段　瑞　蘇雪慧　曲曉蘭　高紅莉　蘇延友

【摘要】 目的 測(cè)定泰山土大黃的總蒽醌含量。方法 應(yīng)用紫外分光光度法分別測(cè)定兩種提取方法的泰山土大黃總蒽醌的含量。結(jié)果 兩種提取方法的總蒽醌含量分別為0.328%和0.607%。結(jié)論 方法2更為準(zhǔn)確可靠。

【關(guān)鍵詞】泰山土大黃；總蒽醌；含量測(cè)定

Determine total anthraquinone content of Taishan rumex nepalensis spreng

DUAN Rui,SU Xue-hui,QU Xiao-lan,et al.Pharmacological College of Taishan Medical University,Shandong 271016,China

【Abstract】 Objective To determine the total anthraquinone content.Of Taishan Rumex Nepalensis Spreng.Methods UV were determined both extraction methods of soil Taishan Rumex Nepalensis Spreng total anthraquinone content.Results Two methods of extracting the total content of anthraquinone were 0.328 percent and 0.607 percent.Conclusion Method 2 is more accurate and reliable.

【Key words】Taishan rumex nepalensis；Total anthraquinones；Determination

五岳獨(dú)尊的泰山不僅是世界自然文化雙遺產(chǎn)，而且蘊(yùn)藏著豐富的中藥資源。泰山產(chǎn)土大黃是泰山分布廣泛且有重要開發(fā)應(yīng)用前景的中藥之一。由于泰山獨(dú)特的地理?xiàng)l件，因而所產(chǎn)中藥材多具有明顯的地域特征。因此對(duì)于泰山地產(chǎn)藥材的系統(tǒng)研究及與其他產(chǎn)區(qū)相同藥材的比對(duì)研究是進(jìn)一步研究開發(fā)的基礎(chǔ)。

土大黃又名吐血草、箭頭草、救命王、金不換、紅筋大黃、化血蓮等，多用蓼科酸模屬植物鈍葉酸模(Rumex obtusifoliusl)和紅絲酸模(Rumexchalepensis mill)的根和根莖^[1]，泰山產(chǎn)土大黃是蓼科酸模屬植物鈍葉酸模的根和根莖。有研究表明^[2，3]土大黃具有止血、祛痰止咳平喘、抗菌抗病毒、抗腫瘤等廣泛的藥理作用，主要藥效成分為總蒽醌類。本文應(yīng)用了兩種蒽醌類成分的提取方法提取了泰山土大黃的總蒽醌，并應(yīng)用紫外分光光度法分別測(cè)定了其含量。

1 實(shí)驗(yàn)材料

土大黃(采于泰山)，大黃素(對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品鑒定所，批號(hào)110756-200110)；醋酸鎂、甲醇、三氯甲烷、無(wú)水乙醇、無(wú)水硫酸鈉等試劑均為分析純；所用儀器有紫外可見分光光度計(jì)Spectrumlab54(上海棱光技術(shù)有限公司)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A(上海亞榮生化儀器廠)，電子分析天平AR2140［澳豪斯(上海)有限公司］。

2 方法與結(jié)果

2.1 顯色劑的配制 稱取適量醋酸鎂，用甲醇配制成0.6%的醋酸鎂-甲醇溶液作為顯色劑。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 精密稱取大黃素適量，用0.6%醋酸鎂-甲醇溶液配成對(duì)照品溶液，測(cè)定在200~700 nm之間的紫外可見光譜，由測(cè)定結(jié)果可得在510 nm處有最大吸收，此波長(zhǎng)被選為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密稱取大黃素對(duì)照品10 mg用甲醇定容為50 ml的標(biāo)準(zhǔn)容液。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)液80、160、320、400、600、800、1000 μl于10 ml具塞試管中，用0.6%醋酸鎂-甲醇溶液定容，充分搖勻后于510 nm處測(cè)定吸收度。以0.6%醋酸鎂-甲醇液作空白對(duì)照。測(cè)定結(jié)果見表1。

2.4 蒽醌類成分提取方法及含量測(cè)定

2.4.1 方法1^[4]取土大黃藥材適量，粉碎后過(guò)60目篩。精密稱取粉末7.5 g(水分不高于9.0%)置索氏提取器中，加入乙醇適量，置沸水浴中加熱回流提取至黃色變淺至近無(wú)，提取液置水浴濃縮至約5 ml,放冷。加入稀鹽酸25 ml，氯仿150 ml，置水浴(80℃左右)加熱水解30 min，放冷，分出氯仿層。水液用氯仿萃取2次(100 ml 75 ml)合并3次氯仿液，揮干氯仿。殘?jiān)眉状枷礈觳⑥D(zhuǎn)入50 ml容量瓶中，稀釋至刻度搖勻后即為樣品溶液。離心后，取上清液1 ml于10 ml容量瓶中，甲醇定容，后取1 ml于10 ml容量瓶中，用0.6%醋酸鎂-甲醇定容后即可進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果見表1。

2.4.2 方法2^[5，6]精密稱取土大黃粉末0.051 6 g于燒瓶中，同時(shí)加30 ml氯仿和15 ml 2.5 mol/L硫酸，沸水浴回流水解2 h。后過(guò)濾取氯仿層，稱取適量無(wú)水Na₂SO₄加入氯仿中脫水后，回收氯仿。殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ轂?0 ml。精密吸取1 ml于10 ml容量瓶中，加0.6%醋酸鎂-甲醇溶液并定容。搖勻后于510 nm處測(cè)定吸光度并將結(jié)果代入回歸方程，可計(jì)算總蒽醌含量。所得結(jié)果見表2。

通過(guò)表2，可知方法2提取含量較高，方法1測(cè)定含量較低，可能在提取中將其有效成分破壞，也可因放置時(shí)間較長(zhǎng)導(dǎo)致結(jié)果降低。究竟方法2合適與否，為了進(jìn)一步確證，可用方法2進(jìn)行加樣回收率實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證測(cè)定結(jié)果的優(yōu)劣。

2.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取已提取盡蒽醌類成分藥材粉末80 mg，精密加入大黃素粉末5 mg，加入氯仿30 ml，沸水浴回流提取2 h，過(guò)濾，除去藥渣。回收氯仿后，加甲醇溶解并定容為25 ml。精密吸取1 ml于10 ml容量瓶中，用0.6%醋酸鎂-甲醇溶液定容，搖勻后于510 nm處測(cè)定吸收度，測(cè)定值代入回歸方程，計(jì)算含量，結(jié)果見表3。

2.6 顯色穩(wěn)定性試驗(yàn) 取高、低2個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品液，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法，加0.6%醋酸鎂-甲醇液顯色，在室內(nèi)燈光下，每隔一定時(shí)間于510 nm處測(cè)定吸光度，測(cè)定結(jié)果見表4。

3 討論

不同產(chǎn)地對(duì)土大黃總蒽醌含量有一定影響，泰山產(chǎn)土大黃總蒽醌含量略低于貴州所產(chǎn)^[7]，另外生長(zhǎng)年限、采收時(shí)間也會(huì)影響其含量，產(chǎn)地及生長(zhǎng)環(huán)境的影響機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)研究中考察了兩種不同提取方法對(duì)總蒽醌含量的影響，可以看出，由于所用試劑及處理方法不同，測(cè)定結(jié)果差異較大。經(jīng)過(guò)加樣回收率實(shí)驗(yàn)、顯色穩(wěn)定性試驗(yàn)等的考察，說(shuō)明方法2更為準(zhǔn)確可靠，可以作為總蒽醌含量測(cè)定的常規(guī)方法。

參 考 文 獻(xiàn)

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