殷 玲,徐 瑩,葉 紅,沈升萬,應(yīng)立英

原發(fā)性痛經(jīng)是青年女性常見病之一,嚴(yán)重影響正常生活和工作質(zhì)量。其病因復(fù)雜,前列腺素合成酶抑制劑為目前的常用治療藥物,但存在惡心、胃腸黏膜潰瘍、腹痛、粒細(xì)胞減少等副反應(yīng)。中醫(yī)認(rèn)為痛經(jīng)是因血液淤阻而致。當(dāng)歸(angelica sinensis diels)作為婦科常用藥,具有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛等功效,它的化學(xué)成分主要為當(dāng)歸精油和水溶性物質(zhì)。本研究擬采用當(dāng)歸精油對大鼠痛經(jīng)模型進(jìn)行香薰,旨在探討通過香薰這種無明顯副反應(yīng)的護(hù)理干預(yù)途徑,了解當(dāng)歸精油對痛經(jīng)的影響,以期為此療法的臨床應(yīng)用提供更多的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar雌性大鼠 24只,體重(225.0±13.7)g。由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心提供[合格證號:SCXK(滬)2008—0016],實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)環(huán)境飼養(yǎng)1周。本實(shí)驗(yàn)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心清潔級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室完成。

1.1.2 藥物和試劑 ①縮宮素注射液:由上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn),每支10 IU/mL,批號 090506。②苯甲酸雌二醇注射液:由上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn),每支 2 mg/mL,批號 090502。③當(dāng)歸精油:由江西省吉安市天玉天然香料油有限公司提供,是自新鮮當(dāng)歸中分離提取而來,精油含蒿苯內(nèi)酯 50%以上,相對密度0.908～0.932,折光 1.448～1.476。④β-內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒(編號E02E0214)、血栓素B2(TXB2)試劑盒(編號E02T0003)、6酮前列腺素F1a(6-K-PGF1a)試劑盒(編號E02K0012),均由上海藍(lán)基生物科技有限公司提供。

1.1.3 裝置和儀器 香薰裝置為1個(gè)68 cm×50 cm×42 cm塑料箱子,中間用鐵絲網(wǎng)隔開放置插電式香薰燈(廣州鴻盛電子科技有限公司),周圍飼養(yǎng)大鼠,箱子兩側(cè)壁留下直徑為1.5 cm的圓孔各3個(gè),頂部為塑料蓋板以便操作和觀察。采血玻璃管、離心機(jī)、離心管、血清冷凍冰箱由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心提供。大鼠β-內(nèi)啡肽、血栓素B2、6酮前列腺素 F1a的檢測儀器由上海藍(lán)基生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 造模方法 大鼠痛經(jīng)模型按文獻(xiàn)[1]方法制備。在大鼠股部皮下注射苯甲酸雌二醇 10 d,每日1次,第1日、第10日每只0.5 mg,第2日～第9日每只0.2 mg,第11日腹腔注射縮宮素每只2 IU。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 取同批Wistar雌性大鼠24只,測量體重,按體重編號后隨機(jī)分為香薰組和病理模型組,每組12只。香薰組和病理模型組依法造模。造模同時(shí),香薰組開始進(jìn)行香薰,取當(dāng)歸精油按1滴精油加30 mL溫開水的比例配制成香薰液,每天08:00～16:00進(jìn)行香薰(中途添加 1次現(xiàn)配香薰液),連續(xù)10 d。病理模型組則不香薰。其余飼養(yǎng)、環(huán)境等條件兩組均相同。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后再次測量體重,大鼠體重在實(shí)驗(yàn)前后組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2.3 觀察指標(biāo) ①大鼠扭體反應(yīng):第11日在腹腔注射縮宮素后30 min內(nèi),觀察記錄大鼠扭體反應(yīng)(大鼠腹部收縮內(nèi)凹,軀干與后肢伸展,臀部與一側(cè)肢體內(nèi)旋)發(fā)生的次數(shù)。②大鼠血清β-EP、TXB2、6-K-PGF1a:實(shí)驗(yàn)第 11天觀察大鼠扭體反應(yīng)次數(shù)后,香薰組和病理模型組分別從眼眶取血1.5 mL,離心后取血清并置于-60℃冰箱冷藏后送檢。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量檢測大鼠血清中各項(xiàng)指標(biāo),方法嚴(yán)格遵照說明書進(jìn)行。③大鼠免疫器官的病理觀察:取血后隨機(jī)抽取香薰組和病理模型組各1只大鼠,解剖后分離胸腺、脾臟,放入10%甲醛中浸泡,常規(guī)病理切片鏡下觀察。此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)在浙江中醫(yī)藥大學(xué)病理實(shí)驗(yàn)室完成。

1.3 實(shí)驗(yàn)人員培訓(xùn) 參與實(shí)驗(yàn)人員均接受過常規(guī)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)培訓(xùn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,各組數(shù)據(jù)用均值和標(biāo)準(zhǔn)差-±s)表示,符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),不符合正態(tài)分布的采用秩和檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 香薰療法對痛經(jīng)大鼠扭體次數(shù)的影響 香薰組大鼠30 min內(nèi)發(fā)生扭體次數(shù)明顯低于模型組(t=3.838,P<0.01)。扭體發(fā)生率兩組間差異無統(tǒng)計(jì) 學(xué)意義(P>0.05),詳見表1。

表1 兩組痛經(jīng)大鼠扭體次數(shù)及扭體發(fā)生率比較

2.2 香薰療法對痛經(jīng)大鼠血清β-EP、6-K-PGF1a、TXB2含量的影響 與病理模型組比較,香薰組大鼠血清中β-EP、6-K-PGF1a含量明顯升高(P<0.01),TXB2含量明顯降低(P<0.01),詳見表2。

