張斌國 欒清欣

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是常見的自身免疫性疾病之一，可累及多器官系統(tǒng)，主要侵犯關(guān)節(jié)滑膜，表現(xiàn)為滑膜組織的異常增生，大量炎性細(xì)胞浸潤及軟骨與骨的進(jìn)行性破壞。研究表明表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)具有刺激多種組織和細(xì)胞分裂、增殖和分化的作用［1］。多種細(xì)胞因子參與了RA的發(fā)病與演變，Koichiro等［2］報(bào)告RA患者滑膜液中EGF升高。本實(shí)驗(yàn)通過檢測RA患者與正常人血清中EGF水平的變化，探討EGF在診斷RA中的意義及其在RA發(fā)病過程中可能起到的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至6月在我院住院的初治RA患者36例，所有患者均符合1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)、既往未服用過激素或改善病情藥物。其中男5例，女31例。年齡24～59歲，平均(49.49±8.01)歲。依照患者雙手X線的檢查結(jié)果將RA患者分為單純骨質(zhì)疏松組(Ⅰ～Ⅱ級)和骨質(zhì)破壞組(Ⅲ～Ⅳ級):單純骨質(zhì)疏松組平均病程為(5.86±1.35)個(gè)月;骨質(zhì)破壞組平均病程為(10.67±3.58)個(gè)月。20例正常健康對照者均來自我院體檢中心健康體檢者，其中男4例，女16例。年齡20～64歲，平均(51.46±13.24)歲。各組在年齡、性別等方面均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 方法 抽取清晨空腹靜脈血3 ml，離心后取上清液，置于PC管中-20℃保存，同批次檢測。血清EGF水平測定采用雙抗體夾心ELISA法，試劑盒由美國Rapid Bio Lab公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明書的程序進(jìn)行操作。全自動(dòng)酶免分析儀(瑞士Hamilton公司 MicroLab STAR IVD ELISA型-8通道)450 nm處測OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算EGF濃度值。分別采用免疫比濁法、瓊脂擴(kuò)散法、魏氏法檢測類風(fēng)濕因子(RF)，C反應(yīng)蛋白(CRP)，紅細(xì)胞沉降率(ESR)。異常值判定均參考同期該項(xiàng)檢查的正常值。并收集整理患者其他臨床資料做對比。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清EGF水平的比較(見表1) RA患者血清EGF水平顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 RA患者與正常對照組血清EGF水平(±s)

表1 RA患者與正常對照組血清EGF水平(±s)

組別 例數(shù) EGF(pg/ml)20 52.58±2.6036 110.15±9.12對照組RA組

2.2 RA患者單純骨質(zhì)疏松組與骨質(zhì)破壞組血清EGF水平的比較(見表2)骨質(zhì)破壞組血清EGF水平顯著高于單純骨質(zhì)疏松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表2 RA患者單純骨質(zhì)疏松組與骨質(zhì)破壞組血清EGF水平

2.3 RA患者血清EGF水平與臨床類風(fēng)濕活動(dòng)指標(biāo)之間的相關(guān)性 血清EGF水平與RF、ESR及CRP之間無明顯相關(guān)性(r=0.06，P ＞0.05;r=0.25，P ＞0.05;r=0.26，P ＞0.05)。

3 討論

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，簡寫RA)又稱類風(fēng)濕，是一種常見病、多發(fā)病，目前公認(rèn)是一種自身免疫性疾病。可能與內(nèi)分泌、營養(yǎng)、地理、職業(yè)、心理和社會(huì)環(huán)境的差異、細(xì)菌和病毒感染及遺傳因素等方面有關(guān)系。各種細(xì)胞因子和趨化因子在RA的發(fā)病過程中發(fā)揮著重要作用。

目前對于RA的研究主要集中于滑膜細(xì)胞的類腫瘤性研究。人們注意到RA滑膜中存在過量的細(xì)胞因子、受體和與其有同源性的癌基因產(chǎn)物，它們可能作用于滑膜細(xì)胞信號傳導(dǎo)途徑的不同部位，導(dǎo)致持續(xù)的信號傳導(dǎo)，從而引起RA滑膜細(xì)胞的無限制增生［3］。該病好發(fā)于手、腕、足等小關(guān)節(jié)，以手的近端指間關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)、足的庶趾關(guān)節(jié)最為常見，反復(fù)發(fā)作，呈對稱分布。早期有關(guān)節(jié)紅腫熱痛和功能障礙，晚期關(guān)節(jié)可出現(xiàn)不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎縮，極易致殘。從病理改變的角度來看，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)種主要累及關(guān)節(jié)滑膜(以后可波及到關(guān)節(jié)軟骨、骨組織、關(guān)節(jié)韌帶和肌鍵)，其次為漿膜、心、肺及眼等結(jié)締組織的廣泛性炎癥性疾病。

