江蘇省泰州市食品藥品檢驗(yàn)所（225300） 柏大為 錢桂英

2005年版《中國藥典》（一部）規(guī)定的溶出度測(cè)定方法為紫外分光光度法（UV），該方法操作過程較繁瑣，且結(jié)果易受試劑影響。為此，筆者建立了測(cè)定頭孢拉定膠囊溶出度的高效液相色譜法（HPLC），并與UV法進(jìn)行了比較。

1 儀器與試藥

附圖 頭孢拉定溶出度HPLC圖譜

WATERS 2695-2996液相色譜儀（美國Waters公司）；UV2550紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；RC-3B藥物溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）；METTLER AG135電子天平（梅特勒公司）。頭孢拉定對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為130427-200306，含量為91.8%）；頭孢拉定膠囊（揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)為10040612，規(guī)格為250mg／粒；上海衡山藥業(yè)有限公司，批號(hào)為091212，規(guī)格為250mg／粒；北京京豐制藥有限公司，批號(hào)為091215，規(guī)格為250mg／粒）；乙腈（色譜純）；其余試劑（分析純）；水（純化水）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜條件中，色譜柱：Shimadzu VP-ODS C18柱（250mm×4.6mm，5mm）；流動(dòng)相：水-4%醋酸溶液-3.86%醋酸鈉-甲醇（1564∶6∶30∶400）；流速：1.0ml／min；檢測(cè)波長：254nm；進(jìn)樣量：20μl。

2.2 溶出條件[1][2]溶劑：以醋酸鹽緩沖液（pH5.5）（取0.04mol/L醋酸鈉溶液，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH為5.5）900ml；轉(zhuǎn)速：100 r/min；取樣時(shí)間：45min。

2.3 測(cè)定方法 精密稱取頭孢拉定對(duì)照品適量（約相當(dāng)于頭孢拉定27mg），置100ml量瓶中，加醋酸鹽緩沖液（pH5.5）超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過。取續(xù)濾液20μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。另取樣品，按照2.2項(xiàng)下條件處理，取溶液，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按“2.1”項(xiàng)的色譜條件，精密量取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算出每片的溶出量。限度為標(biāo)示量的80%，應(yīng)符合規(guī)定。

2.3.1 回收率試驗(yàn) 按處方比分別精密稱取相當(dāng)于樣品標(biāo)量的50%、80%、100%的頭孢拉定對(duì)照品及相應(yīng)量的空白輔料，加醋酸鹽緩沖液（pH5.5）適量，振搖使頭孢拉定溶解，并加醋酸鹽緩沖液（pH5.5）至規(guī)定濃度，搖勻，濾過。取濾液按“2.2”項(xiàng)的色譜條件測(cè)定，對(duì)本法的準(zhǔn)確性進(jìn)行考察。結(jié)果平均回收率為99.6%（RSD=0.8%）。

2.3.2 方法學(xué)考察 線性關(guān)系考察：精密稱取頭孢拉定對(duì)照品0.02574g，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，取0.25 ml、0.5 ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0ml，分別置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋到刻度，搖勻。精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積。以質(zhì)量濃度對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=4.12506×10-7X+0.00l79228，r=0.999 7（n=7）。結(jié)果表明，頭孢拉定質(zhì)量濃度在0.02174～1.0236g/L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3.3 溶出曲線的繪制[1][2]取本品，按溶出度測(cè)定法（《中國藥典》2005年版二部附XC第一法），以醋酸鹽緩沖液（pH5.5）溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為10r/min，依法操作，在5min、10min、15min、30min、45min和60min時(shí)，分別以溶液5ml濾過，并及時(shí)在操作容器中補(bǔ)充上述溶劑5ml。另取頭孢拉定對(duì)照品適量，用上述溶出介質(zhì)溶解稀釋制成每lml中含0.16mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。按“2.2”項(xiàng)的色譜條件，精密量取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算出每片的溶出量。結(jié)果見附表和附圖。

附表 頭孢拉定膠囊溶出度測(cè)定結(jié)果（方法l為UV，方法Ⅱ?yàn)镠PLC）

3 討論

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，頭孢拉定膠囊溶出度檢查采用對(duì)照品對(duì)照比自身對(duì)照所得的檢驗(yàn)結(jié)果，與含量測(cè)定項(xiàng)下所測(cè)得的結(jié)果一致，即含量測(cè)定采用高效液相色譜法更能有效地分離不同的組分，減少頭孢氨芐對(duì)測(cè)定的影響。說明采用對(duì)照品對(duì)照比自身對(duì)照所得的檢驗(yàn)結(jié)果較能真實(shí)、客觀地反映藥品的質(zhì)量。