西安市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 (西安 710003)張養(yǎng)民 白 妮

邁瑞 5300是世界上首款兼?zhèn)?20 μ l微量用血和白細(xì)胞雙通道五分類功能的全自動血液細(xì)胞分析儀,采用半導(dǎo)體激光流式分析技術(shù),測試速度 60個(gè)樣本 /h,全中文操作,可自定義報(bào)告單?，F(xiàn)按照國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)制定的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對其進(jìn)行檢測和臨床應(yīng)用分析,并將結(jié)果報(bào)告如下。

資料與方法

1 臨床資料 收集本院病房、門診和體檢中心的 EDT A-K2抗凝的全血細(xì)胞分析樣本 100例。其中感染科黃疸病人 20例;心內(nèi)科高血脂癥病人 20例;消化科肝硬化病人 20例;呼吸科肺氣腫病人 20例;門診體檢中心健康人 20例;

2 儀器和試劑 邁瑞 5300血細(xì)胞分析儀及其配套試劑、標(biāo)準(zhǔn)品由深圳邁瑞公司提供。Sysmex SF3000血細(xì)胞分析儀及原裝試劑 EPK,FFD,FFS,SLS,FBA,RED,全血質(zhì)控物和校準(zhǔn)物分別由 Sysmex公司 (批號:53320822)和伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品 (上海 )有限公司(批號:76612)。

3 檢測方法

3.1 血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)前分別用全血標(biāo)準(zhǔn)物和質(zhì)控物對邁瑞 5300血細(xì)胞分析儀和 Sysmex SF3000血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)和檢測,依據(jù)結(jié)果調(diào)整WBC,RBC,HGB,HCT,MCV,PLT等主要指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)系數(shù)。

3.2 檢測方法 每天開機(jī)時(shí)做好室內(nèi)環(huán)境質(zhì)控,嚴(yán)格按照儀器操作程序進(jìn)行測定。主要性能評價(jià)試驗(yàn):包括儀器的質(zhì)量控制、穩(wěn)定性、線性、不精密度、攜帶污染率、準(zhǔn)確度、分類與手工分類的比較。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 重復(fù)性檢測結(jié)果,本組資料對比以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示,采用 t檢驗(yàn)、相關(guān)和回歸分析比較,應(yīng)用 SPSS16.0軟件進(jìn)行處理,以 P＜0.05為有顯著性差異,以 P＜0.01為有極顯著性差異。

結(jié) 果

1 儀器的質(zhì)量控制 見表 1。用邁瑞 5300血細(xì)胞分析儀每天隨機(jī)做廠家提供的全血質(zhì)控物,計(jì)算指標(biāo)測定值的變異系數(shù)(CV)。儀器四項(xiàng)指標(biāo)測定值的均小于 5%。

表1 血常規(guī) 4項(xiàng)指標(biāo)全血質(zhì)控物 CV值(%)

2 穩(wěn)定性 見表 2。隨機(jī)取臨床全血標(biāo)本 20份,標(biāo)本于室溫分別放置 0、 0.5、1、2、4、8、 24和 48h后進(jìn)行測定,各時(shí)段測定結(jié)果與 0h測定結(jié)果進(jìn)行比較。48h內(nèi)全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)各項(xiàng)指標(biāo)的 CV均小于 5%。

表2 48h內(nèi) CBC參數(shù)總變異率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(u=3,n=20)

3 線性分析 見表 3～ 4。高值標(biāo)準(zhǔn)品、白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞 (RBC)、血紅蛋白 (Hb)、血小板 (PLT)分別按照 1∶ 1,1∶ 2,1∶ 4,1∶ 8,1∶ 16,1∶ 32等滲生理鹽水稀釋后測定 3次取其均值為測定值,并與經(jīng)計(jì)算所得各稀釋度相應(yīng)的理論值比較。結(jié)果表明測定值(WBC,RBC,Hb,PLT)與理論值之間密切相關(guān)(γ＞ 0.999)。

表3 高值標(biāo)準(zhǔn)品不同稀釋倍數(shù) 3次測定結(jié)果均值表

表4 邁瑞 5300線性分析結(jié)果

4 不精密度

4.1 批內(nèi)精密度取高、中、低值抗凝靜脈血各一份,按照儀器操作重復(fù)測定 12次,作為批內(nèi)不精密度,計(jì)算 CV。大部分 CV為 0.42%～ 3.39%,但中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的 CV＞5%。3項(xiàng)批內(nèi) CV分別為 28.12%,12.10%,4.56%。

4.2 批間精密度 用邁瑞公司提供的全血質(zhì)控物連續(xù)測定 12d,作為批間不精密度,計(jì)算 CV[4]。 3項(xiàng)批間 CV分別為 28.44%,12.14%,4.01%。

