方文富 郭海坤 林法俊 紀(jì)旭光 彭秋玫 賀 茜 段曉峰 張會(huì)杰

（福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院，福州 350002）

花粉是蜜蜂生長發(fā)育所需營養(yǎng)蛋白質(zhì)的重要來源。蜜蜂從花粉中攝取蛋白質(zhì)，并通過消化將大分子的蛋白質(zhì)分解成小分子的氨基酸，吸收后在體內(nèi)組成適合本身生命活動(dòng)所需要的各種蛋白質(zhì)。在科學(xué)養(yǎng)蜂中，當(dāng)外界缺乏花粉時(shí)常常通過補(bǔ)充飼喂人工花粉代用品來彌補(bǔ)粉源的不足，促進(jìn)蜂群繁殖和提高蜂王漿產(chǎn)量。目前，人工花粉代用品已成為科學(xué)飼養(yǎng)蜜蜂重要的蛋白質(zhì)補(bǔ)充飼料[1-3]，有關(guān)人工花粉代用品及其添加劑對蜜蜂的作用前人也作了一些有益的探討[4-7]，但長期以來人工花粉代用品的大多是憑經(jīng)驗(yàn)配制，究竟不同人工花粉代用品對蜜蜂的影響如何，尚缺乏深入的科學(xué)的研究。本文試圖通過采用不同配比油菜花粉與黃豆粉的人工花粉代用品飼喂蜜蜂，就其對意大利蜜蜂6日齡工蜂幼蟲血淋巴中游離氨基酸的影響進(jìn)行探討，以為豐富蜜蜂營養(yǎng)相關(guān)生理學(xué)理論和為養(yǎng)蜂生產(chǎn)采用適合的人工花粉代用品提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

試驗(yàn)于2008年3～6月，在福建省福州市西郊福建農(nóng)林大學(xué)蜂學(xué)學(xué)院教學(xué)蜂場進(jìn)行。

1.1 試驗(yàn)蜂群

試驗(yàn)蜂群為福州本地意大利蜜蜂，25群，蜂群遺傳性狀一致，群勢 1 足框，采用1/2脾蜂箱飼養(yǎng)。試驗(yàn)蜂群分5組，每組5群。試驗(yàn)期時(shí)，試驗(yàn)群巢門均安裝蜂花粉采集器（脫粉板圓孔直徑4.9 mm），防止蜜蜂把天然花粉帶進(jìn)蜂巢，并當(dāng)日開始分別飼喂不同蛋白質(zhì)飼料，飼喂時(shí)將人工蛋白質(zhì)飼料制成花粉餅，置于蜂群內(nèi)巢框上梁供蜜蜂自由采食，飼喂的量以略有剩余為度，每3天飼喂1次，持續(xù)到試驗(yàn)結(jié)束為止。

1.2 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料的配備

試驗(yàn)用油菜（Brassica napus L.）花粉產(chǎn)自甘肅省民樂縣；黃豆（Glycine max Merrill）粉來自杭州市蕭山區(qū)靖江鎮(zhèn)；豆粉直徑0.3 mm。

試驗(yàn)時(shí)，采用油菜花粉與黃豆粉按不同比例混合而成。1 號(hào)飼料（100%花粉），2 號(hào)飼料（75%花粉、25%黃豆粉），3 號(hào)飼料（50%花粉、50%黃豆粉），4 號(hào)飼料（25%花粉、75%黃豆粉），5號(hào)飼料（100%黃豆粉）。

1～5號(hào)飼料的蛋白質(zhì)含量： 1 號(hào)飼料 24.5%，2 號(hào)飼料28.9%，3 號(hào)飼料34.4%，4 號(hào)飼料36.8%，5 號(hào)飼料38.8%。

1.3 試驗(yàn)用工蜂幼蟲的提供

在飼喂人工蛋白質(zhì)飼料10 d后，通過縮脾密集群勢逼蜂造脾和逼蜂王產(chǎn)卵的方法限王產(chǎn)卵。方法是，每個(gè)試驗(yàn)蜂群中抽出1個(gè)脾，寄放在其他蜂群，原位插入1個(gè)礎(chǔ)框，脾造好后蜂王立即在新脾上產(chǎn)卵，然后再用4根鐵線標(biāo)記蜂王在4～6 h 內(nèi)的產(chǎn)卵區(qū)域，并做好記錄，以便屆時(shí)提取工蜂幼蟲的樣本。

1.4 工蜂幼蟲血淋巴樣本的提取

在標(biāo)記產(chǎn)卵區(qū)的幼蟲發(fā)育到6日齡時(shí)，分別從試驗(yàn)蜂群標(biāo)記區(qū)提取供取血淋巴的工蜂幼蟲，然后立即提取幼蟲的血淋巴。每個(gè)試驗(yàn)群提取幼蟲血淋巴約 1 ml。每種飼料飼喂的蜂群提取 5 群的工蜂血淋巴樣本，5 種飼料飼喂的蜂群共提取25個(gè)試驗(yàn)群25個(gè)血淋巴樣本。提取的血淋巴加入抗氧化劑（苯基硫脲）后至于冰箱的冷凍室冷凍保存供用。

1.5 血淋巴中游離氨基酸種類和含量的測定

采用磺基水揚(yáng)酸法測定游離氨基酸。方法是將工蜂幼蟲血淋巴用5%磺基水揚(yáng)酸稀釋10倍，充分混勻，然后在10000 r/min轉(zhuǎn)速下離心10 min。析出沉淀物，取上清液直接上機(jī)測試。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法

先采用F檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)的差異顯著性，當(dāng)差異顯著時(shí)再采用Q檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

飼喂5 種不同比例油菜花粉與黃豆粉蛋白質(zhì)飼料對意蜂6日齡工蜂幼蟲血淋巴中氨基酸含量影響的試驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1所示。

表1 不同配比油菜花粉與黃豆粉混合飼料對6日齡工蜂幼蟲血淋巴游離氨基酸含量影響（單位：g/L）

由表1可見，采用不同配比油菜花粉與黃豆粉混合飼料飼喂的6 日齡工蜂幼蟲不但其血淋巴中同種游離氨基酸含量之間均無顯著性差異（P＞0.05），而且其血淋巴中游離氨基酸總量之間也無顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

蜜蜂幼蟲血淋巴中的游離氨基酸是蜜蜂在消化、分解來自蛋白質(zhì)飼料中蛋白質(zhì)的重要產(chǎn)物之一，也是蜜蜂幼蟲在體內(nèi)組成適合本身生命活動(dòng)所需要的各種蛋白質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。

對采用5種不同配比油菜花粉與黃豆粉混合蛋白質(zhì)飼料培育的6日齡工蜂幼蟲血淋巴中蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈草氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸和脯氨酸等16種游離氨基酸含量的試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂不同蛋白質(zhì)飼料培育的6日齡工蜂幼蟲血淋巴中16種游離氨基酸的含量之間和16種游離氨基酸總含量之間的差異均不顯著（P＞0.05）。說明不同配比油菜粉和黃豆粉混合蛋白質(zhì)飼料對6日齡工蜂幼蟲血淋巴中的游離氨基酸，無論是同種氨基酸還是16種游離氨基酸總含量都沒有影響。這可能是由于蜜蜂幼蟲體內(nèi)的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化酶類能夠把不同配比的油菜花粉與黃豆粉混合蛋白質(zhì)飼料中的蛋白質(zhì)消化、分解成發(fā)育所需種類和數(shù)量的游離氨基酸所致。

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