鄭淑君 賈喜花 王運良 郭建美

[摘要] 目的：通過觀察晚期腫瘤患者外周血淋巴細胞亞群特點，探討其免疫功能狀況及臨床意義。方法：應(yīng)用流式細胞儀檢測56例晚期腫瘤患者（腫瘤組）及42例健康體檢者（健康組）外周血淋巴細胞亞群計數(shù)，并對其作比較。結(jié)果：腫瘤組較健康組T細胞亞群CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，差值有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），CD3+比值升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），B細胞亞群下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），NK比值下降，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：晚期腫瘤患者的細胞免疫及體液免疫功能均低于健康人，其中體液免疫下降較明顯，對臨床應(yīng)用提高免疫力藥物也具有指導(dǎo)意義。

[關(guān)鍵詞] 淋巴細胞亞群；免疫功能；流式細胞術(shù)

[中圖分類號] R730.43 [文獻標(biāo)識碼] B[文章編號]1673-7210（2011）11（c）-094-02

Clinical characteristics and significance of lymphocyte subsets in patients with advanced cancer

ZHENG Shujun1, JIA Xihua2, WANG Yunliang2, GUO Jianmei2

1.Chengde Medical College, Hebei Province, Chengde 067000, China; 2.Department of Medical Oncology, the First Central Hospital of Baoding City, Hebei Province, Baoding 071000, China

[Abstract] Objective: To observe the clinical characteristics of lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with advanced cancer in order to evaluate immune function and clinical significance of lymphocyte subsets. Methods: Lymphocyte subsets counted in peripheral blood of 56 patients with advanced cancer and 42 cases of healthy people were compared by the flow cytometry. Results: CD8+ ratio of patients with advanced cancer was significantly higher than that of the healthy people, CD4+, CD4+/CD8+ ratio and B cell subgroup were significantly lower in cancer patients than that of the healthy people (all P<0.05). CD3+ ratio was higher in cancer patients and NK ratio was lower, but the differences were not statistically significant (P>0.05). Conclusion: Cellular immune function and humoral immune function of patients with advanced cancer are lower than that of healthy people, and the humoral immune function dropped significantly, this finding is instructive on how to improve the clinical application of immunity drugs.

[Key words] Lymphocyte subsets; Immune function; Flow cytometry

近年來，腫瘤發(fā)病率逐年增加，研究表明惡性腫瘤患者普遍存在免疫功能低下[1]，其發(fā)生是多因素、多階段的，與機體免疫系統(tǒng)間的相互作用機制十分復(fù)雜[2]，本文運用流式細胞術(shù)的方法，檢測并分析惡性腫瘤患者和健康人淋巴細胞亞群的特點，探討腫瘤對患者免疫功能的影響，對臨床具有指導(dǎo)作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年1月～2010年12月我院健康體檢者和腫瘤患者，總共98例。其中，健康體檢者（健康組）42例，男24例，女18例；年齡45~64歲，平均53.2歲。腫瘤患者（腫瘤組）56例，均經(jīng)過病理或細胞學(xué)確診且臨床分期為Ⅳ期；其中，男30例，女26例；年齡43~67歲，平均54.5歲；肺癌22例，大腸癌18例，乳腺癌14例，其他2例。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 試劑和儀器

美國Beckman Coulter 公司四色數(shù)字化流式細胞儀及其相應(yīng)配套試劑。

1.3 標(biāo)記和檢測

采集腫瘤患者及健康體檢者血標(biāo)本，取標(biāo)記抗體各10 μl 分別加入TruCOUNT試管管底，然后加入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血100 μl，充分混勻，室溫避光染色20 min，再加入溶血素500 μl，充分混勻，室溫避光15 min，再加500 μl的磷酸鹽緩沖液（PBS），室溫避光10 min，后進行流式細胞術(shù)分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

全部數(shù)據(jù)用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件處理。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T淋巴細胞亞群表達水平比較

腫瘤組與健康組比較，T淋巴細胞亞群中CD3+比值升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組B細胞亞群與NK細胞表達水平比較

腫瘤組與健康組比較，B細胞亞群比值下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），NK細胞活性下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

3 討論

腫瘤的發(fā)生和發(fā)展是一個非常復(fù)雜的過程，研究表明，腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與機體免疫功能具有密切的關(guān)系，免疫力低下的人群腫瘤發(fā)生率高，而腫瘤發(fā)生后又能產(chǎn)生免疫抑制因子抑制宿主的免疫功能[3]。腫瘤發(fā)生后機體抗腫瘤免疫的效應(yīng)機制以由T淋巴細胞介導(dǎo)的細胞免疫為主，根據(jù)是否表達CD4或CD8分子，T細胞可分為CD4+ T細胞或CD8+ T細胞，CD4+ T淋巴細胞具有細胞毒性作用及輔助B細胞產(chǎn)生抗體等作用，CD8+ T淋巴細胞可特異性殺傷靶細胞。本實驗晚期腫瘤患者T細胞亞群中CD8+比值上升，CD4+、CD4+/CD8+比值下降，T 淋巴細胞亞群比例失調(diào)，可以說明晚期惡性腫瘤患者的細胞免疫在一定程度上受到抑制，與相關(guān)報道一致[4]，機體通過T淋巴細胞調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)抗原引起的免疫應(yīng)答及清除細胞表面抗原或細胞內(nèi)微生物的效應(yīng)作用減弱。