5 攜帶感染率 見表 5。分別選取高、低值的WBC,RBC,PLT和 Hb,連續(xù)測定高值標(biāo)本 3次(H1,H2,H3),低值標(biāo)本 3次 (L1,L2,L3),計(jì)算公式為:攜帶污染率(%)= [(L1-L3)/(H1-H3)]× 100[2]。 結(jié)果攜帶污染率低 (0～ 0.2%)。

表5 邁瑞 5300攜帶感染率測試參數(shù)及結(jié)果

6 干擾試驗(yàn) 邁瑞 5300測試含膽紅素(354.2 μ mol/L)和甘油 三酯 (10.5mmol/L)的標(biāo)本 CBC,結(jié)果顯示其對結(jié)果基本無影響(P＞0.05)。

7 不準(zhǔn)確度

7.1 與 ICSH推薦的參考方法比較 見表 6。用邁瑞 5300和參考方法對收集的 100例樣品進(jìn)行測定,計(jì)算相關(guān)性。結(jié)果顯示,邁瑞 5300與參考方法測定的結(jié)果相關(guān)性好,γ值分別達(dá)到了 0.999,0.999,0.997。

表6 邁瑞 5300與 ICSH推薦的參考方法的比較(n=100)

7.2 與 Sysmex SF3000血細(xì)胞分析儀比較 用邁瑞 5300和 Sysmex SF3000血細(xì)胞分析儀[3]對收集的 100例樣品進(jìn)行測定,計(jì)算相關(guān)性。結(jié)果顯示,兩者測試結(jié)果相關(guān)性良好,WBC,RBC,Hb,PLT,HCT,MCV,MCH,MCHC的相關(guān)系數(shù)γ值分別為 0.990,0.982,0.996,0.989,0.997,0.980,0.974,0.979。

8 WBC分類

8.1 重復(fù)性測試 隨機(jī)取一份樣品連續(xù)在邁瑞5300血細(xì)胞分析儀上測定 10次。結(jié)果見表 7。說明此儀器中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞重復(fù)性好,嗜堿性細(xì)胞重復(fù)性一般。

表7 邁瑞 5300重復(fù)性分析結(jié)果

8.2 異常白細(xì)胞篩選與手工法分類比較 手工分類時(shí)以美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(National committee for clinical laboratory standards,NCCLS)推薦的手工法[1]進(jìn)行,由 3位有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員采用盲法分類,取平均值,與儀器進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果顯示陽性結(jié)果預(yù)示值為 83.1%,陰性結(jié)果預(yù)示值為 79.1%,檢出靈敏度為 78.0%,檢出特異性為 83.9%,實(shí)驗(yàn)總有效率為 82%。

討 論

通過對邁瑞 5300血細(xì)胞分析儀的臨床應(yīng)用進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)其校準(zhǔn)方便,質(zhì)量控制良好,穩(wěn)定性高;線性檢查理想;攜帶污染率非常低,說明該儀器具有完整的自動沖洗功能。各參數(shù)的不精密度良好(中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞除外)。其與 ICSH推薦的參考方法和Sysmex SF3000血細(xì)胞分析儀測定的結(jié)果相關(guān)性非常好;比較其與手工分類檢測異常白細(xì)胞篩選,檢出靈敏度為 78%,特異性為 83.9%,總有效率達(dá) 82%,情況良好。

決定血細(xì)胞分析儀質(zhì)量的關(guān)鍵主要在于測量的準(zhǔn)確性、重復(fù)性和校準(zhǔn)功能的驗(yàn)證。從結(jié)果可以看出,邁瑞 5300對淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞的重復(fù)性檢測結(jié)果良好,但是對嗜堿性粒細(xì)胞重復(fù)性較差。分析其原因可能在于血中嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)量少,而分析技術(shù)或手段不夠完善,也可能與其在血中分布不均勻,儀器檢測的方法、原理有關(guān)。

BC-5300采用半導(dǎo)體激光和細(xì)胞化學(xué)染色[5],實(shí)現(xiàn)白細(xì)胞五分類和幼稚細(xì)胞、異形淋巴細(xì)胞報(bào)警功能,提供包括五分類在內(nèi)的 27項(xiàng)檢測參數(shù)。他還是我國自主制造,完全擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的血細(xì)胞分析儀。依托邁瑞獨(dú)特的二次加速流式細(xì)胞技術(shù),20 μ l微量血液實(shí)現(xiàn)檢測,使之適合醫(yī)院門急診使用,滿足嬰幼兒及其他特殊人群血常規(guī)檢查需求,同時(shí)其快速的分析速度和高的靈敏度,使之又適合大中型醫(yī)院的批量檢測,有助于臨床疾病的診治。

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