利用畢赤酵母系統(tǒng)表達(dá)重組人生長(zhǎng)激素的研究
2009-04-29 00:44:03朱振洪葛立軍劉文洪趙偉春萬(wàn)海同
生命科學(xué)研究 2009年1期
關(guān)鍵詞：表達(dá)
朱振洪 葛立軍 劉文洪 趙偉春 萬(wàn)海同
摘要：為了獲得重組人生長(zhǎng)激素在畢赤酵母中高表達(dá)的菌株，按畢赤酵母基因密碼子偏愛(ài)性，人工合成hGH的全基因序列，該基因被克隆到穿梭質(zhì)粒pPIC9K中，PEG1000介導(dǎo)轉(zhuǎn)入畢赤酵母GS115細(xì)胞，通過(guò)G418篩選獲得高拷貝轉(zhuǎn)化子。在甲醇的誘導(dǎo)下，實(shí)現(xiàn)了hGH在畢赤酵母中的成功表達(dá)。通過(guò)發(fā)酵條件的優(yōu)化，發(fā)酵上清中的表達(dá)量達(dá)1537mg/L經(jīng)過(guò)超濾和兩步層析。重組蛋白的得率達(dá)35％，純度為97％。相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定表明重組蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量與理論值相近，N-端氨基酸測(cè)序證實(shí)hGH基因在畢赤酵母中獲得正確的表達(dá)。
關(guān)鍵詞：重組人生長(zhǎng)激素；畢赤酵母；表達(dá)；純化
中圖分類(lèi)號(hào)：Q78文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1007－7847(2009)01－0020－05
猜你喜歡
甘肅教育(2016年22期)2016-12-20 22:28:05
藝術(shù)評(píng)鑒(2016年17期)2016-12-19 19:12:28
青年文學(xué)家(2016年17期)2016-12-17 20:26:03
中學(xué)課程輔導(dǎo)·教師教育(上、下)(2016年17期)2016-12-17 18:11:48
成才之路(2016年35期)2016-12-12 12:08:34
中學(xué)課程輔導(dǎo)·教師教育(上、下)(2016年19期)2016-12-07 20:59:07
藝術(shù)科技(2016年9期)2016-11-18 18:24:22
藝術(shù)科技(2016年9期)2016-11-18 16:48:09
校園英語(yǔ)·上旬(2016年10期)2016-11-16 19:03:00
人間(2016年28期)2016-11-10 00:08:22
