陳葉 陳天仁 王多成 王治江 裴惠萍 肖占文

馬鈴薯環(huán)腐病是馬鈴薯生產(chǎn)中為害較大的病害之一，在全國(guó)各地均有發(fā)生，每年都造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，其田間發(fā)病率平均約為21.6%，發(fā)病輕的田塊減產(chǎn)13%，嚴(yán)重的減產(chǎn)60%以上，并造成貯藏期間薯塊大批腐爛。馬鈴薯環(huán)腐病屬病原細(xì)菌（Clavibacter michiganensesubsp.SepedonicumDavis）在分類(lèi)中屬于棒狀桿菌屬。病菌隨種薯越冬，也可隨病殘?bào)w在土面越冬。未曾消毒的切刀是病害的主要傳播媒介。只要種薯不帶病，田間病株就少。隨著機(jī)械切塊在馬鈴薯生產(chǎn)上的應(yīng)用和馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，對(duì)切塊表面進(jìn)行快速滅菌，防止薯塊間傳毒，是確保種薯質(zhì)量、防治環(huán)腐病的重要手段。通過(guò)切刀消毒，防止馬鈴薯環(huán)腐病已有文獻(xiàn)報(bào)道，但用機(jī)械大批量切塊，并對(duì)切塊表面進(jìn)行快速滅菌，防止薯塊間傳毒，還未見(jiàn)報(bào)道，特進(jìn)行此試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

①病菌 馬鈴薯環(huán)腐病菌由河西學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室提供，使用時(shí)在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上活化，連續(xù)培養(yǎng)（25℃、黑暗）5 d。

②藥品 葡萄糖、蛋白胨、瓊脂、牛肉膏、氫氧化鈉、鹽酸、磷酸氫二鈉、酒精、脫脂棉、棉花、紗布、標(biāo)簽紙。

③殺菌劑 75%百菌清可濕性粉劑，西安瑞特農(nóng)藥有限公司提供；50%多菌靈超微可濕性粉劑，徐州銳農(nóng)農(nóng)化有限公司提供；72%甲霜靈錳鋅可濕性粉劑，重慶寶豐化工廠生產(chǎn)；72%甲基托布津可濕性粉劑，江蘇新沂農(nóng)藥有限公司提供；50%異菌脲懸浮劑，安萬(wàn)特作物科學(xué)有限公司提供；77%巴克丁 （氫氧化銅）可濕性粉劑，浙江禾本農(nóng)藥有限公司提供；15%三唑酮可濕性粉劑，上海升聯(lián)化工有限公司提供；硫酸銅，廣西化工研究所提供；高錳酸鉀，山東淄博齊魯石化公司提供；20%必菌鯊（氯溴異氰尿酸鈉），山西平陸縣植物保護(hù)公司提供；47%瑞諾葉福（腈菌唑M-47），西安鼎盛生物化工有限公司提供；5%百疫滅（戊二醛-癸甲氯銨），湖南五指峰生化有限公司提供；10%次氯酸鈉，湖北鑫東方商貿(mào)有限公司提供。

④馬鈴薯品種 大西洋，由北京德農(nóng)種業(yè)有限公司張掖分公司提供。

1.2 試驗(yàn)方法

表1 馬鈴薯環(huán)腐病藥效試驗(yàn)

①不同殺菌劑對(duì)馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響 將百菌清、多菌靈、甲霜靈錳鋅、巴克丁、瑞諾葉福、硫酸銅分別配成50 mg/mL溶液；將三唑酮、甲基托布津、異菌脲懸浮劑、必菌鯊、百疫滅分別配成1 mg/mL溶液；將次氯酸鈉配成5 μg/mL溶液；高錳酸鉀配成0.2%；酒精配成75%，配好后備用。將濾紙用打孔器打成直徑0.5 cm的圓形濾紙片，包扎后121℃滅菌30 min；各種殺菌劑按不同濃度配置好后，將濾紙片分別浸入不同濃度的殺菌劑中，每一種藥劑浸泡3片，浸泡1 min后，取出在無(wú)菌條件下晾干；每一種藥劑準(zhǔn)備3個(gè)培養(yǎng)皿，共42個(gè)培養(yǎng)皿；在無(wú)菌條件下，將活化菌種制成菌懸液，每一個(gè)培養(yǎng)皿加入菌懸液0.5 mL，用刮鏟涂抹均勻后，每一皿中加入含殺菌劑的濾紙片1片，放入培養(yǎng)皿中央；將培養(yǎng)皿倒置后在22℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3 d后觀察，測(cè)定抑菌圈直徑。

