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        消斑膏的制備與臨床療效觀察

        2010-11-06 06:04:34黃壽妙陳福軍許少微
        中國藥業(yè) 2010年3期
        關(guān)鍵詞:液相色譜儀黃褐斑丹參酮

        黃壽妙,陳福軍,許少微

        (浙江省平陽縣中醫(yī)院,浙江 溫州 325400)

        黃褐斑是臨床常見的皮膚病,好發(fā)于中青年女性,嚴(yán)重影響美容。我院針對(duì)黃褐斑研制的消斑膏,經(jīng)臨床應(yīng)用,療效滿意,現(xiàn)將其制備和質(zhì)量控制方法及臨床療效觀察情況報(bào)道如下。

        1 儀器與試藥

        LC-4A型高效液相色譜儀(日本島津);SPD-2AS型紫外檢測(cè)器(日本島津);C-R3A型數(shù)據(jù)處理機(jī)。丹參酮!A對(duì)照品由溫州醫(yī)學(xué)院天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供;甲醇為色譜純,水為雙重蒸餾水,其余試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 制備

        處方:丹參 200 g,桑葚子 150 g,山萸肉 200 g,熟地 120 g,僵蠶100 g,生炒白術(shù) 150 g,龜板膠 200 g,白糖 250 g,女貞子 200 g,桃仁100 g。

        制備[1-3]:取處方量除龜板膠、白糖外的上述藥材,加水浸泡2 h,提取3次,每次均加5倍量水煎煮1 h,合并煎液,靜置過夜,濾過,再加熱,使濾液濃縮約為原容積的2/5時(shí),再加入龜板膠、白糖烊化,濾過,濾液繼續(xù)濃縮至規(guī)定的相對(duì)密度,放冷,即得。

        2.2 質(zhì)量控制

        2.2.1 色譜條件

        色譜柱:Zorbax BP-ODS柱(250 mm×4.6 mm,5"m);流動(dòng)相:甲醇 -水(79 ∶21);檢測(cè)波長:270 nm;流速:1 mL/min;柱溫:25 ℃;進(jìn)樣量:10"L。

        2.2.2 溶液制備

        精密稱取丹參酮!A對(duì)照品適量,加甲醇制成質(zhì)量濃度為10.8"g/mL的溶液,作為對(duì)照品溶液。取本品約1.0 g,精密稱定,加甲醇少量使其完全溶解,并定量轉(zhuǎn)移至50 mL棕色量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,稱定質(zhì)量(精密至0.01 g),超聲處理15 min,稱定質(zhì)量,補(bǔ)加損失的質(zhì)量,置冰浴中冷卻2 h以上,取出后濾膜(0.45"m)濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液,放至室溫,作為供試品溶液。按處方比例稱取除丹參的其他藥物適量,依照消斑膏的制備工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

        2.2.3 方法學(xué)考察

        系統(tǒng)適用性試驗(yàn):量取供試品溶液、對(duì)照品溶液和陰性對(duì)照品溶液各10"L,分別注入高效液相色譜儀。結(jié)果供試品溶液色譜中,在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上有一相同保留時(shí)間的色譜峰,而陰性對(duì)照品溶液在此保留時(shí)間無干擾(圖1)。

        線性關(guān)系考察:分別精密吸取 2.5,5,10,15,20,25"L 的對(duì)照品溶液,注入高效液相色譜儀,每一質(zhì)量濃度進(jìn)樣2次,計(jì)算丹參酮!A的峰面積平均值,以峰面積平均值為縱坐標(biāo)、丹參酮!A進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程 Y=56.98X+1.578 9×104,r=0.999 8。結(jié)果表明,丹參酮!A質(zhì)量濃度在0.027~0.27"g/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

        圖1 高效液相色譜圖

        穩(wěn)定性試驗(yàn):依上述色譜條件,每隔1 h向色譜儀注入同一供試品溶液10"L,連續(xù)5次,測(cè)定丹參酮!A的峰面積 ,結(jié)果的RSD=1.1%(n=5),表明供試品溶液在5 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

        精密度試驗(yàn):精密量取對(duì)照品溶液10"L各5份,分別注入色譜儀,結(jié)果的 RSD=0.5%(n=5),表明儀器精密度良好。

        加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知含量的樣品6份,每份0.5 g,分別置錐形瓶中,再添加一定量的丹參酮!A對(duì)照品,每份用甲醇定容至50 mL,按上述色譜條件測(cè)定。結(jié)果見表1。

        表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

        2.2.4 樣品含量測(cè)定

        分別精密稱取不同批次的消斑膏制劑1.0 g,按供試品溶液制備方法制備,分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20"L,注入高效液相色譜儀中,按上述色譜條件測(cè)定,結(jié)果3批樣品中丹參酮!A的含量分別為 0.664 7,0.653 8,0.668 8 mg/g。

        2.3 臨床應(yīng)用

        2.3.1 一般資料

        選擇我院皮膚科門診黃褐斑患者150例,年齡22~45歲,平均32歲,病程6個(gè)月至12年,平均4.2年。隨機(jī)分為治療組85例和對(duì)照組65例,兩組患者在年齡、一般情況和癥狀體征方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),具有可比性。

        2.3.2 治療方法

        治療組口服消斑膏,每日2次,每次20~30 g,早晚空腹溫服。對(duì)照組口服維生素C 0.2 g,六味地黃丸8粒,均為每日3次。兩組以1個(gè)月為一療程,連服2個(gè)月。

        2.3.3 療效標(biāo)準(zhǔn)

        根據(jù)國家中醫(yī)藥管理局《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[2],治愈為顏面皮膚恢復(fù)正常顏色,顯效為皮損消退80%,好轉(zhuǎn)為皮損消退30%,無效為皮損無明顯變化或消退不足30%。以前三者之和計(jì)算總有效率。

        2.3.4 治療結(jié)果

        治療組85例中治愈30例,顯效35例,好轉(zhuǎn)8例,無效12例,總有效率為85.88%;對(duì)照組65例中治愈19例,顯效12例,好轉(zhuǎn)10例,無效24例,總有效率為63.08%。兩組療效比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

        3 討論

        中醫(yī)稱黃褐斑為蝴蝶斑,中醫(yī)學(xué)認(rèn)為該病發(fā)生的原因很多,發(fā)病機(jī)理復(fù)雜,但臨床觀察提示該病與肝、脾、腎等臟腑功能失調(diào)有關(guān),瘀血內(nèi)阻也是主要病因之一。消斑膏方中桃仁、當(dāng)歸、丹參活血祛瘀,熟地、山萸肉、桑葚子、龜板膠、女貞子等補(bǔ)益肝腎、滋陰養(yǎng)血,白術(shù)健脾土利運(yùn)化,僵蠶善行頭面而直達(dá)病所。方中諸藥制成煎膏劑以滋補(bǔ)為主,藥性滋潤,共奏調(diào)理沖任、補(bǔ)益肝腎、滋陰養(yǎng)血、消斑養(yǎng)顏之功效,臨床應(yīng)用療效確切,值得推廣應(yīng)用。采用高效液相色譜法對(duì)丹參的主要成分丹參酮!A進(jìn)行含量測(cè)定,方法準(zhǔn)確方便,重現(xiàn)性好,且簡單易行。

        [1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄 33.

        [2]中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚科學(xué)會(huì)色素病學(xué)組.黃褐斑的臨床診斷和療效判定標(biāo)準(zhǔn)[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,1999,13:209.

        [3]呂圭源,王一濤.中藥新產(chǎn)品開發(fā)學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:561-565.

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