吳 巖，陳一鳴，程曉冬，施衛(wèi)國(guó)，顧震華，董 堅(jiān)，叢 軍

(1南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫第二醫(yī)院，江蘇無錫214002;2蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院常州市第一人民醫(yī)院)

腎癌屬于免疫原性腫瘤，其生物學(xué)行為復(fù)發(fā)多變，即使是小腎癌仍有轉(zhuǎn)移的潛力。因此，尋找敏感標(biāo)志物以早期發(fā)現(xiàn)、判斷預(yù)后及復(fù)發(fā)、指導(dǎo)個(gè)體化治療具有重要的臨床意義。B7-H4是B7家族成員，能通過抑制T細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子的產(chǎn)生和細(xì)胞周期的進(jìn)程來負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞的免疫應(yīng)答。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)B7-H4在多種腫瘤組織如腎細(xì)胞癌、卵巢癌、肺癌及子宮內(nèi)膜癌等［1，2］中呈高表達(dá)，但有關(guān)血清可溶性B7-H4(sB7-H4)與腎癌關(guān)系的報(bào)道較少見。2007年3月～2010年10月，我們采用ELISA法檢測(cè)40例腎癌根治術(shù)前后患者血清sB7-H4水平，結(jié)合病理資料探討其臨床意義。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 40例腎癌患者(腎癌組)中，男26例，女14例;年齡19～79(53．23±17．02)歲。Ⅰ期23例，Ⅱ期12例，Ⅲ/Ⅳ期5例。無其他系統(tǒng)來源腫瘤及其他系統(tǒng)性疾病。均行腎癌根治術(shù)，病理診斷均為腎透明細(xì)胞癌。另選健康查體者13例為正常對(duì)照(對(duì)照組)，其中男8例、女5例，年齡22～49(31．03 ±10．56)歲。

1．2 sB7-H4檢測(cè)方法 兩組均采集清晨空腹靜脈血，腎癌組分別取術(shù)前2 h及術(shù)后2、24 h和7、30、90、180 d的靜脈血。血樣靜置1 h后分離血清，小量分裝，－70℃保存。采用ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)兩組血清sB7-H4。所有樣本均在同一批次檢測(cè)，每個(gè)樣本設(shè)2個(gè)平行孔，取平均A值計(jì)算sB7-H4值。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件。數(shù)據(jù)以±s表示，先行方差齊性檢驗(yàn)，兩組間樣本均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，多組間樣本均數(shù)比較采用ANOVA檢驗(yàn)，相關(guān)性分析用 Linear線性回歸分析法。α=0．05。

2 結(jié)果

2．1 兩組血清sB7-H4水平比較 對(duì)照組血清sB7-H4為(11．56 ±4．96)μg/L;腎癌組術(shù)前 2 h為(23．05 ±18．97)μg/L，術(shù)后 2、24 h 和 7、30、90、180 d時(shí)分別為(24．96 ± 19．42)、(23．63 ± 18．78)、(20．04 ± 17．03)、(15．08 ± 13．69)、(13．56 ±11．53)、(12．08 ± 9．02)μg/L。腎癌組術(shù)前血清sB7-H4水平明顯高于對(duì)照組(P＜0．05)，術(shù)后血清sB7-H4水平隨時(shí)間的推移逐漸下降(P均＜0．05)，其中術(shù)后30 d及以后下降最為明顯(P均＜0．05)。

2．2 復(fù)發(fā)腎癌患者血清sB7-H4值變化 腎癌組中有3例術(shù)后1～3個(gè)月復(fù)發(fā)，其sB7-H4水平于術(shù)后90、180 d 時(shí)分別為(37．56 ±5．46)、(36．76 ±9．36)μg/L，超過術(shù)前及術(shù)后未復(fù)發(fā)者(P均＜0．05)。

2．3 腎癌患者血清sB7-H4與腎癌臨床分期及癌灶最大徑值的相關(guān)關(guān)系 術(shù)后2 h，Ⅰ期腎癌患者血清sB7-H4水平為(13．24 ±9．08)μg/L，低于Ⅱ期的(26．99 ±10．89)μg/L 和 Ⅲ/Ⅳ期的(53．63 ±27．22)μg/L，Ⅱ期者顯著低于Ⅲ/Ⅳ者(P均 ＜0．01)，腎癌患者血清sB7-H4水平與腫瘤分期呈正相關(guān)(r=0．537，P ＜0．05)。

癌灶最大徑值為4、6、8、10 cm 者，其患者血清sB7-H4 水平分別為 9．98、20．12、33．25、40．08 μg/L，腎癌患者血清sB7-H4水平與癌灶最大徑值呈線性正相關(guān)(r=0．651，P ＜0．05)。

3 討論

腎癌早期發(fā)現(xiàn)、早期治療可獲得較好的效果。但目前早期診斷主要依賴于醫(yī)學(xué)影像檢查，缺乏其他有效的診斷措施。血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物作為目前許多腫瘤早期篩查方法，可使腫瘤監(jiān)控及隨訪變得簡(jiǎn)單易行。但腎癌血清標(biāo)志物如血清淀粉樣蛋白(SAA)、碳酸苷酶Ⅸ(CAⅨ)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)等［3，4］，因缺乏特異性或在腎癌晚期才可檢測(cè)出，無法對(duì)腎癌作出早期診斷。

