黃惠娟， 鄭鎧軍， 楊秀芳， 陳敬國， 張漢奎

研究表明，促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）是一種相對(duì)分子質(zhì)量為304 00，受缺氧調(diào)節(jié)的糖蛋白激素［1］。近年來動(dòng)物及臨床實(shí)驗(yàn)研究表明EPO對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有保護(hù)作用，可限制圍生期腦損傷［2，3］。但是對(duì)于早期早產(chǎn)兒EPO動(dòng)態(tài)水平變化，以及與早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育遲緩的相關(guān)性分析，目前國內(nèi)的資料不多。本研究通過檢測早產(chǎn)兒EPO動(dòng)態(tài)水平變化，探討其對(duì)早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育遲緩的臨床預(yù)測價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 將2009－08／2010－07在中山大學(xué)附屬中山醫(yī)院產(chǎn)科出生并轉(zhuǎn)新生兒科的胎齡＜35周、體質(zhì)量＜2 500g的早產(chǎn)兒193例作為研究對(duì)象，其中體質(zhì)量＜1 500g的早產(chǎn)兒26例，放棄治療及死亡7例，19例作為極低體質(zhì)量組，其胎齡（30.2±1.5）周，體質(zhì)量（1 228.2±198.5）g；體質(zhì)量1 500～2 500g的早產(chǎn)兒167例，采用隨機(jī)數(shù)字表法抽取17例為低體質(zhì)量組，其胎齡（33.4±1.2）周，體質(zhì)量（1 997.6±308.5）g。36例早產(chǎn)兒根據(jù)發(fā)育商程度分為3組，正常組21例，輕度異常組10例，遲緩組5例。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）胎齡＜35周，體質(zhì)量＜2 500g的早產(chǎn)兒；（2）家屬知情同意。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 合并膈疝、嚴(yán)重畸形、嚴(yán)重宮內(nèi)感染者。

1.4 發(fā)育商程度 糾正胎齡12個(gè)月用Gesell量表由專人測定發(fā)育商。＞85分為正常，70～85分為輕度異常，＜70分為遲緩。

1.5 檢測方法 抽取臍血2mL，然后于出生7、14d抽取橈動(dòng)脈血2mL。將所取血樣置于含有2%乙二胺四乙酸0.2mL的抗凝管中，3 000r／min離心15min，置于－20℃冰箱貯存待用。用ELISA法測定血漿EPO水平。由武漢中美科技有限公司提供人紅細(xì)胞生成素酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。實(shí)驗(yàn)操作過程嚴(yán)格按照說明書指示進(jìn)行。

1.6 觀察指標(biāo) 臍血、出生7、14d的EPO水平。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料用珚±s表示，臍血EPO水平與多因素關(guān)系采用多元線性回歸分析；不同日齡、不同組別EPO比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD－t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 早產(chǎn)兒臍血EPO水平與胎齡、出生體質(zhì)量、出生時(shí)血紅蛋白、出生時(shí)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的關(guān)系 見表1。表1可見，采用多元回歸分析法臍血EPO水平與出生體質(zhì)量、胎齡、出生時(shí)血紅蛋白、出生時(shí)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯相關(guān)關(guān)系。

表1 早產(chǎn)兒臍血EPO水平與胎齡、出生體質(zhì)量、出生時(shí)血紅蛋白、出生時(shí)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)關(guān)系

2.2 不同體質(zhì)量的早產(chǎn)兒EPO水平變化 見表2。

表2 不同體質(zhì)量的早產(chǎn)兒EPO水平變化（珚±s，μg／L）

表2 不同體質(zhì)量的早產(chǎn)兒EPO水平變化（珚±s，μg／L）

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表2可見，兩組不同體質(zhì)量早產(chǎn)兒臍血、出生7、14dEPO水平變化不大，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 不同發(fā)育商程度早產(chǎn)兒EPO水平比較 見表3。

表3 不同發(fā)育商程度早產(chǎn)兒EPO水平比較（珚±s，μg／L）

表3 不同發(fā)育商程度早產(chǎn)兒EPO水平比較（珚±s，μg／L）

注：與遲緩組比較，at＝2.67，P＜0.05；bt＝2.87，P＜0.01；ct＝2.85，P＜0.01。

?

