性；反之，未發(fā)生凝集反應(yīng)的游離篩檢紅細胞則沉降到凝膠柱底部，即為陰性[3]。抗人球蛋白微柱凝膠試驗方便快捷，標本用量少，靈敏度高，容易判斷，結(jié)果穩(wěn)定可靠[10]，易標準化，適用于進行臨床常規(guī)不規(guī)則抗體篩查。臨床需要注意的是，由于篩檢用的鑒定譜細胞不可能包含所有抗原，無法檢出低頻率抗原的相應(yīng)抗體，因此不規(guī)則抗體篩查陰性并不等于完全不存在不規(guī)則抗體，此外，對ABO血型的誤判也不能通過抗體篩查進行糾正查出[11]。所以，即使不規(guī)則抗體篩查陰性，還必須采用能快速檢測出不完全抗體的方法進行交叉配血，以確保輸血萬無一失。

綜上所述，采用微柱凝膠抗人球蛋白試驗進行不規(guī)則血型抗體篩查可有效檢出常見的不規(guī)則血型抗體，從而最大程度地避免輸血并發(fā)癥的發(fā)生，方法簡便易行，值得臨床推廣。

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