李維山 王艷偉

(漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 河南漯河 462000)

手工制作組織芯片及其在病理實訓(xùn)教學(xué)中的應(yīng)用①

李維山 王艷偉

(漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 河南漯河 462000)

目的 實現(xiàn)組織芯片技術(shù)在病理實訓(xùn)教學(xué)中的應(yīng)用。方法 取鱗狀上皮,腺上皮,平滑肌組織等相應(yīng)的正常組織,良性腫瘤,不典型增生I～I(xiàn)II級和惡性腫瘤等組織,采用組織芯片技術(shù)制作組織微陣列蠟塊并切片,常規(guī)HE染色后做成組織芯片教學(xué)切片;隨機選擇3年制臨床專業(yè)2個班分實驗組和對照組,實訓(xùn)4學(xué)時并進(jìn)行雙盲測驗,統(tǒng)計優(yōu)秀率并統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果 實驗組優(yōu)秀率明顯高于對照組,并具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 與傳統(tǒng)的病理實訓(xùn)教學(xué)相比,組織芯片技術(shù)有帶教老師易講解,學(xué)生易理解的不可替代的優(yōu)勢,值得在實踐中進(jìn)行推廣。

組織芯片 病理學(xué) 教學(xué) 實訓(xùn)

組織芯片技術(shù)是將數(shù)十個、數(shù)百個乃至上千個小組織片,按實驗設(shè)計的需求整齊地排列在一張載玻片上,制備成的微縮組織切片。它具有高信息量、體積小、高效、快速、低耗、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點?？梢詮浹a傳統(tǒng)病理教學(xué)很多不足,利用此項技術(shù),我們參照文獻(xiàn)[1～2]并加以改良,按照章節(jié)分類并手工制作病理學(xué)和組織學(xué)芯片,應(yīng)用于病理學(xué)實訓(xùn)教學(xué),取得顯著效果。本文以腫瘤這一章節(jié)為例來探討組織芯片在病理實訓(xùn)教學(xué)中的應(yīng)用。

1 臨床資料

1.1 教學(xué)組織芯片的制作

1.1.1 組織標(biāo)本的收集和制作 選取正常鱗狀上皮,鱗狀上皮乳頭狀瘤,鱗狀上皮不典型增生I～Ⅲ級,高分化鱗狀細(xì)胞癌;低分化鱗狀細(xì)胞癌;正常腺體,腺瘤,腺上皮不典型增生Ⅰ～Ⅲ級,高分化腺癌,低分化腺癌;正常平滑肌,平滑肌瘤,平滑肌肉瘤;正常纖維組織,纖維瘤,纖維肉瘤等20個組織塊,供體蠟塊收集自濟源市第一人民醫(yī)院病理科。所有的標(biāo)本均經(jīng)過4%中性甲醛固定24h,常規(guī)浸蠟并包埋。

1.1.2 組織芯片的手工制作 用手電鉆(鉆頭外徑1.8mm)在2.5cm×2cm的受體蠟塊上構(gòu)建7×6個點陣,間距2mm。所選的石蠟標(biāo)本,經(jīng)過顯微鏡下定位后,用手工改造過的腹穿針(內(nèi)徑1.8mm)把目標(biāo)組織穿刺取下圓柱狀標(biāo)本,分別種植到對應(yīng)的點陣中,并根據(jù)坐標(biāo)記錄標(biāo)本所對應(yīng)的組織。然后在38℃恒溫箱中烘烤2h,使與空白蠟塊融合為一體。切片厚度5um,芯片信息完全丟失的病例,使用完整切片。

1.1.3 切片制備 將蠟塊放入冰箱中凍10min后,拿出快速連續(xù)切片,厚度4um,常規(guī)HE染色并保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 教學(xué)過程的設(shè)計

實驗分組。隨機選取2個3年制臨床班(每個班180人),分實驗組和對照組,實驗組采用組織芯片教學(xué)法進(jìn)行實訓(xùn),對照組采用傳統(tǒng)教學(xué)方法進(jìn)行實訓(xùn),4學(xué)時后進(jìn)行雙盲測驗,測驗內(nèi)容:(1)理論筆試;(2)切片診斷?？偡譃?00分。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

成績＞75分為優(yōu)秀,統(tǒng)計實驗組和對照組的優(yōu)秀率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

實驗組180人122人優(yōu)秀,優(yōu)秀率為67.77%,對照組180人91人優(yōu)秀,優(yōu)秀率50.55%,實驗組優(yōu)秀率明顯高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

組織微陣列是由美國國家衛(wèi)生院的科學(xué)家Kononen J[3]等在1998年在《自然醫(yī)學(xué)》雜志中首先提出來的,經(jīng)過幾年的發(fā)展,目前的組織芯片制作儀做出的芯片組織標(biāo)本數(shù)目在50～800個之間[4],在很多領(lǐng)域都得到應(yīng)用,近年來組織芯片被逐步應(yīng)用到醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)教學(xué)領(lǐng)域,并體現(xiàn)出一定的優(yōu)越性[5～6]。

實驗中發(fā)現(xiàn)一些現(xiàn)象,(1)實驗組實驗室老師給學(xué)生發(fā)放切片速度快而不容易出錯,使學(xué)生節(jié)省了不少時間。(2)組織芯片上所選的組織都是非常典型的病變,便于學(xué)生自己尋找病變,因此實驗組學(xué)生普遍比對照組學(xué)生提前10min左右完成實訓(xùn)任務(wù)并上交布置的作業(yè)。(3)因為就一張切片可以觀察,因此實驗組學(xué)生不小心打碎切片的現(xiàn)象極少發(fā)生,這為學(xué)生全心全意的實訓(xùn)提供了一個良好的環(huán)境,(4)實驗組學(xué)生實訓(xùn)中提出的疑問明顯少于對照組,正是上面這些因素,造成實驗組學(xué)生對腫瘤章節(jié)的學(xué)習(xí)有更深程度的把握和理解,使得對理論課的學(xué)習(xí)也起到極大的幫助。這些可能都是實驗組優(yōu)秀率明顯高于對照組的原因。

因此,在病理實訓(xùn)教學(xué)中引入組織芯片技術(shù),將會極大的提高學(xué)生的學(xué)習(xí)效率和學(xué)習(xí)效果。

[1]陳士超,何春年.自制組織芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧[J].中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志,2008,17(1):114～115.

[2]孫廷誼,張云漢.組織芯片的研制及效果[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2007,42(1):116～117.

[3]Kononen J,Bubendorf L,Kallioniemi A,et al.Tissue microarrays for high-throughput molecular profiling of tumor specimens[J].Nat Med,1998,4:844～847.

[4]Moch H,Kononen T,Kallioniemi OP,et al.Tissue microarrays:what will they bring to molecular and anatomic pathology[J].Adv Anat Pathol,2001,8:14～20.

[5]江濤,呂少文.組織學(xué)考試用組織芯片制作初探[J].解剖學(xué)研究,2005,27(3):202～204.

[6]王清良,卞修武.組織芯片在病理學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用前景[J].醫(yī)學(xué)教育探索,2006,5(3):268～269.

R735

A

1674-0742(2011)10(a)-0085-01

李維山:男,34歲,研究生,病理學(xué)碩士,講師/主治醫(yī)師,從事臨床工作10年,病理教學(xué)工作5年,已發(fā)表論文5篇。

2011-08-23