表皮生長因子(EGF)由53個(gè)氨基酸組成，相對分子質(zhì)量為6054u，是1959年在神經(jīng)生長因子研究過程偶然被發(fā)現(xiàn)的。它具廣泛生物學(xué)效應(yīng)，是強(qiáng)有力的促細(xì)胞分裂因子，能加速蛋白質(zhì)、DNA和RNA的合成，能刺激體內(nèi)或體外培養(yǎng)的多種組織和細(xì)胞的分裂、增生、分化［1］。因其具有強(qiáng)有力的促細(xì)胞分裂、增殖及分化作用，近年成為腫瘤及創(chuàng)傷愈合等研究的熱點(diǎn)。由于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病理表現(xiàn)為滑膜組織的異常增生，所以近年來，其與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病關(guān)系的研究逐漸受到關(guān)注［4］。有研究報(bào)道RA的關(guān)節(jié)液及滑膜組織中EGF的含量高于骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis，OA)［5］。Farahat等研究 EGF與其他的細(xì)胞因子的關(guān)系，表明RA患者滑膜組織中IL-1α、IL-1β、IL-δ、TNF-α、GM-CSF 與 EGF 的表達(dá)均高于 OA。說明EGF與上述細(xì)胞因子同時(shí)參與了RA的病理過程。目前國內(nèi)外對采用免疫組化方法檢測RA滑膜及滑液中EGF表達(dá)的研究報(bào)道較多［6，7］，對血清中EGF的水平變化與RA發(fā)病機(jī)制關(guān)系的研究較少。

本研究表明健康人血清中EGF表達(dá)較少，而RA患者血清中的EGF水平則顯著升高。骨質(zhì)破壞組的EGF水平明顯高于單純骨質(zhì)疏松組，故推測EGF可能參與了RA的發(fā)病過程，并且一定程度上提示EGF在RA的關(guān)節(jié)破壞中發(fā)揮著重要作用。血清EGF的水平與患者的RF，ESR，CRP等臨床類風(fēng)濕活動(dòng)指標(biāo)沒有明顯相關(guān)性，表明EGF與疾病的活動(dòng)性無關(guān)。本研究提示EGF在診斷RA患者中有一定的臨床價(jià)值，可能部分地參與RA的關(guān)節(jié)骨質(zhì)破壞過程。然而EGF所致的關(guān)節(jié)骨質(zhì)破壞的機(jī)制還不清楚，還有待于進(jìn)一步研究。可以作為RA診斷手段的有益補(bǔ)充，因此具有廣泛的臨床應(yīng)用和研究前景。

［1］宋丹，方秀.表皮生長因子的研究進(jìn)展.解剖科學(xué)進(jìn)展，2002，8(4):390-342.

［2］Koichiro S，Shinichi K，Masayuki S，et al.Involvement of ErbB22 in rheumatoid synovial cell growth.Arthritis Rheum，2001，44(2):260-271.

［3］燕太強(qiáng)，呂厚山，藥立波.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞酪氨酸激酶信號傳導(dǎo)系統(tǒng).中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，1999，3(2):121-123.

［4］Lui KE，Panchal AS，Santhanagopal A，et al.Epidermal growth factor stimulates proton efflux from chondrocytic cells.J Cell Physiol，2002，192(1):102-112.

［5］Farahat MN，Yanni G，Poston R，et al.Cytokine expression in synovial membranes of patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis.Ann Rheum Dis，1993，52:870-875.

［6］林星，鄭斌生，林玲，等.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎表皮生長因子及β2微球蛋白的測定.現(xiàn)代診斷與治療，2004，15(6):327-328.

［7］燕太強(qiáng)，呂厚山，藥立波，等.表皮生長因子對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞的作用.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2000，4(5):270-273.