楊 瑩，譚雅玲，蔣永青

(江西省上饒市市立醫(yī)院檢驗科，江西 上饒 334000)

交叉配血主要是檢測紅細胞與血清、血漿的相容性。不完全/不規(guī)則抗體可能引起輸血反應(yīng)，而傳統(tǒng)配血方法不能檢測出不完全抗體。傳統(tǒng)抗人球配血可檢出不完全抗體，但操作復雜，可出現(xiàn)假陰性。微柱凝膠法是建立在抗人球蛋白基礎(chǔ)上的一種新方法，可用于抗體篩查、交叉配血。該方法標本用量少，靈敏度高，特異性強，操作簡單，結(jié)果可較長時間保存[1]。我院檢驗科用微柱凝膠法對537例患者進行交叉配血，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 受血者 本院2010年6月至2010年11月需輸血的住院患者共537例，其中男性患者293例，女性患者244例，年齡4歲～82歲，內(nèi)科312例、外科175 例、婦產(chǎn)科32例、兒科5例、血液透析科13例。輸用血液均由上饒市中心血站提供。

1.2 試劑與儀器 微柱凝膠血型卡，多特異抗人球配血卡，專用離心機和孵育箱(強生公司)；凝聚胺試劑(珠海貝索生物技術(shù)有限公司)，ABO標準紅細胞，抗人球蛋白試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)。

1.3 方法

1.3 .1血型鑒定 每位受血者、供血者交叉配血前均先進行ABO血型正反定型及Rh血型復檢。正定型及Rh血型：制備受血者、供血者1.5%紅細胞懸液20μl加入血型卡內(nèi)，直接用專用離心機離心5min判讀結(jié)果。反定型：受血者、供血者血漿40μl加ABO標準紅細胞20μl直接用專用離心機離心5min判讀結(jié)果。

1.3 .2 交叉配血試驗：制備同型受供血者血清和

1.5 %的紅細胞懸液，標記抗人球卡。每孔滴加Liss液50μl，主側(cè)：40μl受血者血清加1.5%供血者紅細胞懸液20μl；次側(cè)：40μl供血者血清加 1.5%受血者紅細胞懸液20μL，37℃孵育10min后專用離心機離心5min，觀察結(jié)果，紅細胞沉積在凝膠管底部者為陰性，紅細胞聚集在凝膠帶上部為陽性。

1.3 .3凝聚胺介質(zhì)法 主管供者2%紅細胞懸液1滴加受者血清2滴，次管受者2%紅細胞懸液1滴加供者血清2滴，混勻后加低離子溶液0.6ml，混勻再加凝聚胺溶液2滴，3000r/min離心15s，倒掉上清液，輕搖有凝集，再加懸浮液2滴，凝集在1min內(nèi)散開為陰性，凝集不散開為陽性。

2 結(jié)果

用微柱凝膠卡氏法交叉配血537例，其中15例有凝集， 因為紅細胞懸液濃度過高而引起3例，由于纖維蛋白的影響引起2例，因疾病原因引起8例(2例腎衰病人，1例白血病，3例消化道大出血病人，1例嚴重貧血，1例腫瘤病人)，此8例均為次側(cè)凝集，用凝聚胺法檢測均為陰性。以上8例患者紅細胞直接Coombs試驗抗體為陽性。后經(jīng)輸注洗滌紅細胞后期觀察，無不良反應(yīng)。因冷凝集素引起1例。其中主側(cè)管凝集(2+-3+)1例，為消化道大出血有輸血史病人，用凝聚胺法復做交叉配血結(jié)果相符也為主管凝集。將上例患者的紅細胞用鹽水洗滌3次，用洗滌后的紅細胞作抗人球試驗和抗體篩檢檢測，發(fā)現(xiàn)患者血清中有不完全抗體，與臨床聯(lián)系，暫緩輸血。

3 討論

目前，微柱/管凝膠技術(shù)在一些先進國家已成為常規(guī)的紅細胞血型血清學檢測技術(shù)[2]。該方法為國際公認的安全輸血的推薦方法。卡式檢測法是生物化學凝膠過濾技術(shù)和免疫抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物。通過調(diào)節(jié)凝膠的濃度來控制凝膠間隙大小，使其間隙只能允許游離的RBC通過，從而使游離RBC與聚集RBC分離。凝膠中已加好了各類血型抗體和抗人球蛋白，加入樣本細胞即可定型，從而簡化操作過程。強生的血型儀器采用柱凝集技術(shù)，在檢查準確性和靈敏度方面有提高。全自動的操作方式減少了人工干預(yù)，很好避免人工操作產(chǎn)生的錯誤。在試劑卡方面，玻璃珠介質(zhì)更加耐熱耐壓，常溫保存。其加樣、離心和孵育所需時間少，所采用的不同打孔器很好的避免了交叉污染。在結(jié)果讀取方面，強生的雙面讀取也比較安全，更好杜絕輸血安全隱患。其特有的急診插入功能，使得操作很方便。

在交叉配血不合的標本中，抗人球試驗陽性率為多數(shù)，血清中的不完全抗體是引起交叉配血不合的常見原因。配血次側(cè)陽性發(fā)生的原因有二，一是供血者血漿中含有針對受血者的不規(guī)則抗體，還有一個就是受血者紅細胞被致敏，導致次側(cè)凝集，此外，我們還要考慮冷凝集素的影響。輸血前對每一個受血者常規(guī)做抗體篩選，可進一步提高輸血安全性。

引起卡式配血假陽性的有標本因素，如標本抗凝不充分，離心不充分，紅細胞懸液的濃度不適或血漿與血細胞的比例不適；溫度因素在微柱凝膠法中也會有影響，應(yīng)充分注意，排除冷凝集素影響；疾病或藥物因素在配血中發(fā)也被發(fā)現(xiàn)，一些腫瘤癌癥、白血病、慢性肝病，上消化道出血，貧血患者，交叉配血過程中容易引起假陽性，這是由于反復的輸血過程，導致了紅細胞表面發(fā)生了變化，改變了正常的紅細胞表面表達，使得在實驗室配血過程中與試劑中含有的IgG，C3溶液發(fā)生反應(yīng)。另外，大量抗生素、止血敏、肝素、云南白藥等藥物也會干擾配血結(jié)果[3]。

[1]陳燕萍,王長奇,朱 芳,等.微柱凝膠技術(shù)鑒定血型和篩檢不規(guī)則抗體的臨床應(yīng)用[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2008,26(6):719.

[2]雷國華,鐘清蘭,熊永萍,等.微柱凝膠免疫檢測法在配血及血型鑒定中的應(yīng)用[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2010,28(2):202.

[3]唐長久,王 華,李瑞云,等.微柱凝膠配血次側(cè)不和17例臨床分析[J].中國輸血雜志,2005,18(1):61.