王艷萍 趙琪鐘 衛(wèi)舒帆
摘要:目的:建立測定感冒止咳糖漿中綠原酸含量的HPLC方法。方法:色譜柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5tan)柱;流動相:甲醇—水—冰醋酸(20:80:1);流速:1.0mL·min-1;檢測波長:327nm。結(jié)果:綠原酸在0.077~0,387mg·mL-1。范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=0.9999),平均回收率為99.8%(n=6),RSD=0.34%。結(jié)論:本法操作簡單、靈敏、準(zhǔn)確,可用于感冒止咳糖漿的質(zhì)量控制。
關(guān)鍵詞:RP-HPLC;感冒止咳糖漿;綠原酸;含量測定
中圖分類號:R927.2文獻標(biāo)識碼:A
文章編號:1007--2349(2009)09--0065--02
感冒止咳糖漿有清熱解毒,止咳化痰的功效。可用于感冒或流感發(fā)熱,頭痛等癥。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于衛(wèi)生部頒標(biāo)準(zhǔn)第三冊。方中金銀花有清熱解毒的作用,其中的抗菌主要有效成分綠原酸標(biāo)準(zhǔn)中未進行定量控制,本研究采用高效液相法對感冒止咳糖漿中綠原酸進行含量測定,試驗結(jié)果表明所建的方法簡便,結(jié)果準(zhǔn)確,可行,為更好確保藥品的質(zhì)量提供了可靠的檢測依據(jù)。
1儀器與試藥
美國Agilent1100高效液相色譜儀,紫外檢測器,塞多利斯電子天平BP211D(德國)。甲醇(色譜純,F(xiàn)isher,USA),冰醋酸(分析純),去離子水。綠原酸對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號為110753--200212),感冒止咳糖漿(均購自云南各大藥店)。
2方法與結(jié)果
2,1色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗色譜柱:Agilent ZORB-AX Eclipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm)柱;流動相:甲醇一水一冰醋酸(20:80:1);流速:1.0mL·min-1;檢測波長:327 nm;柱溫:30℃;進樣量:10μL;理論塔板數(shù)以綠原酸計大于5000;在此條件下綠原酸和樣品中其他物質(zhì)可以得到良好的分離,分離度2>2.5,陰性樣品無干擾。見圖1。
2,2對照品儲備液的制備
精密稱取綠原酸對照品15.47mg,置10mL量瓶中,加50%甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得1.547 mg·mL-1對照品儲備液。
2,3供試品溶液的制備精密量取樣品2mL,置50mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,過濾,即得。
2,4陰性樣品溶液按樣品處方比例制備不含金銀花的陰性樣品溶液,照上述供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。2,5線性關(guān)系的考察精密吸取上述對照品儲備液0,5,1.0,1.5,2.0,2.5mL于10mL量瓶中,用50%甲醇溶液配成濃度為0.077,0.155,0.232,0.310,0.387 mg·mL-1的對照品溶液,搖勻;分別吸取上述5份對照品溶液10μL進樣,按“2.1,,色譜條件測定,以進樣濃度為橫坐標(biāo)(x),峰面積為縱坐標(biāo)(y),進行線性回歸,得回歸方程:y=30905x—79(r=0.9999)。結(jié)果表明綠原酸在0.077~0.387 mg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。
2,6精密度試驗取上述“2.5”項對照品溶液系列中濃度為0.232 mg·mL18-1的溶液按上述色譜條件重復(fù)進樣6次,測定峰面積,RSD=0.32%(n=6)。
2,7重復(fù)性試驗取上述供試品溶液,按“2.1”色譜條件,重復(fù)進樣6次,測定其峰面積,并計算樣品溶液中綠原酸的含量,綠原酸平均含量為0.355mg·mL-1