韓小燕 劉春雨 蔣寧

（1.玉林師范學院體育學院 玉林 537000）

蜂膠對訓練小鼠紅細胞ATP酶活性的影響

韓小燕1劉春雨1蔣寧1

（1.玉林師范學院體育學院 玉林 537000）

目的：通過給訓練小鼠灌服蜂膠，觀察蜂膠對小鼠紅細胞ATP酶活性的影響。方法：小鼠隨機分為三組，訓練組和訓練+蜂膠組進行四周遞增強度的游泳訓練，每周游泳 6天。結(jié)果：（1）訓練組與對照組相比，紅細胞 Na+-K+-ATP酶Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著降低，血漿MDA含量顯著增高；(2)訓練+蜂膠組小鼠ATP酶活性顯著高于訓練組，血漿MDA含量顯著降低。結(jié)論：蜂膠可以明顯提高小鼠運動后Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,此作用與蜂膠的抗氧化作用有關(guān)。

蜂膠 ；ATP酶；自由基

蜂膠的主要成分是黃酮類化合物，能夠提高抗氧化酶的活性，清除運動中產(chǎn)生的過量的自由基，是一種具有很大開發(fā)潛力的天然中藥材和天然保健食品，是公認的天然抗氧化劑。蜂膠已廣泛應(yīng)用于臨床，在運動領(lǐng)域的研究較少，而且對于紅細胞形態(tài)影響的研究還未見報道。因此本實驗通過給訓練小鼠灌服蜂膠，觀察蜂膠對由運動源性自由基造成的紅細胞ATP酶活性改變是否有保護作用，為蜂膠更好的應(yīng)用于運動領(lǐng)域提供理論依據(jù)。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

昆明（KM）小鼠30只，雌雄各半5周齡，體重18～23克，由中國醫(yī)科大學動物中心購入。

1.2 分組與運動方式

小鼠購進后，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，隨機分3組，常規(guī)分籠飼養(yǎng)。小鼠每日上午均灌胃，給藥方案見表1。

表 1 小 鼠 分 組 及 給 藥 方 案

小鼠在長100cm , 寬 60cm，高70cm 的玻璃泳缸中游泳，水深45cm,水溫控制在32±2℃。各運動組小鼠每周游泳6天，每次運動時間為：第一周30min/d，第二周 60min/d，第三周 90min/d，第四周120min/d。

1.3 樣本的收集和處理

所有小鼠在最后一次訓練結(jié)束后次日摘眼球取血，肝素抗凝。取抗凝血 350ul，置于彈頭試管中用于紅細胞Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及血紅蛋白的測試。余血 1500rpm離心10min，取上層液體（血漿）置于彈頭試管中，待測丙二醛（MDA）含量。

2 實驗結(jié)果

2.1 四周游泳訓練后各組小鼠紅細胞 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及血漿MDA含量

訓練組小鼠Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性增均顯著低于安靜組（P＜0.05），血漿MDA含量顯著高于安靜組（P＜0.05）；訓練+蜂膠組小鼠Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著高于單純訓練組，而血漿MDA則顯著降低（P＜0.05）。提示四周大強度游泳訓練造成機體氧化損傷，而蜂膠有抗氧化損傷的作用。

表2 4周游泳訓練后小鼠各項指標的比較

3 分析與討論

3.1 四周游泳訓練后紅細胞 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的變化

紅細胞 Na+-K+-ATP酶的基本功能是將細胞內(nèi)的Na+轉(zhuǎn)移到細胞外，將細胞外的K+運送入細胞內(nèi)，維持細胞內(nèi)外的滲透壓平衡和跨膜電化學梯度。如果酶活性異常，會導致過量的水隨Na+進入細胞內(nèi)，使紅細胞體積增大而變成球形，這可能是一些運動性貧血和運動后紅細胞溶血增強的原因之一。Ca2+-Mg2+-ATP酶不但可維持膜脂的不對稱分布，而且對維持細胞內(nèi)Ca2+的濃度起重要作用。當紅細胞Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降時，紅細胞泵出Ca2+的能力下降，[Ca2+]升高可影響膜蛋白相互作用，降低RBCM粘彈性，膜變僵硬，并可導致RBCM脂質(zhì)與細胞膜骨架蛋白的分離，使膜穩(wěn)定性和流動性降低，紅細胞形態(tài)改變，變形能力下降[1-2]。4周游泳訓練使紅細胞 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低，這種改變與訓練導致自由基增加有關(guān)[3]。有報道紅細胞膜流動性特別是膜內(nèi)層流動性與Na+-K+-ATP酶的活性呈正相關(guān)[4]。此外，Na+-K+-ATP酶分子中有16個與自由基結(jié)合的巰基，極易被氧化成二硫鍵，所以自由基對Na+-K+-ATP酶結(jié)構(gòu)的直接破壞也會影響到酶活性，使其活性下降，并與血漿脂質(zhì)量密切相關(guān)[5]。本實驗中，經(jīng)過4周游泳訓練后小鼠紅細胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著低于對照組，而血漿MDA則顯著高于對照組。

