摘要：目的研究羅布麻葉不同有效部位對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的作用。方法觀察羅布麻葉不同有效部位對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血脂及AS模型大鼠血脂、血清脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)和主動(dòng)脈組織形態(tài)變化的影響。結(jié)果各用藥組均能有效地降低大鼠血脂和脂質(zhì)過(guò)氧化物的水平；均能減輕主動(dòng)脈硬化程度，但以鞣質(zhì)部位的作用最為明顯。結(jié)論：羅布麻葉鞣質(zhì)和黃酮有效部位均能夠調(diào)節(jié)血脂、抗氧化，改善AS早期病變。

關(guān)鍵詞．羅布麻：高脂血癥；動(dòng)脈粥樣硬化，黃酮；鞣質(zhì)

中圖分類號(hào)：R541.4 R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672－1349(2007)09－0831－02

羅布麻(upocynum oenetum L，AVL)為夾竹桃科植物，其葉是一味傳統(tǒng)平肝清熱的中藥，含有鞣質(zhì)、黃酮、有機(jī)酸、脂肪酸醇脂、氨基酸等多種化學(xué)成分。羅布麻葉提取物具有降壓、降血脂、抗氧化、肝保護(hù)等多種藥理作用。本課題前期采用現(xiàn)代中藥提取分離技術(shù)分別得到了羅布麻葉的總鞣質(zhì)有效部位和總黃酮有效部位，并進(jìn)行了質(zhì)量控制研究。為研究羅布麻葉有效部位的降血脂及抗動(dòng)脈硬化(AS)作用，建立了大鼠實(shí)驗(yàn)性高脂血癥及早期動(dòng)脈粥樣硬化的模型，觀察不同有效部位的降血脂效果及其對(duì)主動(dòng)脈AS形成的防治作用，探討降脂、抗AS機(jī)制，為新藥的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 藥品及試劑 戊巴比妥鈉(上海第二制藥廠，批號(hào)910610)；膽酸鈉(北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠，批號(hào)900320)；酶聯(lián)免疫試劑盒(北京中生生物工程高技術(shù)公司)；羅布麻葉(津華制藥廠提供，產(chǎn)自山西運(yùn)城地區(qū))；羅布麻葉乙醇粗提物(總鞣質(zhì)的含量為6.56％，總黃酮的含量為2.45％)、羅布麻葉總鞣質(zhì)有效部位與總黃酮有效部位是本課題組以乙醇粗提物原料，通過(guò)采用樹(shù)脂吸附，乙醇分段洗脫而得。經(jīng)檢測(cè)總鞣質(zhì)有效部位總鞣質(zhì)的含量66.0％(以鞣酸計(jì))，總黃酮有效部位總黃酮含量為81.3％(以蘆丁計(jì))。

1．2 動(dòng)物Bhster大鼠，雄性，體重302 g±14 g，山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。

1．3 儀器LDS－2A型離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠制造)；多功能圖像分析儀；EX－2型小動(dòng)物血壓測(cè)定儀(湖南醫(yī)科大學(xué)附屬儀器廠制造)。

1．4 動(dòng)物分組及模型建立 雄性Blister大鼠42只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為7組，每組6只。A組為正常對(duì)照組；B組為高脂模型組，C組為總鞣質(zhì)有效部位組(0.81 g/kg)，D組為總黃酮有效部位組(0.16 g/kg)；E組為鞣質(zhì)與黃酮混合物(1.1)高劑量組(0.23 g/kg)，F(xiàn)組為鞣質(zhì)與黃酮混合物(1.1)低劑量組(0.17 g/kg)，G組為AVL乙醇粗提物組(0.41 g/kg)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，A組給予普通飼料，其余各組大鼠均給予高脂飼料(81％的基礎(chǔ)飼料，1％膽固醇，7.5％的豬油，0.2％甲基硫氧嘧啶，0.3％的膽酸鈉，10％的蛋黃粉)復(fù)制高血脂模型。除A組和B組灌胃同體積蒸餾水外，其他各組均按前述劑量開(kāi)始灌胃，持續(xù)12周。