近年來，關(guān)于腫瘤患者的體液免疫實驗報道不一，對B淋巴細胞亞群的研究也較少[5]，腫瘤的體液免疫是B細胞及抗體依賴的殺傷作用，同時誘導(dǎo)T細胞對腫瘤的應(yīng)答，發(fā)揮抗腫瘤作用。本實驗通過腫瘤患者及健康體檢者比較可以看出腫瘤患者B細胞亞群明顯下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），可以提示晚期腫瘤患者的體液免疫功能受到抑制，使其通過激活補體系統(tǒng)溶解腫瘤細胞，抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒作用、抗體的調(diào)理作用等減弱，從而使機體免疫功能下降，同時，T淋巴細胞和B淋巴細胞在免疫過程中是相互影響、相互制約的，但B細胞亞群有可能較T細胞亞群更加靈敏地反映機體的免疫功能狀況。

NK細胞是正常機體中對腫瘤細胞具有高度細胞毒性作用的淋巴樣細胞，主要通過穿孔素依賴和穿孔素非依賴的機制控制腫瘤生長及其轉(zhuǎn)移。NK細胞又是不同于T、B淋巴細胞的淋巴細胞群。它們在體內(nèi)相對較少，來源于骨髓的大顆粒細胞。它們不需預(yù)先致敏即能分泌細胞毒因子，從而殺傷腫瘤細胞[6]，在抗腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用。大量研究工作已證實，宿主對機體內(nèi)發(fā)生的腫瘤組織有自發(fā)性抵抗現(xiàn)象[7]，而生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑可逆轉(zhuǎn)腫瘤誘導(dǎo)的對NK細胞的抑制作用。但在本實驗結(jié)果中，NK活性沒有統(tǒng)計學(xué)意義，尚不能體現(xiàn)晚期腫瘤患者機體NK細胞發(fā)揮殺傷腫瘤細胞作用。

結(jié)合本研究，晚期腫瘤患者細胞免疫和體液免疫均受到不同程度的抑制，與相關(guān)報道結(jié)果一致[8]，體液免疫較細胞免疫下降明顯，提示B細胞亞群有可能較T細胞亞群更早地反映機體的免疫功能狀況，晚期腫瘤患者體液免疫可能優(yōu)于細胞免疫顯示患者的免疫功能狀況。同時，惡性腫瘤患者免疫功能如果能夠提高，可能有利于腫瘤的控制，這也給臨床醫(yī)生應(yīng)用提高免疫力藥物提供了依據(jù)。由于本研究病例數(shù)少，筆者將增加樣本進一步深入研究。

[參考文獻]

[1]王潤潔,胡紅,黃芳,等.胃癌患者外周血淋巴細胞免疫功能的變化及臨床意義[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2009,16(9):26-28.

[2]王桂芝,秦文華.化療對腫瘤患者淋巴細胞亞群的影響[J].中華全科醫(yī)學(xué),2009,7(12):1307-1308.

[3]Yo Koyama WM. Natural kill cell receptors specific for major histocompatibilty complex.Class I moleculesproc [J]. Natl Acad Sci USA,1995,(92):3081.

[4]齊紅,石虹,劉玉俠,等.253 例惡性腫瘤患者外周血T 細胞亞群的檢測及其臨床意義分析[J].中國實驗診斷學(xué),2009,13(11):1589-1590.

[5]Geunwoong N, Jae HL. Regulatory B cells and allergic diseases [J]. Allergy Asthma Immunol Res,2011,3(3):168-177.

[6]肖剛,趙則.結(jié)直腸癌患者外周血中CD4+、CD45、RA+和CD4+、CD43、RO+ T細胞的變化意義[J].中華腫瘤雜志,2003,25(4):362-364.

[7]Maehara Y, Tomisaki S, Oda S, et al. Lymph node metastasis and relation to tumor growth potential and local immune response in advanced gastric cancer [J]. Cancer,1997,74(2):224.

[8]烏蘭圖雅,王士勇,杜微麗,等.晚期肺癌患者免疫功能的系統(tǒng)評價及臨床意義[J].中國肺癌雜志,2010,13(4):331-336.

（收稿日期：2011-07-26）

[作者簡介] 鄭淑君（1984-），女，碩士，醫(yī)師，主要從事腫瘤內(nèi)科的診斷和治療。