喬 斌 (山東省諸城市畜牧獸醫(yī)管理局 262200)
旋毛蟲病是由毛形科、毛形屬的旋毛蟲寄生于人、豬、犬、貓等多種動物而引起的一種人獸共患寄生蟲病。該病呈世界性分布,在我國大陸 15 個省、自治區(qū)、直轄市均有不同程度的分布,造成了嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。筆者根據(jù)工作經(jīng)驗(yàn)和有關(guān)資料,就宰前和宰后旋毛蟲檢疫的方法總結(jié)如下。
1.1 臨床癥狀 豬對旋毛蟲病的耐受性較強(qiáng),輕度感染時多無明顯癥狀;重度感染時,可出現(xiàn)體溫升高、厭食、腹痛、腹瀉、嘔吐、迅速消瘦、肌肉疼痛或僵硬、水腫。躺臥不起、 四肢伸展、 眼險(xiǎn)和四肢水腫等。感染后 6~8周,大部分癥狀消失,但肌肉僵硬的癥狀有可能持續(xù)。由于病豬癥狀各異,本病常被誤診為肌炎、關(guān)節(jié)炎、布魯氏菌病、沙門氏菌病等。
1.2 活體檢查 當(dāng)待宰豬群中出現(xiàn)精神沉郁、反應(yīng)遲鈍、被毛粗亂、發(fā)育不良的個體時,可判定為旋毛蟲病疑似病豬。應(yīng)進(jìn)行活體檢查。選擇腓腸肌或水腫、肌痛最顯著的部位,剪取麥粒大小的肉樣24粒,使肉粒均勻地在玻片上排成一排,用另一玻片壓緊,置低倍鏡下檢查,發(fā)現(xiàn)蜷曲的幼蟲即可確診。在感染早期及輕度感染者不易檢出幼蟲,感染較輕鏡檢陰性者,可將肌片用稀鹽酸消化,離心沉淀后檢查幼蟲,其陽性率較直接壓片法為高。
1.3 酶聯(lián)免疫吸附法 豬體內(nèi)旋毛蟲感染水平(荷蟲量)與其血液中抗體水平密切相關(guān),感染旋毛蟲后2~3周開始產(chǎn)生特異性抗體,因此,ELISA可用于豬旋毛蟲病的血清學(xué)診斷和血清流行病學(xué)調(diào)查。但 ELISA 方法可能由于旋毛蟲早期感染時的假陰性結(jié)果而造成漏檢,目前尚無法用于屠宰豬旋毛蟲的檢疫。
2.1 目檢法 在胴體兩側(cè)的橫膈膜肌腳各取一塊約15~20g肉樣,撕去肌膜,仔細(xì)觀察,如在肌膜下,肌腳近腱部位發(fā)現(xiàn)淡白色或灰白色的突起的小點(diǎn), 即為可疑,需要進(jìn)行壓片鏡檢。
2.2 壓片鏡檢法 沿肌纖維方向,由每個肉塊的可疑部位和其他不同部位剪取麥粒大樣品12塊,依次附貼于載玻片上,蓋上蓋玻片, 壓扁并擰緊螺旋,使壓片展成通過它能看到報(bào)紙上小字的程度。將壓片置于低倍鏡下進(jìn)行觀察。觀察由玻片一端的第一個壓片開始,不能漏檢任何一個視野。肌肉旋毛蟲包囊與肌纖維有明顯界限,鏡下包囊內(nèi)的蟲體呈螺旋狀,被旋毛蟲侵害的肌肉發(fā)生變性,肌纖維腫脹,橫紋消失,甚至發(fā)生蠟樣壞死。在肉樣中滴加美蘭染色液,可在肌纖維中看見幼蟲游動;壓片鏡檢看不清包囊和幼蟲輪廓時,可滴加50%甘油水溶液,數(shù)分鐘后壓片檢樣透明蟲體周圍有一圈明亮光環(huán);鈣化的包囊幼蟲,在顯微鏡下呈黑色的團(tuán)塊,此時加 10%鹽酸溶液脫鈣,可見完整或殘留斷裂的蟲體。
2.3 集樣消化法 按胴體順序編號,以5~10頭豬為一組,每頭取 10g膈肌腳肉樣,放在序號相同的采樣盤內(nèi);每頭隨機(jī)取2g,每組共取10~20g,加入約100~200ml消化液(含1%胃蛋白酶,1%HCl),搗碎至肉樣呈絮狀, 45℃下消化30min,其間不斷攪拌,再經(jīng)80目篩過篩,沉淀,漂洗后,迅速將沉淀物放于底部劃分為若干個方格的平皿內(nèi),低倍鏡下檢查有無蟲體。如發(fā)現(xiàn)蟲體則說明該組有陽性感染豬,將該組肉樣逐頭復(fù)檢或壓片鏡檢。
由于血清學(xué)方法不適用于檢疫肉品,傳統(tǒng)的目檢和鏡檢法、集樣消化法仍是國內(nèi)外檢疫旋毛蟲的主要方法。目檢和鏡檢法對所檢驗(yàn)的肉樣能廣泛觀察,受檢面積廣,因不能檢出所有種類的旋毛蟲而被逐步淘汰;集樣消化法的主要優(yōu)點(diǎn)是檢出率高、直觀性強(qiáng),缺點(diǎn)是需要試劑較多,操作繁瑣,檢疫過程花時間長。因此,在今后的檢驗(yàn)中,消化法應(yīng)處于主要的地位,但是仍然需要進(jìn)行提高敏感性的探索,并且進(jìn)行血清學(xué)方法的進(jìn)一步探索,最終達(dá)到降低檢疫成本,提高檢疫效率,保證豬肉安全無害的目的。