表3可見，3組早產(chǎn)兒臍血EPO水平變化差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；出生7d和14dEPO水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較，出生7d遲緩組EPO水平明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），但與輕度異常組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。出生14d遲緩組EPO水平均明顯高于正常組和輕度異常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，0.01）。出生7d和14d輕度異常組與正常組EPO水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

EPO是一種含唾液酸的受缺氧調(diào)節(jié)的酸性糖蛋白，由165個(gè)氨基酸組成。EPO來源于腎臟及胚胎肝，成人EPO主要來源于腎臟，胎兒及新生兒主要來源于肝臟。正常情況下血清EPO水平與紅細(xì)胞壓積或血紅蛋白呈負(fù)對(duì)數(shù)線性關(guān)系，而早產(chǎn)兒、極低出生體重兒EPO上升與紅細(xì)胞壓積或血紅蛋白下降的相關(guān)性很差，其原因是早產(chǎn)兒肝臟對(duì)缺氧的敏感性差，不如腎臟敏感［4，5］。本研究的早產(chǎn)兒臍血EPO水平與胎齡、出生體質(zhì)量、出生時(shí)血紅蛋白、出生時(shí)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯直線相關(guān)關(guān)系，與文獻(xiàn)［4］相符。

EPO的合成釋放受多種因素調(diào)控，其中組織缺氧是剌激EPO的主要因素。有文獻(xiàn)指出臍血EPO能較準(zhǔn)確反映胎兒的慢性缺氧，是圍產(chǎn)期危險(xiǎn)因素的可靠、靈敏的指標(biāo)［6］。而本研究的正常組、輕度異常組和遲緩組的早產(chǎn)兒臍血EPO水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可能是本研究的輕度異常組和遲緩組早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育遲緩的原因不是胎兒慢性缺氧，臍血EPO水平在預(yù)測早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育遲緩方面未見其有相關(guān)性。本研究遲緩組出生7d和14d的EPO水平持續(xù)升高，而輕度異常組和正常組出生14d的EPO水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。EPO水平持續(xù)升高，可能提示早產(chǎn)兒存在慢性缺氧，在神經(jīng)系統(tǒng)損傷情況下，缺氧激活誘導(dǎo)因子1使星形膠質(zhì)細(xì)胞促紅細(xì)胞生成素受體增多，EPO生成增加，以旁分泌形式發(fā)揮神經(jīng)營養(yǎng)、保護(hù)作用［7］。徐發(fā)林等［8］對(duì)63例足月窒息新生兒研究示出生5d內(nèi)血清EPO動(dòng)態(tài)變化不明顯，腦脊液與血液濃度變化規(guī)律相似，窒息后血清、腦脊液中EPO水平增高，與自身神經(jīng)保護(hù)作用有關(guān)。但合并重度缺氧缺血性腦?。╤ypoxic－ischemic encephalopathy，HIE）組低于中度HIE組的測定值。本研究的早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育遲緩組血漿EPO水平持續(xù)升高與其不相符。由于EPO測定的時(shí)間不同，重度HIE與中度HIE預(yù)后與本研究的遲緩組及輕度異常組不一定相同，故結(jié)果不同，這需要進(jìn)一步行較大規(guī)模病例雙盲對(duì)照研究。

最近的研究證實(shí)，EPO在體內(nèi)和體外的多種神經(jīng)細(xì)胞損傷模型中都有保護(hù)作用［9，10］?？滴那宓龋?1］對(duì)53例HIE患兒進(jìn)行隨機(jī)雙盲對(duì)照臨床研究，結(jié)論是重組人紅細(xì)胞生成素能促進(jìn)HIE患兒神經(jīng)功能的早期恢復(fù)。但是國外也有不同的研究結(jié)果。Ohls等［12］對(duì)172例新生兒進(jìn)行隨訪，發(fā)現(xiàn)EPO治療組和對(duì)照組在糾正胎齡18～24個(gè)月時(shí)神經(jīng)發(fā)育和體格測量參數(shù)無明顯差別。雖然目前眾多的研究資料均表明EPO有可能明顯改善腦損傷新生兒的神經(jīng)系統(tǒng)預(yù)后，但是EPO對(duì)神經(jīng)保護(hù)和營養(yǎng)機(jī)制目前尚未闡明，對(duì)于應(yīng)用EPO的時(shí)間窗、劑量、療程及遠(yuǎn)期預(yù)后，目前仍缺乏多中心、雙盲的對(duì)照研究，也缺乏早產(chǎn)兒后期EPO動(dòng)態(tài)水平觀察研究。

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