李賜恩，葉 芳，張敏怡，梁鳳坤，岑劍暉

（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405； 2.中山大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510080）

氣相色譜法測(cè)定羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基含量

李賜恩1，葉 芳2，張敏怡2，梁鳳坤1，岑劍暉1

（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405； 2.中山大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510080）

目的 建立測(cè)定羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基含量的氣相色譜法。方法 將羥丙甲纖維素和氫碘酸共同加熱反應(yīng)，產(chǎn)生揮發(fā)性的碘甲烷和2-碘丙烷，注入氣相色譜儀進(jìn)樣，采用Agilent DB-624柱（30 m×0.53 mm，1.0!m），火焰離子化檢測(cè)器（FID），通過(guò)測(cè)得碘甲烷和2-碘丙烷的量折算得到甲氧基和羥丙氧基的含量。結(jié)果 所建立的氣相色譜法有良好的分離度，在所考察的濃度范圍內(nèi)各溶劑的峰面積與濃度線性關(guān)系良好。結(jié)論 氣相色譜法較藥典方法更靈敏、更準(zhǔn)確，可用于羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基的含量測(cè)定。

羥丙甲纖維素；甲氧基；羥丙氧基；氣相色譜法

Abstract：Objective To establish a method to determine the methoxy and hydroxyproxy in hydroxypropyl methylcellulose by gas chromatography.Methods Hydroxypropyl methylcellulose and hydriodic acid were heated together.The reaction products，methyl iodide and 2-propyliodide，were assayed by gas chromatography.Agilent DB-624 capillary column and FID were used.Results The peaks of methyl iodide and 2-propyliodide were separated well.The good linear correlations were obtained during the detection.Conclusion The method is proved to be sensitive and accurate.It can be used for the determination of methoxy and hydroxyproxy in hydroxypropyl methylcellulose.

Key words：hydroxypropyl methylcellulose；methoxy；hydroxyproxy；gas chromatography

羥丙甲纖維素（hydroxypropyl methylcellulose，HPMC）是一種優(yōu)良的藥用輔料，具有其他許多輔料所不具備的特性，如優(yōu)異的冷水水溶性、較強(qiáng)的抗敏性和代謝惰性等，可作為薄膜包衣材料，也可作為黏合劑、崩解劑，還可作為固體制劑促溶出和緩釋、控釋的材料，是目前國(guó)內(nèi)外用量最大的輔料之一[1-2]。HPMC因甲氧基和羥丙氧基兩種取代基含量不同而有多種型號(hào)的產(chǎn)品，一般通過(guò)測(cè)定甲氧基和羥丙氧基含量以控制其質(zhì)量。筆者將HPMC和氫碘酸共同加熱反應(yīng)，采用氣相色譜法測(cè)定衍生出的碘甲烷和2-碘丙烷，從而折算出HPMC中甲氧基和羥丙氧基的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Agilent GC-6890N型氣相色譜儀（檢測(cè)器為FID）。羥丙甲纖維素（湖州展望藥業(yè)有限公司，批號(hào)分別為200603037，200603038，200603039）；碘甲烷（中國(guó)海川化學(xué)品有限公司，含量為99.8%，批號(hào)為 051120）；2-碘丙烷（含量為 99.5%，批號(hào)為 A0253547）、氫碘酸（批號(hào)為A0249573）均為Acros Organics BVBA產(chǎn)品；正辛烷（天津華真特種化學(xué)試劑廠）；己二酸（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent DB-624柱（30 m ×0.53 mm，1.0!m），Varian CP-624柱（30 m×0.53 mm，3.0!m）；柱溫：150℃；進(jìn)樣口溫度：200 ℃ ；檢測(cè)器溫度：260 ℃；流速：3.0 mL/min；分流比：5 ∶1；載氣：氮?dú)猓贿M(jìn)樣量：1!L。

2.2 溶液制備

取正辛烷0.5 g，置100 mL量瓶中，加鄰二甲苯溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得內(nèi)標(biāo)溶液。取70 mg己二酸，置10 mL頂空瓶中，分別精密加入內(nèi)標(biāo)溶液和氫碘酸溶液各2.0 mL，密封，精密稱(chēng)定；用注射器加入碘甲烷38!L，精密稱(chēng)定，即為加入碘甲烷的質(zhì)量；再同法加入2-碘丙烷8!L，精密稱(chēng)定，即為加入2-碘丙烷的質(zhì)量；振搖，靜置，取上層液體即得對(duì)照品溶液。取干燥供試品約60 mg，精密稱(chēng)定，置反應(yīng)瓶中，加入70 mg己二酸，并分別精密加入內(nèi)標(biāo)溶液和氫碘酸溶液各2.0 mL，密封，135℃反應(yīng)30 min，振搖2 min，135℃繼續(xù)反應(yīng)30 min后，靜置，冷卻至室溫，取上層液體作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：取制備的對(duì)照品溶液1.0!L，注入氣相色譜儀，各峰分離度符合規(guī)定，結(jié)果見(jiàn)圖1 A。

專(zhuān)屬性試驗(yàn)：按對(duì)照品溶液制備方法，分別制備不加對(duì)照品的陰性對(duì)照品溶液和內(nèi)標(biāo)、對(duì)照品都不加的空白溶液，取1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果顯示空白無(wú)干擾（圖1 B）。