表2 兩組痛經(jīng)大鼠血清β-EP、6-K-PGF1a、TXB2的變化

2.3 香薰療法對痛經(jīng)大鼠胸腺、脾臟病理變化的影響 大鼠胸腺、脾臟的病理切片經(jīng)HE染色后顯示:兩組胸腺結(jié)構(gòu)存在,部分區(qū)皮質(zhì)萎縮,髓質(zhì)區(qū)增寬,皮、髓質(zhì)分界尚清。脾臟結(jié)構(gòu)存在,白髓、紅髓、邊緣區(qū)分界清,脾血竇可見大量含鐵血黃素沉著。兩組鏡檢結(jié)果未見明顯區(qū)別。

3 討論

香薰療法是指將植物中萃取的具有特定療效的精油,借助薰香器具擴(kuò)散,經(jīng)呼吸道吸收后,作用于機(jī)體大腦邊緣系統(tǒng)和全身各器官,從而達(dá)到預(yù)防和治療身心疾病的功效[2]。相對于藥物而言,精油的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在高滲透性、代謝快、不滯留、毒性小、容易透過血-腦屏障等特點(diǎn)[2]。國外護(hù)理界已有許多學(xué)者將香薰療法應(yīng)用于疼痛、焦慮、抑郁等的干預(yù),取得良好效果[3-5]。

關(guān)于痛經(jīng)的發(fā)病機(jī)制,中醫(yī)學(xué)認(rèn)為是因沖任氣血運(yùn)行不暢、胞宮經(jīng)血流通受阻所致。西醫(yī)認(rèn)為由于月經(jīng)期子宮內(nèi)膜釋放前列腺素,誘發(fā)子宮肌痙攣性收縮,導(dǎo)致組織缺血而引起的。這一觀點(diǎn)正與中醫(yī)學(xué)“不通則痛”的病機(jī)相吻合。痛經(jīng)的中醫(yī)治療原則以調(diào)理沖任氣血為主,而當(dāng)歸具有補(bǔ)血、調(diào)經(jīng)、止痛等功效。近年來又有藥理研究表明[6],當(dāng)歸精油對正常和病理性的離體子宮平滑肌均有抑制作用,有較強(qiáng)的抗子宮平滑肌痙攣?zhàn)饔谩；谏鲜隼碚摵脱芯炕A(chǔ),本實(shí)驗(yàn)將當(dāng)歸精油以香薰的形式作用于縮宮素所致大鼠痛經(jīng)模型,探討其有效性和作用機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,模型大鼠注射縮宮素后的扭體發(fā)生率是100.0%,且出現(xiàn)磨牙、舔腹部、弓背行走等現(xiàn)象,說明造模成功。香薰組痛經(jīng)大鼠模型的扭體次數(shù)明顯減少,與病理模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而且有3只大鼠未出現(xiàn)明顯的扭體現(xiàn)象,說明當(dāng)歸精油經(jīng)香薰途徑對子宮平滑肌也具有較好的抑制作用,從而緩解痛經(jīng)。本試驗(yàn)中大鼠主要是通過被動(dòng)吸入精油蒸氣而產(chǎn)生相應(yīng)的療效。若是人體則可配合主動(dòng)地深呼吸增加藥物吸入量,治療時(shí)間可相應(yīng)縮短。

β-內(nèi)啡肽是一種具有內(nèi)源性鎮(zhèn)痛作用的神經(jīng)內(nèi)分泌激素,且以子宮為靶器官,參與其功能活動(dòng)的調(diào)節(jié)[7]。本次研究結(jié)果表明,香薰組大鼠血清中β-EP含量高于病理模型組(P<0.01),從而起到內(nèi)源性鎮(zhèn)痛作用。TXB2、6-K-PGF1a是 TXA2、PGI2的代謝產(chǎn)物,TXA2具有強(qiáng)有力的收縮血管的作用,并能促進(jìn)血小板凝集而導(dǎo)致血栓形成。PGI2具有明顯的擴(kuò)血管和抑制血小板聚集的作用。痛經(jīng)時(shí)TXA2產(chǎn)生增多,而缺血子宮肌肉內(nèi)產(chǎn)生的大量氧自由基又抑制PGI2合成,形成惡性循環(huán)。本研究中,通過當(dāng)歸精油香薰對大鼠痛經(jīng)模型血清中TXB2和6-K-PGF1a調(diào)節(jié)結(jié)果可看出,當(dāng)歸精油香薰可以明顯增加血漿中6-K-PGF1a含量和降低TXB2含量,使子宮組織細(xì)胞功能趨于正?；?從而緩解痛經(jīng)的臨床表現(xiàn)。

病理結(jié)果顯示,大鼠的免疫器官胸腺和脾臟均出現(xiàn)一些病理改變,說明痛經(jīng)的發(fā)生與免疫系統(tǒng)的變化密切相關(guān)。但病理模型組和香薰組的鏡檢結(jié)果未見明顯區(qū)別,考慮是否與當(dāng)歸精油香薰的干預(yù)時(shí)間過短有關(guān),有待進(jìn)一步的深入研究。

3 小結(jié)

當(dāng)歸精油香薰療法對縮宮素所致大鼠痛經(jīng)模型具有良好的鎮(zhèn)痛作用,其作用機(jī)制可能與神經(jīng)內(nèi)分泌激素的綜合性調(diào)節(jié)作用相關(guān)。該研究為當(dāng)歸精油香薰療法的臨床護(hù)理應(yīng)用提供了一定的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

(感謝馬小琴教授對本課題的悉心指導(dǎo)。)

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