3.2 蜂膠對訓練小鼠紅細胞 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影響

蜂膠的化學成分極其復雜，目前已鑒定出 300多種化合物，其中黃酮類化合物 71種。已有實驗證實蜂膠有抗氧化作用?？赡艿臋C制如下：①蜂膠可以提高機體抗氧化酶（如SOD、CAT）的活性，阻止自由基反應(yīng)的引發(fā)。②蜂膠可以阻斷自由基導致的鏈式反應(yīng)。蜂膠中起抗氧化作用的主要成分之一是黃酮類化合物。黃酮化合物 B環(huán)上3,4-鄰二羥基是具有清除自由基活性的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，其它位上的羥基也起一定作用。黃酮類化合物通過酚羥基與自由基反應(yīng)生成較穩(wěn)定的半醌式自由基，從而終止自由基鏈式反應(yīng)，這是黃酮類化合物清除自由基的最主要機制。③蜂膠中其它物質(zhì)的抗氧化活性。研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠中除黃酮有較強的抗氧化作用外，其它的成分也具有較好的抗氧化能力，如果糖、氨基酸、Ve、Se等。張燕平研究蜂膠對自由基的清除作用時發(fā)現(xiàn)，蜂膠分離純化后的收集液比粗提取物清除自由基效果減弱，說明蜂膠抗氧化性是各種組分協(xié)同作用的結(jié)果[6]。④也有人認為蜂膠抗氧化活性的發(fā)揮主要是通過螫合金屬離子而削弱金屬離子的促氧化作用。以上綜合作用的結(jié)果提高了機體的抗氧化能力，減弱了自由基對機體的氧化損傷。

本實驗研究發(fā)現(xiàn)，4周游泳訓練后訓練+蜂膠組小鼠紅細胞 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著高于訓練組小鼠，而MDA則低于訓練組。提示蜂膠對紅細胞有保護作用，且與蜂膠的抗氧化作用有關(guān)。

4 結(jié)論

在4周的游泳訓練過程中，給小鼠灌服蜂膠，可以明顯改善小鼠運動后紅細胞 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。此作用與蜂膠的抗氧化作用有關(guān)。

1 Huang Y,Liu D,Sun S. Mechanism of free radicals on the molecular fluidity and chemical structure of the red cell membrane damage.Clin Hemorheol microcirc, 2000,23(2-4)：287-290

2 衣雪潔;常波;許豪文;力竭游泳對紅細胞膜的影響[J].中國運動醫(yī)學雜志 2001,20(2)：139～141

3 池愛平;熊正英;陳錦屏;服用姜黃素對過度運動大鼠部分組織及紅細胞膜損傷保護研究.中國體育科技 2006, 42 (3)：72～74

4 姚成燦;pH值對紅細胞膜動力學特性和胞內(nèi)蛋白結(jié)構(gòu)與功能的影響[J].科學通報,48(10);2003(5)：1050～1054

5 胡多利;腦梗死急性期自由基對紅細胞結(jié)構(gòu)和功能的影響[J].醫(yī)學綜述 2000,6(8)：362

6 張燕平;天然蜂膠對自由基的清除作用[J].食品與發(fā)酵工業(yè) 2002,28(1)：48～52

Effect of Propolis on Red Cell ATP Enzyme of Swimming Rats

HAN Xiaoyan ,etal.
(Physical Education College of Yulin Normal University, Yulin,Guangxi,537000)

Objective： this paper observed the effect of populist on red cell ATP enzyme activity, discussed the protection of populist on red cell. It will provide effective reference for sports field. Methods： rats were divided into 3 groups randomly. The training groups were swim med 4 weeks, while the corresponding rats were administered with populism. The indexes such as plasma MDA, Na+-K+-ATP enzyme and Ca2+-Mg2+-ATP enzyme activity of red cell of rats were measured at next day after last training. Results：（1）After 4 weeks' training, the result showed that the Na+-K+-ATP enzyme and Ca2+-Mg2+-ATP enzyme activity of red cell decreased significantly，and plasma MDA content in training group is significantly higher than control group.（2）After 4 weeks' administered with populist, the Na+-K+-ATP enzyme and Ca2+-Mg2+-ATP enzyme activity increased significantly and plasma MDA content in C group was significantly lower than B group. Conclusion： The populist may improve ATP enzyme activity of red cell, which relate with antioxidant activity of populist.

populist; ATP enzyme activity; free radical

韓小燕（1980—），女，蒙古族，內(nèi)蒙古呼和浩特市人，碩士，講師，研究方向：運動生物化學。