耐用性試驗(yàn)：分別考察己二酸加入量、反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間對(duì)HPMC中甲氧基和羥丙氧基測(cè)定結(jié)果的影響。按供試品溶液制備方法，己二酸的加入量分別為0，50，70，90 mg（每種濃度各3份），取所得上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果顯示不加己二酸的測(cè)定結(jié)果偏低，加入50～90 mg己二酸的測(cè)定結(jié)果較一致。按供試品溶液制備方法，分別反應(yīng)50，60，70 min，靜置冷卻至室溫后，取所得上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果顯示反應(yīng)時(shí)間在50～70 min范圍內(nèi)測(cè)定結(jié)果一致。按供試品溶液制備方法，分別在120，135，150℃反應(yīng)，靜置冷卻至室溫后，取所得上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果顯示120℃時(shí)的測(cè)定結(jié)果偏低，而135℃和150℃時(shí)的測(cè)定結(jié)果一致。

線性關(guān)系考察：按對(duì)照品溶液制備方法，用注射器分別加入碘甲烷 30，34，38，42，46!L，同法分別對(duì)應(yīng)加入 2- 碘丙烷 4，6，8，10，12!L，取上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果甲氧基質(zhì)量濃度范圍為7.632～11.703 g/L，回歸方程為 Y=0.062 9X+0.003 9，r=0.999 2；羥丙氧基質(zhì)量濃度范圍為1.321～3.963g/L，回歸方程為 Y=0.0537X+0.0051，r=0.9996。

回收率試驗(yàn)：取干燥供試品約30 mg，精密稱(chēng)定，置反應(yīng)瓶中，加入己二酸70 mg，再精密加入內(nèi)標(biāo)溶液和氫碘酸溶液各2.0 mL，用注射器分別加入3種不同量的碘甲烷和相應(yīng)的2-碘丙烷（每種濃度各2份），加熱反應(yīng)1 h后，靜置至室溫，取上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1 氣相色譜圖

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

精密度試驗(yàn)：按對(duì)照品溶液制備方法，用注射器加入碘甲烷38!L和2-碘丙烷8!L，取上層液體1.0!L連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算各組分峰面積的 RSD，結(jié)果碘甲烷的 RSD為0.9%，2-碘丙烷的 RSD為 0.6%（n=6）。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取批號(hào)為200603037的供試品溶液，分別在0，3，6，12，24 h進(jìn)樣測(cè)定，考察溶液穩(wěn)定性。因碘甲烷和2-碘丙烷的揮發(fā)性均較大，6 h后測(cè)定結(jié)果開(kāi)始偏低，所以制備的供試品溶液應(yīng)及時(shí)進(jìn)樣。

定量限檢測(cè)：精密量取適量對(duì)照品溶液，用鄰二甲苯溶液稀釋?zhuān)M(jìn)樣，以各組分峰達(dá)信噪比的3倍和10倍時(shí)的量為最低檢測(cè)限和最低定量限，結(jié)果甲氧基的最低檢測(cè)限為0.718!g/mL，最低定量限為2.152!g/mL，羥丙氧基的最低檢測(cè)限為1.210!g/mL，最低定量限為3.628!g/mL。

2.4 樣品含量測(cè)定

按本測(cè)定方法和2005年版《中國(guó)藥典（二部）》收載的方法[3]同時(shí)測(cè)定 3批（批號(hào)分別為 200603037，200603038，200603039）供試品，結(jié)果表明用本方法測(cè)定的效果更好。兩種測(cè)定方法的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 3批供試品的含量測(cè)定結(jié)果（%）

3 討論

HPMC質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)廣泛收載于各國(guó)藥典中，《歐洲藥典》和《英國(guó)藥典》的HPMC質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無(wú)甲氧基和羥丙氧基的含量測(cè)定項(xiàng)，2005年版《中國(guó)藥典》[3]采用容量法測(cè)定羥丙氧基和甲氧基，先蒸餾再滴定，操作過(guò)程煩瑣，準(zhǔn)確度不高。筆者參照《美國(guó)藥典》的有關(guān)規(guī)定，將原方法的填充柱改為毛細(xì)管柱。試驗(yàn)中所用的氫碘酸將甲氧基和羥丙氧基分別轉(zhuǎn)變?yōu)榈饧淄楹?-碘丙烷，濃度應(yīng)不低于570 g/L，己二酸的作用是將HPMC中的羥基保護(hù)起來(lái)，使反應(yīng)向生成碘甲烷和2-碘丙烷的方向定量進(jìn)行，所用己二酸的量不應(yīng)太少，否則會(huì)使測(cè)定結(jié)果偏低。與《中國(guó)藥典》中方法相比，本方法更易于操作，準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性更高，可推廣用于HPMC中甲氧基和羥丙氧基的含量測(cè)定。

[1]沈麗琳.羥丙甲纖維素在藥物制劑方面的應(yīng)用與研究[J].中國(guó)藥業(yè)，2007，16（12）：66.

[2]張存彥，王成港，王 杰.新型膠囊囊材——羥丙甲纖維素[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2005，40（12）：891-892.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：909.

Determination of Methoxy and Hydroxyproxy in Hydroxypropyl Methylcellulose by Gas Chromatography

Li Cien1，Ye Fang2，Zhang Minyi2，Liang Fengkun1，Cen Jianhui1
(1.First Affiliated Hospital，Guangzhou University of TCM，Guangzhou，Guangdong，China 510405；2.First Affiliated Hospital，Zhongshan University，Guangzhou，Guangdong，China 510080)

R927.2

A

1006－4931(2010）03－0027－02

2009－01－14；

2009－05－09）