②次氯酸鈉濃度和時(shí)間對(duì)馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響 根據(jù)①結(jié)果，篩選出藥效明顯，且成本較低的殺菌劑次氯酸鈉，配成 0，3，4，5 μg/mL 四種濃度。 分別取出5 mL加入試管中，每只試管中各加入菌懸液0.1 mL，從加入后開(kāi)始計(jì)時(shí)，將以上處理分別與菌懸液混合 0（CK），20，30，40，50 s后，用劃線法快速接入培養(yǎng)皿中，重復(fù)3次。將培養(yǎng)皿倒置后在22℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3天后觀察，記載菌種成活情況。

③次氯酸鈉對(duì)馬鈴薯薯塊和薯苗的影響試驗(yàn)將大西洋品種進(jìn)行切塊，薯塊大小為50 g左右，切刀不消毒,每個(gè)處理1 000塊，在5 μg/mL濃度的溶液中分別浸種 0（CK），20，60，600，1 800 s，撈出晾干后,每個(gè)處理取50塊，置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3次重復(fù)，7天后觀察，記載薯塊和出芽情況。剩余的薯塊經(jīng)不同時(shí)間浸種處理后，采取常規(guī)方法在田間播種，試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)，以清水處理600 s為對(duì)照，小區(qū)面積為20 m2。記載田間出苗、發(fā)病情況，收獲時(shí)進(jìn)行測(cè)產(chǎn)。

表2 次氯酸鈉最佳藥效濃度和時(shí)間試驗(yàn)

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響

由表1可知，不同的殺菌劑對(duì)馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響不同，其中必菌鯊、百菌清、多菌靈、甲霜靈錳鋅、異菌脲懸浮劑、甲基托布津等抑菌效果差；巴克丁、瑞諾葉福、百疫滅、三唑酮等抑菌效果一般；高錳酸鉀、硫酸銅抑菌效果較好；75%酒精、次氯酸鈉抑菌效果最好。但因在生產(chǎn)上75%酒精成本較高，故選用次氯酸鈉最為合適。

2.2 次氯酸鈉濃度和時(shí)間對(duì)馬鈴薯環(huán)腐病菌的影響

從表 2 可以看出， 將 5，4，3，0 μg/mL 四種濃度次氯酸鈉分別與菌懸液混合 20，30，40，50 s后，在濃度為 5 μg/mL 處理 20，30，40，50 s 和 4 μg/mL 處理50 s的培養(yǎng)基上無(wú)菌，其他都有病菌存活。綜合考慮，用5μg/mL的次氯酸鈉處理20 s為最佳濃度和時(shí)間。

2.3 次氯酸鈉浸種時(shí)間對(duì)馬鈴薯薯塊和產(chǎn)量的影響

表3 次氯酸鈉浸種時(shí)間對(duì)馬鈴薯薯苗的安全性及對(duì)薯塊和產(chǎn)量的影響

從表3可以看出，用5μg/mL的次氯酸鈉的溶液分別浸種 20，60，600，1 800 s，撈出晾干后，置于 25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，7天后觀察，薯塊表面完好，出芽率在99.6%以上。說(shuō)明在濃度為5 μg/mL，處理時(shí)間為20～1 800 s，對(duì)馬鈴薯是安全的。田間試驗(yàn)表明，濃度為5 μg/mL，處理時(shí)間20～1 800 s，田間出苗率都在99%以上，幼苗畸形率為0，進(jìn)一步說(shuō)明該藥劑對(duì)馬鈴薯是安全的，這與實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定結(jié)果是完全吻合的。田間的發(fā)病情況明顯低于CK，產(chǎn)量明顯高于CK，且與CK差異極顯著。說(shuō)明用濃度為5 μg/mL的次氯酸鈉處理種薯，具有明顯的抑菌和增產(chǎn)作用。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，用5 μg/mL的次氯酸鈉處理20 s為最佳濃度和時(shí)間，對(duì)馬鈴薯生產(chǎn)是安全的，且具有明顯的抑菌和增產(chǎn)作用。分析其原因，主要是次氯酸鈉具有較強(qiáng)的氧化性，能明顯抑制和殺滅馬鈴薯環(huán)腐病病菌，即使在環(huán)境適宜的條件下，該病害也難以擴(kuò)展。本研究只從藥劑處理種薯，短時(shí)間內(nèi)抑制馬鈴薯環(huán)腐病病菌的發(fā)生這一因素進(jìn)行了探討，今后還需要進(jìn)行多因素試驗(yàn)，為綜合防治馬鈴薯其他病害提供依據(jù)。