目前研究認(rèn)為［5］，B7-H4具有抑制T細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期進(jìn)展以及細(xì)胞因子合成從而達(dá)到下調(diào)T細(xì)胞免疫功能的作用，使機(jī)體對(duì)于腫瘤細(xì)胞的免疫殺傷及免疫監(jiān)視功能降低，為腫瘤的免疫逃逸創(chuàng)造了條件。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果［1，2］表明，肝癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌等癌細(xì)胞及腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞中B7-H4的表達(dá)均顯著高于正常人群。癌細(xì)胞中B7-H4的表達(dá)與其腫瘤臨床病理特征有關(guān)，B7-H4高表達(dá)的患者腫瘤復(fù)發(fā)率及病死率往往較高，預(yù)后較差［6］。我們認(rèn)為，腎癌作為一種免疫原性腫瘤，能夠通過多種機(jī)制逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視，B7-H4在其中可能起到重要的作用。

有研究［7，8］表明，腎癌組織中 B7-H4 呈高表達(dá)。但對(duì)于血清sB7-H4與腎癌關(guān)系的研究則少有報(bào)道。本研究通過測(cè)定腎癌根治術(shù)患者手術(shù)前后血清sB7-H4水平，并與正常人進(jìn)行比較，探討血清sB7-H4在腎癌診斷及預(yù)后評(píng)估等方面的臨床意義。本研究結(jié)果顯示，腎癌組血清sB7-H4水平顯著高于對(duì)照組，術(shù)前血清sB7-H4水平明顯高于術(shù)后，隨著術(shù)后時(shí)間的延長(zhǎng)，患者血清sB7-H4水平逐步下降，但復(fù)發(fā)患者術(shù)后sB7-H4水平隨腫瘤的復(fù)發(fā)而增高(P均＜0．05)。血清sB7-H4水平與腎癌臨床分期及癌灶最大徑值呈正相關(guān)關(guān)系(r=0．537、0．651，P 均＜0．05)，提示腎癌患者血清sB7-H4基礎(chǔ)水平可能較正常人高，腎癌患者血清sB7-H4水平與其病情進(jìn)展相關(guān)，檢測(cè)血清sB7-H4可用于腎癌的早期診斷及其預(yù)后和腫瘤復(fù)發(fā)等的判斷。sB7-H4主要表達(dá)在B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成熟的樹突狀細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞以及活化的T細(xì)胞，正常組織中B7-H4水平很低，術(shù)后隨訪其血清sB7-H4水平仍較正常人高，除去統(tǒng)計(jì)學(xué)誤差外，我們認(rèn)為還可能與患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)仍相對(duì)活躍有關(guān)。

術(shù)后復(fù)發(fā)的腎癌患者sB7-H4水平明顯高于術(shù)前，提示腎癌復(fù)發(fā)導(dǎo)致體內(nèi)腫瘤免疫逃避活躍，檢測(cè)血清sB7-H4對(duì)于預(yù)測(cè)早期腎癌轉(zhuǎn)移具有一定價(jià)值，但其特異性及敏感性比影像學(xué)確診能提前多長(zhǎng)時(shí)間，還有待于大樣本研究。

［1］Miyatake T，Tringler B，Liu W，et al．B7-H4(DD-O110)is overexpressed in high risk uterine endometrioid adenocarcinomas and inversely correlated with tumor T-cell infiltration［J］．Gynecol Oncol，2007，106(1):119-127．

［2］Awadallah NS，Shroyer KR，Langer DA，et al．Detection of B7-H4 and p53 in pancreatic cancer:potential role as a cytological diagnostic adjunct［J］．Pancreas，2008，36(2):200-206．

［3］ Kelly KJ，Kluve-Beckerman B，Zhang J，et al．Intravenous cell therapy for acute renal failure with serum amyloid A protein-reprogrammed cells［J］．Am J Physiol Renal Physiol，2010，299(2):453-464．

［4］Li G，F(xiàn)eng G，Gentil-Perret A，et al．Serum carbonic anhydrase 9 level is associated with postoperative recurrence of conventional renal cell cancer［J］．J Urol，2008，180(2):510-513．

［5］陳芳，朱旭昆，賀宇飛．可溶性BTLA真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其抗腫瘤作用［J］．華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，34(4):256-259．

［6］Crispen PL，Boorjian SA，Lohse CM，et al．Predicting disease progression after nephrectomy for localized renal cell carcinoma:the utility of prognostic models and molecular biomarkers［J］．Cancer，2008，113(3):450-460．

［7］Krambeck AE，Thompson RH，Dong H，et al．B7-H4 expression in renal cell carcinoma and tumor vasculature:associations with cancer progression and survival［J］．Proc Natl Acad Sci，2006，103(27):10391-10396．

［8］Thompson RH，Zang X，Lohse CM．Serum-soluble B7x is elevated in renal cell carcinoma patients［J］．Cancer Res，2008，68(15):6054-6058．