翟美華，朱 琳

(江蘇省南通藥品檢驗所，江蘇南通226006)

注射用脂溶性維生素(Ⅱ)為維生素類藥，為腸外營養(yǎng)組成部分，用以滿足人體對維生素的生理需要，在對藥品質量監(jiān)控的抽樣檢驗中發(fā)現(xiàn)，目前臨床使用的產品存在相同名稱不同規(guī)格不同標準的現(xiàn)象并不鮮見，同時在對維生素A的含量測定時也遇到了一些問題，現(xiàn)圍繞標準中維生素A的含量測定與同行進行探討.

1 質量標準

因檢驗工作需要獲取了兩份有關注射用脂溶性維生素(Ⅱ)的質量標準，兩者之間存在較大差異(見表1).

表1 兩質量標準比較

2 實驗方法與結果

2.1 儀器、試劑與樣品 Agilent1100色譜系統(tǒng);色譜柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB － C8(4.6 mm ×150 mm，5 μm)，Diamonsil C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm);維生素 A 棕櫚酸酯:SIGMA公司提供;甲醇為色譜純，乙醇為分析純;注射用脂溶性維生素(Ⅱ):市場抽樣A公司(樣品1)及B公司(樣品2、3).

2.2 實驗方法

2.2.1 色譜條件 按表1的兩個色譜條件測定.

2.2.2 對照溶液(參考物質溶液)的制備 取維生素A棕櫚酯約20 mg，置100 mL量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過，即得.

2.2.3 供試品溶液的制備 取注射用脂溶性維生素(Ⅱ)內容物適量(約相當于維生素A棕櫚酯2 mg)，置10 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過，即得.

2.2.4 樣品測定及結果 取樣品溶液按2.2.1色譜條件分別測定，以維生素A棕櫚酸酯(標準一規(guī)定:每克維生素A棕櫚酸酯相當于0.545 7 g維生素A)為參考測得兩種色譜條件下的結果，見表2.

改變色譜條件中色譜柱與流動相的配對情況，得到不同形狀的色譜圖，見表3及圖1.

表2 樣品測定結果比較(%)

表3 不同色譜柱與流動相的色譜圖對比表

圖1 不同色譜柱與流動相的色譜圖

3 討論

3.1 對照品的使用 維生素A棕櫚酯對照品是注射用脂溶性維生素(Ⅱ)質量控制中不可或缺的標準物質(參考物質)，藥品管理法規(guī)定國務院藥品監(jiān)督管理部門的藥品檢驗機構負責標定國家藥品標準品、對照品，國務院藥品監(jiān)督管理部門指定的單位即為中國藥品生物制品檢定所，但中國藥品生物制品檢定所所能提供對照品目錄中沒有維生素A棕櫚酯.在藥品監(jiān)督抽驗和評價性抽驗檢驗過程中，按國家有關規(guī)定必須采用國家對照品，對于無國家對照品的檢測項目，檢驗單位一般不檢驗或不對該項目做結論，如此現(xiàn)象會造成對藥品質量監(jiān)控的數(shù)據(jù)缺失而導致監(jiān)管的失控，因此建議在制定藥品質量標準時應考慮到對照品的因素.

3.2 質量標準方面

3.2.1 藥品名稱相同的不同或相同規(guī)格或劑型的制劑，因生產單位的不同而執(zhí)行不同的質量檢驗標準，此類現(xiàn)象在我國現(xiàn)階段是一個不可回避的現(xiàn)實，藥品質量標準是保證藥品檢驗結果正確的前提，是保證檢驗報告書正確、科學、嚴謹?shù)年P鍵，對于藥品檢驗機構而言只有嚴格執(zhí)行藥品質量標準，而對標準的正確性、科學性、嚴謹性只能進行實驗性的探討.制定藥品質量標準的目的是控制其質量，標準的制定必須遵循一個指導原則，即質量標準分析方法的驗證，《中國藥典》附錄收載了藥品質量標準分析方法指導原則，可供含量測定參考的驗證內容有:準確度、精密度、專屬性、線性、范圍、耐用性.就耐用性而言是指測定條件有小的變動時，測定結果不受影響的承受程度，為使方法可用于常規(guī)檢驗提供依據(jù)，本次實驗涉及的是并非是對質量標準進行的驗證試驗，而是對測定方法的探討，因其變動的因素不僅有流動相的組成還有色譜柱類型的改變.

3.2.2 本次實驗兩個質量標準針對的是兩個規(guī)格的樣品，但它們檢測的主藥成分是相同的(標準二中的維生素A最終也是以維生素A棕櫚酸酯作為檢測的參考依據(jù)).標準一處方中的維生素A按《中國藥典》的要求應為維生素A醋酸酯，對于維生素A醋酸酯與維生素A棕櫚酸酯在高效液相色譜中的分配行為差異未作進一步考察，但從同一份樣品兩種方法的檢測結果看，標準一采用的色譜條件優(yōu)于標準二采用的色譜條件，因從色譜圖上看多一個色譜峰就說明有一個物質的存在，不考慮量的因素這也是一個質的區(qū)別.對色譜法的專屬性不僅需說明諸成分的色譜位置，且要求各組分之間的分離度符合要求.

3.2.3 按《中國藥典》的標準規(guī)定維生素A系由維生素A醋酸酯結晶加精制植物油制成的油溶液.維生素A醋酸酯在植物油中的溶解度較棕櫚酸酯小，天然維生素A主要是全反式維生素A，尚有多種其他異構體，維生素A還因其含有多個不飽和鍵而導致其性質不穩(wěn)定.2010年版《中國藥典》對維生素A測定法進行了修訂，增加了高效液相色譜法，采用的是正相色譜法，并規(guī)定維生素A醋酸酯主峰與其順式異構體的分離度應大于3.0.本文所用標準因樣品原因采用的是反相色譜法，從實驗結果看，改變固定相及流動相的極性對測定結果有較大影響，辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(C8柱)的分離效果明顯高于十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(C18柱)的分離效果.

3.2.4 從實驗的結果簡單分析，影響維生素A含量測定的因素較多，樣品的穩(wěn)定性是必然的考慮因素，高效液相色譜系統(tǒng)的固定相與流動相的優(yōu)化選擇直接影響到實驗結果的準確性，從本次實驗結果看，維生素A(維生素A醋酸酯)與維生素A棕櫚酸酯在相同色譜條件下色譜行為直觀上的表現(xiàn)基本一致，但兩種方法測定結果存在一定差異，需要對維生素A(維生素A醋酸酯)與維生素A棕櫚酸酯在測定中的關系作進一步探討.

3.2.5 試行的藥品標準超過試行期的使用也較常見，本次實驗涉及的標準由生產單位提供，均為試行標準，試行期均為2年，試行開始日期分別為2005年12月15日和2006年4月28日，均已超過了標準頒布的試行期限而未有新的替代標準.

3.3 小結 對本次實驗探討的問題:一是制定的質量標準的科學性;二是試行標準的時效性;三是藥品檢驗中標準物質(對照品)應用的可行性;四是同類藥品標準的規(guī)范性;五是藥品質量的可控性.