曾文坦,周宇丹,肖永輝
(廣東中山東鳳醫(yī)院,廣東 中山 528425)
PT衍生的Fg法,其原理是在檢測PT的同時通過測定凝固終點和起始點光散射強度的差值來推測出Fg的濃度,同時在實驗前必須用定標液進行定標,生成由不同已知Fg濃度與相應(yīng)的光散射差值關(guān)系(兩者成正比)的標準曲線,所以PT衍生的Fg法不僅節(jié)省時間,節(jié)省試劑,而且是一種非??茖W(xué)準確的測定方法,而并非簡單利用PT結(jié)果“計算出來”或“演算出來”。文章采用PT衍生的Fg法對110例病人血漿纖維蛋白原濃度進行測定,并與傳統(tǒng)的克勞斯法進行比較,報告如下。
1.1 檢測對象 臨床標本來源于隨機抽取的110例住院和門診血漿標本 (其中纖維蛋白原值<2.0g/L25例,纖維蛋白原值>4.5g/L35例,纖維蛋白原值大于2.0g/L小于4.5g/L 50例),所有標本采用真空采血管1:9枸櫞酸鈉(109mmol/L)抗凝,均在標本采集2h內(nèi)完成檢測。
1.2 儀器和試劑
1.2 .1儀器 儀器采用美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)的ACL ELIETE血凝分析儀。
1.2 .2 試劑 PT試劑 (ISI=1.21,批號N0402348)和FIB試劑 (批號 N0301888)以及質(zhì)控物 (批號N0201558)和校準液(批號 E0686661)均為 Beckman Coulter公司提供的原裝配套產(chǎn)品。
1.3 方法 標本采集后3000r/min離心10min,嚴格按照儀器和試劑操作規(guī)程進行操作。在ACL ELIETE凝血儀上分別用PT衍生法和Clauss法對110例標本進行纖維蛋白原濃度測定。
2.1 PT衍生的Fg法和Clauss法的重復(fù)性試驗;分別用兩種方法對兩分標本(混合血漿標本)各進行十次測定,兩種方法的檢測結(jié)果表明,高值變異系數(shù)分別為4.66%和2.72%,低值標本變異系數(shù)分別為4.93%和3.28%都比較小,說明兩種方法的重復(fù)性較好。結(jié)果如表1。
2.2 采用PT衍生法和Clauss法測定110例標本(纖維蛋白原值<2.0g/L25例,纖維蛋白原值>4.5g/L35例,纖維蛋白原值大于2.0g/L小于4.5g/L50例)的纖維蛋白原濃度進行測定,并對兩種方法的結(jié)果進行相關(guān)分析和t檢驗,兩種方法相關(guān)性較好,但PT衍生法結(jié)果偏高,并有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果如表2。
表1 PT衍生的FIB法和Clauss法的重復(fù)性試驗結(jié)果(CV%)
目前測定血漿纖維蛋白原的方法主要有理化方法(熱/鹽沉淀法)、凝固法和免疫學(xué)方法,其中凝固法應(yīng)用最多、最廣。Clauss法是在凝血酶作用下,使待測血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,血漿中纖維蛋白原的含量與凝固時間成負相關(guān),檢測結(jié)果與標準曲線比較可得出纖維蛋白原的含量。Clauss法是NCCLS推薦的纖維蛋白原常規(guī)測定方法[1]。PT衍生的纖維蛋白原測定法其原理是:在檢測PT的同時,通過測定凝固終點和起始點光散射強度的差值來推測出纖維蛋白原的濃度。
表2 PT衍生法和Clauss法測定病人結(jié)果比較
該實驗采用兩種方法檢測血漿纖維蛋白原的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)兩種方法結(jié)果有一定的差別,Clauss法結(jié)果相對偏低,與尹娟等[2,3]報道一致。兩種方法測定結(jié)果在統(tǒng)計學(xué)上有顯著性意義,相關(guān)性較好,但PT衍生法在疾病狀態(tài)下,由于溶栓過程中早、中期FDPs產(chǎn)物X、Y片段可產(chǎn)生一定的濁度影響比濁。相比之下,PT衍生法可以節(jié)省時間和試劑,但結(jié)果較Clauss法偏高,差別有統(tǒng)計學(xué)意義P<0.01,另外在準確度與重復(fù)性方面Clauss法要優(yōu)于PT衍生法。因此運用PT衍生法測定血漿纖維蛋白原濃度時,如果結(jié)果超出正常參考范圍,要采用Clauss法復(fù)查血漿纖維蛋白原濃度。
[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards H30-Aprocedure for the determination of fibrinogen in plasma;Approved Guideline[S].Pennsylvania:NCCLS,1999:99.
[2]尹 娟,李 荔,王曉紅.PT-衍生法和克勞斯法測定FIB的比較[J].中國誤診學(xué)雜志,2007,7(22):5235-5236.
[3]蘇加云.纖維蛋白原測定測定方法的探討及臨床應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(23):1438-1439.