郭 飛，趙銘山

(濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東濱州 256603)

特發(fā)性肺纖維化是一種原因不明的疾病，近年來發(fā)病率呈增加趨勢，但臨床缺乏有效治療方法，預(yù)后較差。許多學(xué)者研究證實，丹參在抗肺纖維化中作用確切、效果顯著[1，2]。丹參素作為丹參的主要單體，是否同樣對肺纖維化有治療作用，值得進(jìn)一步研究。2010年 8～10月，我們應(yīng)用丹參素對博萊霉素致肺纖維化大鼠進(jìn)行干預(yù)，以探討丹參素治療肺纖維化的可能作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 ①動物:健康 SD大鼠 40只，體質(zhì)量180～220 g，6～7周齡，雄性，山東綠葉制藥有限公司提供，按清潔級標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)。②藥物:博萊霉素(每支 15 mg，1 mg=1 U)，日本化藥株式會社生產(chǎn)，批號 991390;地塞米松磷酸鈉注射液，山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司，批號 100102311;注射用丹參素鈉，山東綠葉制藥有限公司，批號 050208。③試劑及儀器:超氧化物歧化酶(SOD)測試盒、丙二醛(MDA)及羥脯氨酸(HYP)測試盒，南京建成生物工程公司提供;酶標(biāo)儀，型號 SYNERGY HT，美國 BIO-TEK公司生產(chǎn)。

1.2 方法 ①動物模型的建立:大鼠隨機(jī)分為 4組，每組 10只。模型組、地塞米松組及丹參素組給予博萊霉素 5 mg/kg氣管內(nèi)一次性注入[3];正常組給予生理鹽水 1 mg/kg氣管內(nèi)一次性注入。②給藥方法:丹參素組給予丹參素每日 15 mg/kg腹腔注射;地塞米松組給予地塞米松每日 1 mg/kg腹腔注射;模型組及正常組給予生理鹽水每日 2 ml腹腔注射。③標(biāo)本處理:注藥 28 d后統(tǒng)一處死所有大鼠。取左肺，以 100 g肺組織加入 1 ml 0.9%鹽水制備肺組織勻漿，進(jìn)行 SOD、MDA及 HYP測定，均按照測試盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件，結(jié)果以±s表示，組間進(jìn)行方差分析及多重比較。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型組與正常組比較，SOD含量明顯降低(P＜0.05)，MDA及 HYP含量明顯增高(P＜0.05)，表明肺纖維化模型制造成功。丹參素組與模型組比較，SOD含量明顯增高(P＜0.05)，MDA及 HYP含量明顯降低(P＜0.05)，說明丹參素對肺纖維化有治療作用。丹參素與地塞米松組比較，SOD、MDA及 HYP含量的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 肺組織勻漿中 SOD、MDA及 HYP含量比較(±s)

表1 肺組織勻漿中 SOD、MDA及 HYP含量比較(±s)

注:與正常組比較，*P＜0.05;與模型組比較，△P＜0.05

組別 n SOD(μl/L) MDA(nmol/g)HYP(mg/g)正常組 10 761.24±15.66 6.28±0.26 1.63±0.18模型組 10 709.63±9.71* 7.80±0.29* 2.69±0.19*地塞米松組 10 750.91±11.46△ 7.12±0.30△ 1.98±0.16△丹參素組 10 752.02±12.73△ 6.95±0.32△ 2.07±0.14△

3 討論

肺纖維化的發(fā)病機(jī)制目前尚不十分清楚。研究顯示，肺纖維化的發(fā)生與多種細(xì)胞生物因子的異常表達(dá)、纖維化相關(guān)基因、纖維化相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活和自由基損傷有一定關(guān)系。研究證實，中藥丹參具有清除氧自由基、抗脂質(zhì)過氧化等多方面的藥理作用[4]。1980年張均田等從丹參中分離得 3，4-二羥基苯基乳酸即丹參素，以后又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)其十幾種水溶性成分。丹參的多種水溶性成分，如丹酚酸A、丹酚酸 B、丹酚酸 C等均由丹參素或與咖啡酸縮合而成[5]。由此可見，丹參素是丹參最為主要的一種單體成分。

本實驗?zāi)Ｐ徒M肺組織 HYP及 MDA含量顯著地高于正常組，說明博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化模型成功[6]。其發(fā)生機(jī)制可能為博萊霉素引起肺實質(zhì)細(xì)胞損傷，繼而發(fā)生肺間質(zhì)纖維母細(xì)胞聚集、大量膠原纖維沉積(組織修復(fù))從而導(dǎo)致肺纖維化[7]。建模后 28 d，丹參素治療組能顯著地提高肺組織 SOD的活性，其機(jī)制可能是丹參素通過激活 SOD，抑制和清除自由基，改善氧化與抗氧化平衡，削弱炎癥反應(yīng)，減輕肺組織細(xì)胞膜的損傷等，對肺纖維化的發(fā)生發(fā)展起到一定緩解作用[8]。丹參素治療組肺組織MDA含量明顯低于模型組，說明丹參素可抑制或減輕脂質(zhì)過氧化作用，從而保護(hù)肺組織細(xì)胞免受損傷。丹參素治療組 HYP含量明顯低于模型組，說明丹參素對肺間質(zhì)纖維化病變有一定防治作用，其機(jī)制可能是通過減少膠原合成或者促進(jìn)膠原降解而發(fā)揮作用。

綜上所述，丹參素對博萊霉素致肺纖維化有明顯的治療作用。這雖為動物實驗結(jié)果，但為進(jìn)一步發(fā)揮丹參素對肺纖維化的防治作用奠定了基礎(chǔ)。

[1]陳祥銀，嚴(yán)儀昭，曾衛(wèi)東，等.丹參、川芎嗪及糖皮質(zhì)激素對肺纖維化保護(hù)作用的實驗研究[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，1987，10(3):152-153.

[2]陰健，郭力弓.中藥現(xiàn)代研究與臨床應(yīng)用[M].北京:學(xué)苑出版社，1993:176-180.

[3]Thrall RS，McCormick JR，Jack RM，et al.Bleomycin-induced pulmonary fibrosis in the rat[J].Am J Pathol，1979:95(1):117-130.

[4]丁章森.丹參的臨床藥理研究概況[J].湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2000，2(4):56-57.

[5]杜冠華，張均田.丹參現(xiàn)代研究概況與進(jìn)展(續(xù)一)[J].醫(yī)藥導(dǎo)報，2004，23(6):355-361.

[6]梁向艷，田瓊，劉立兵，等.中藥肺寧治療肺纖維化小鼠的病理學(xué)研究[J].科學(xué)技術(shù)與工程，2008，8(7):1785-1787.

[7]劉景艷.中藥對肺纖維化大鼠肺組織病理改變的作用[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(8):1191-1193.

[8]李玉虎，程國強(qiáng)，張輝，等.中藥復(fù)方轉(zhuǎn)移因子對 SiO2致肺纖維化的干預(yù)作用[J].上海中醫(yī)藥雜志，2007，41(12):57-59.