陳美田，董雪菊，張孝瑩

(1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟南250012;2.辰欣藥業(yè)股份有限公司，山東濟寧272031)

克林霉素磷酸酯注射液的臨床應(yīng)用主要適用于革蘭陽性菌和厭氧菌引起的多種感染性疾病.其化學(xué)名稱為:6－(1－甲基－4－丙基－2－吡咯烷碳酰胺基)－1－硫代－甲基－7－氯－6，7，8－三脫氧－L－蘇式－α－D－半乳糖吡喃糖苷－2－二氫磷酸酯，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為:

根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)式分析其可能存在的雜質(zhì):林可霉素、克林霉素、林可霉素－2磷酸酯等.我們根據(jù)克林霉素磷酸酯結(jié)構(gòu)式及其可能存在的雜質(zhì)進行了研究分析.

克林霉素磷酸酯分子結(jié)構(gòu)中含有磷酸酯鍵，硫甲基，鹵素等活潑基團，易發(fā)生水解，氧化，取代，消除，重排等反應(yīng).分子中含有硫原子，易被氧化產(chǎn)生高價硫.或在酸性條件下磷酸酯鍵和硫甲基易水解.在堿性或受熱時化合物容易產(chǎn)生鹵素水解和消除反應(yīng).在上述降解過程中還會發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng).根據(jù)以上的結(jié)構(gòu)分析，確定影響本產(chǎn)品質(zhì)量的影響因素，并進行對比實驗.

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(日本島津);pH計(上海雷磁儀器廠);電子恒溫水浴鍋(上海精宏實驗設(shè)備有限公司).克林霉素磷酸酯(山東魯抗辰欣藥業(yè)自制).

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:用辛烷(C8)基硅烷鍵合硅膠為填充劑;檢測波長:210 nm;流速:1.0 mL·min－1;流動相:磷酸二氫鉀溶液(取磷酸二氫鉀10.54 g溶于775 mL水中，用85%磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.5)－乙腈(775∶225).理論板數(shù)按克林霉素磷酸酯峰計算，應(yīng)不低于1 500.

2.2 pH值 根據(jù)克林霉素磷酸酯的結(jié)構(gòu)判斷，該藥的磷酸酯鍵和7位氯容易水解，較不穩(wěn)定.中性環(huán)境有利于抑制磷酸酯鍵的水解生成克林霉素，酸性環(huán)境有利于抑制7位氯的水解，因此對pH做了詳細(xì)的考察.

根據(jù)對本產(chǎn)品的質(zhì)量考察得出:克林霉素磷酸酯注射液在生產(chǎn)、貯藏過程中變化最大的雜質(zhì)是相對保留時間為0.6的林可霉素－2磷酸酯和相對保留時間為1.4的克林霉素，它們分別是克林霉素磷酸酯7位氯和2位磷酸酯水解產(chǎn)物.我們將這兩個雜質(zhì)作為主要考察對象，配制了一系列pH值的樣品，100℃滅菌15 min后進行HPLC分析，結(jié)果如下:

表1 克林霉素磷酸酯的pH測定結(jié)果

圖2 不同滅菌時間主要雜質(zhì)含量變化圖

2.3 滅菌時間 我們將產(chǎn)品放入100℃水浴中滅菌，分別放入 5、10、15、20、30、45、60 min 后取樣進行有關(guān)物質(zhì)檢查，同時檢測0時數(shù)據(jù).對兩個主要雜質(zhì)在100℃滅菌時隨時間的變化情況進行了研究，結(jié)果見圖2、表2.

表2 滅菌實驗測定結(jié)果

由圖2可知，這兩個雜質(zhì)的量均隨滅菌時間增加而增大，同時可以看出本品不能耐受高溫滅菌，高溫下本品還會產(chǎn)生許多新雜質(zhì)，并且會放出硫化氫的氣味.

3 結(jié)論

克林霉素是克林霉素磷酸酯的特定雜質(zhì)，它是克林霉素磷酸酯在體內(nèi)代謝產(chǎn)生的藥效成分.林可霉素－2磷酸酯屬于非特定雜質(zhì)，其藥理作用也未知，屬于需要嚴(yán)格控制的雜質(zhì).根據(jù)雜質(zhì)隨pH值變化圖，應(yīng)該選擇盡可能低的pH值，但在實際生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)料液在pH值6.1以下變得特別粘稠，克林霉素磷酸酯很容易析出，所以實際生產(chǎn)pH值控制在6.1左右比較合適.從滅菌實驗可以看出，本品注射劑不適合在高溫條件下生產(chǎn).因此采用凍干粉針和無菌生產(chǎn)工藝除菌過濾的小針劑在臨床使用上更安全.