李家珂　魯　彥

[摘要] 目的：探討酶解-火焰原子吸收分光光度法（AAS法）測定乳制品中鈣、鎂、鐵、鋅4種營養(yǎng)元素的方法。方法：以蛋白酶水解樣品，稀酸溶解，經(jīng)過濾后以火焰AAS法測定。結(jié)果：4種元素的平均回收率為90％～102％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于11％。結(jié)論：酶解-火焰AAS法具有操作簡單、快速、試驗成本低、對人體損害小等優(yōu)點，與酸消化法相比無顯著性差異，適用于乳制品中4種營養(yǎng)元素的測定。

[關(guān)鍵詞] 酶解-火焰AAS法；乳制品；營養(yǎng)元素

[中圖分類號]R115[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B [文章編號]1674-4721（2009）01（a）-063-02

乳制品中的營養(yǎng)元素對恢復(fù)、改善和提高人們膳食的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)，滿足人體需要，維持生命活力，供給機體生長發(fā)育的修補材料，維持機體正常的生理機能有重要意義[1]。因此，通過對乳制品中營養(yǎng)元素的分析可以保障人民群眾的身體健康。我們采用酶解-火焰原子吸收分光光度法（AAS法）測定乳制品中營養(yǎng)元素，操作簡單、快速、試驗成本低，現(xiàn)介紹如下。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

美國PE公司PE300原子吸收分光光度計，PE公司鈣、鎂、鐵、鋅空心陰極燈；鹽酸（優(yōu)級純）：0.1、0.2、0.5、1.0 mol/L；木瓜蛋白酶（進口分裝）：4 g/L溶液（現(xiàn)用現(xiàn)配），稱取木瓜蛋白酶0.4 g溶解定容至100 ml水中；8-羥基喹寧（分析純）：1 g/L溶液，稱取1.0 g溶解于氯化氫（HCl）（1 mol/L）10 ml中，用水稀釋定容至1 000 ml；鈣（Ca）、鎂（Mg）、鐵（Fe）、鋅（Zn）4種元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液：1.000 0 mg/ml；二次去離子水。

1.2工作曲線制作

取4種元素標(biāo)準(zhǔn)儲備液稀釋成系列濃度。濃度范圍：Ca 0～3.0 μg/ml；Mg、Fe、Zn 0～2.0 μg/ml。Ca用8-羥基喹寧稀釋，Mg用HCl（0.2 mol/L）稀釋，F(xiàn)e、Zn用葡萄糖溶液稀釋。將儀器按有關(guān)參數(shù)調(diào)整至最佳狀態(tài)，作出工作曲線或計算直線回歸方程。

1.3樣品的制備與測定

鮮乳及酸乳取樣5.00 g，乳粉取樣1.00 g于100 ml燒杯中（用2 ml水調(diào)至糊狀），加酶液5 ml，混勻，蓋表面皿，于40℃恒溫箱保溫3 h，加HCl（0.2 mol/L，下同）10 ml，搖勻，在40℃下保溫2 h，過濾于50 ml容量瓶中，并以HCl分次洗滌燒杯及濾紙上的殘渣，經(jīng)濾紙濾入容量瓶中，以HCl定容，備用。同時做空白實驗。

上述濾液直接用于Fe、Zn的測定；經(jīng)HCl10倍稀釋后測定Mg；以8-羥基喹寧10倍稀釋后測定Ca。

2 結(jié)果與討論

2.1 實驗條件的研究

2.1.1酶的選擇選擇胃蛋白酶、胰蛋白酶及木瓜蛋白酶為試驗酶，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胃蛋白酶作用2 h各元素原子吸收值達(dá)到最大，而同濃度的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶則需要3 h，但胃蛋白酶和胰蛋白酶空白液中鈣含量較高，因此選擇木瓜蛋白酶為試驗酶。

2.1.2 脂肪對試驗的影響乳品中含有一定量的脂肪，為了探討脂肪對試驗結(jié)果的影響，先以脂肪酶分解脂肪，再以蛋白酶水解后測定，未見試驗值增高。將殘渣測定，殘渣中的無機元素含量均在檢出限以下。說明脂肪對本試驗無影響。

2.1.3 酸度的影響酸的作用是除了使無機元素與有機物充分解離外，還使分子較大的糖類水解便于過濾。在選擇HCl的試驗中，0.2 mol/L和0.5 mol/L HCl都能使元素的原子吸收值達(dá)到最大，但0.5 mol/L HCl使空白液中鈣鎂濃度增大，故本試驗選擇0.2 mol/L HCl。

2.2回收率試驗

對3種樣品做回收試驗，4種元素回收率在90％～102％。見表1。

2.3精密度試驗

對3種樣品4個元素做6次測定其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于11％。見表2。

2.4酶解法與酸消化法比較

用本法與酸消化法[2]對同一份乳品連續(xù)進行20次測定，經(jīng)配對t檢驗，兩法之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.427，t0.05(19)=2.093，P>0.05）。見表3。

本文報道了酶解-火焰原子吸收法測定乳品中4種營養(yǎng)元素的方法。試驗表明：4種元素的平均回收率90％～102％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于11％。本法具有操作簡便快速、試驗成本低、對操作人員損害小等優(yōu)點，適用于乳品中4種營養(yǎng)元素的測定。

[參考文獻(xiàn)]

[1]中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所編.食品營養(yǎng)成分測定法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1990.102.

[2]中華人民共和國食品衛(wèi)生檢驗標(biāo)準(zhǔn)理化部分[S].GB/T5009.101-.203-2003.

（收稿日期：2008-11-27）