韓瑋琳 張淼 李興

麝香壯骨膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》成方制劑第十一冊，用于風(fēng)濕，關(guān)節(jié)痛，腰痛。神經(jīng)痛，肌肉酸痛，扭傷，挫傷。其主要成分為樟腦、冰片、薄荷腦、水楊酸甲酯等，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無對上述藥味的質(zhì)量控制方法。本試驗采用GC法測定了麝香壯骨膏中揮發(fā)性成分樟腦、冰片、薄荷腦、水楊酸甲酯的含量，該方法操作簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，適用于該品種的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent6890N氣相色譜儀，F(xiàn)ID氫火焰離子化檢測器，載氣為高純氮?dú)?99.999%)，電子分析天平 Mettler AE-240

1.2 試藥 對照品均由中檢所提供樟腦對照品(批號110747-201008)、薄荷腦對照品(批號110728.200506)、冰片對照品(批號110743-200504)、水楊酸甲酯對照品(批號110707-201112)。

試劑:乙酸乙酯為GC專用試劑;

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:DB-WAX柱(柱長30米，內(nèi)徑0.53mm，膜厚1μm)，柱溫120℃;分流進(jìn)樣。

2.2 對照品溶液制備與供試品溶液制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取樟腦22.5mg、薄荷腦17.5mg、冰片對照品30mg、水楊酸甲酯30mg，置25ml量瓶中，加乙酸乙酯使溶解，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液制備 取本品4片，除去襯被，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水200ml，照揮發(fā)油測定法(附錄 XD)試驗，自測定器上端加水使充滿刻度部分并溢流入燒瓶時為止，加乙酸乙酯2ml，連接回流冷凝管，加熱至沸騰并保持微沸3h，放冷，乙酸乙酯液用鋪有0.1g無水硫酸鈉的漏斗濾過，濾液轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，冷凝管及揮發(fā)油測定器內(nèi)壁用乙酸乙酯少量洗滌，通過上述漏斗，并入量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，精密量取10ml至25ml量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，即得。

2.3 提取時間考察 取同一批樣品(批號:100501)，分別保持微沸2h、3h、4h，測定含量，結(jié)果2h測定結(jié)果較低，3h與4h結(jié)果基本一致，因此提取時間定為3h。

2.4 專屬性考察 按照處方比例稱取除樟腦、薄荷腦、冰片、水楊酸甲酯外的其余藥味，按制備工藝制成缺樟腦、薄荷腦、冰片、水楊酸甲酯的陰性對照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。將混合對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液，分別注入氣相色譜儀進(jìn)行測定。結(jié)果顯示其他藥味不干擾樟腦、薄荷腦、冰片、水楊酸甲酯的檢出。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取上述三種對照品，加乙酸乙酯制成濃度為樟腦9.132mg/ml、薄荷腦7.125mg/ml、冰片12.117mg/ml、水楊酸甲酯12.559mg/ml的溶液作為混合對照品溶液I，精密量取混合對照品溶液I0.1、0.5、1、5ml分別置10ml量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。精密吸取上述5種混合對照品溶液1 μl，注入氣相色譜儀測定，由對照品濃度(X)與對照品峰面積(Y)進(jìn)行回歸，得回歸方程:樟腦 Y=1086.5x-8.6822，r=0.9999、薄荷腦 y=2845.7x-4.5111，r=0.9999、冰片 y=1795.3x-0.5533 r=0.9999、水楊酸甲酯 y=657.95x-8.6611，r=0.9999結(jié)果表明樟腦在9.132～0.0913 mg/ml、薄荷腦在7.125～0.0712 mg/ml、冰片在 12.117～0.1212 mg/ml、水楊酸甲酯12.559～0.1256濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，注:冰片峰面積以龍腦和異龍腦面積之和計算。

2.6 精密度試驗 精密吸取同一批供試品溶液1μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，結(jié)果精密度樟腦RSD為1.11%、薄荷腦RSD為1.19%、冰片RSD為1.07%、水楊酸甲酯RSD為0.79%。

2.7 穩(wěn)定性試驗 將同一份供試品溶液于室溫下放置，分別于0、0.5、1、2、5、8、12h各精密進(jìn)樣1μl，按上述色譜條件檢測，記錄各組分色譜峰面積值，其樟腦為1.59%、薄荷腦為1.17%、冰片為0.92%、水楊酸甲酯1.33，表明供試品溶液在室溫下放置12h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 重復(fù)性試驗 取同一批號的樣品，按上述供試品溶液制備方法及其色譜條件測定方法進(jìn)行6次平行提取測定，含量分別為:樟腦RSD為1.2%;薄荷腦RSD為0.9%;冰片RSD為1.5%、水楊酸甲酯1.1%。

2.9 加樣回收率試驗 取供試品2片為一份，共6份，平行提取測定，精密加入濃度為樟腦20.35mg/ml、薄荷腦55.01mg/ml、冰片33.56mg/ml、水楊酸甲酯18.62mg/ml的混合對照品溶液1ml按擬定方法測定。結(jié)果見表1、2、3、4。

2.10 樣品測定 按擬定的方法對3批樣品進(jìn)行含量測定，結(jié)果見表4。

表1 樟腦回收率試驗結(jié)果

表2 薄荷腦回收率試驗結(jié)果

表3 冰片回收率試驗結(jié)果

表4 水楊酸甲酯回收率試驗結(jié)果

表5 3批樣品含量測定結(jié)果

3 討論

本品采用揮發(fā)油提取方法，有效的排除了橡膠膏劑基質(zhì)的影響，進(jìn)一步純化樣品。

因其測定成分均為純品，不存在交叉干擾現(xiàn)象，所以未單獨(dú)進(jìn)行專屬性實驗。

橡膠膏劑因工藝原因，造成揮發(fā)性成分損失較大，本方法通過氣相色譜方法制定了麝香壯骨膏中已知的多個指標(biāo)成分含量測定方法，可有效控制其質(zhì)量，有助于其質(zhì)量數(shù)據(jù)的積累，為工藝控制與革新提供有效的依據(jù)，促進(jìn)質(zhì)量的提高。

通過本次實驗，為建立相同提取方法，相同檢測方法，控制橡膠膏劑揮發(fā)性成分研究工作，提供數(shù)據(jù)支持。