1．5 檢測(cè)指標(biāo)血脂的檢測(cè)包括血清總膽固醇(total chores-telol，TC)、三酰甘油(trtglycende，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high density hpoprotem cholesterol，HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇(10w density hpoprotem cholesterol，LDL－C)。同時(shí)還測(cè)定脂質(zhì)過(guò)氧化物(hpid oxidative peroxidation products，LPO)，并觀察組織病理學(xué)變化。

1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0軟件分析，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示。各組實(shí)驗(yàn)前后的數(shù)據(jù)比較用t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析，方差不齊者采用秩和檢驗(yàn)。顯著性界值取P＜0.05。

2 結(jié) 果

2．1 模型狀況通過(guò)12周喂飼高脂飼料復(fù)制AS大鼠模型，B組大鼠體重331.6 g±5.8 g，增長(zhǎng)明顯高于A組的(306.3 g±12.3 g，P＜0.05)；同時(shí)血管壁受損，管壁增厚，內(nèi)皮細(xì)胞腫大部分脫落，基膜破壞，內(nèi)膜膠原纖維增殖，平滑肌細(xì)胞遷移、變性，局部脂質(zhì)沉積，呈現(xiàn)為AS的早期改變。說(shuō)明高脂血癥動(dòng)物模型成功。

2．2 AVL各有效部位列大鼠血脂變化的影響，實(shí)驗(yàn)前各組大鼠TC，TG，LDL－C，HDL－C均在正常范圍，組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2．3 AVL各有效部位對(duì)大鼠血清LPO的影響，B組大鼠血清LPO明顯高于A組(P＜0.05)。與B組比較，各組的LPO水平均明顯降低(P＜0.05)。

2．4 AVL各有效部位抗動(dòng)脈硬化的形態(tài)學(xué)觀察，組織病理學(xué)檢查結(jié)果顯示，A組主動(dòng)脈血管壁光滑，厚度適中，內(nèi)皮完整，中膜平滑肌細(xì)胞排列規(guī)整，與彈力板近似平行相間排列，細(xì)胞輪廓清晰度高，未見(jiàn)病理改變。B組主動(dòng)脈內(nèi)膜明顯增厚，內(nèi)膜及中層下可見(jiàn)脂質(zhì)沉積，細(xì)胞排列疏松，間隙增寬，并有泡沫細(xì)胞形成。C組主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞尚完整，內(nèi)膜下未見(jiàn)泡沫細(xì)胞，未見(jiàn)內(nèi)彈力板斷裂以及平滑肌增殖現(xiàn)象。D組、E組均見(jiàn)主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞尚完整，內(nèi)皮下可見(jiàn)少量泡沫細(xì)胞和脂質(zhì)沉積，內(nèi)彈力板斷裂以及平滑肌增殖現(xiàn)象輕微。F組、G組主動(dòng)脈內(nèi)皮不完整，主動(dòng)脈略增厚，中層和平滑肌層可見(jiàn)泡沫細(xì)胞形成，但程度明顯輕于B組。

3 討 論

AS是心腦血管發(fā)病的病理基礎(chǔ)。脂質(zhì)代謝紊亂，在AS發(fā)病中具有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，AVL總鞣質(zhì)與總黃酮有效部位均表現(xiàn)出良好的降脂效果，但鞣質(zhì)與黃酮的降脂作用機(jī)制有所不同，總鞣質(zhì)部位對(duì)LDL－C的水平影響明顯，而總黃酮部位表現(xiàn)為具有良好的改善高脂大鼠三酰甘油代謝的作用；鞣質(zhì)與黃酮合用后降低血清TC，TG，LDL－C的作用更明顯，但升高HDL C的效果不及鞣質(zhì)有效部位，而且高濃度組表現(xiàn)出更為良好的降脂效果，說(shuō)明AVL的降脂效果與有效部位呈一定的量效關(guān)系。AVL不同有效部位對(duì)血脂代謝紊亂的調(diào)節(jié)作用，司能是其抗AS作用的重要機(jī)制之一。

鞣質(zhì)類和黃酮類分子中含有眾多的酚羥基，具有很強(qiáng)的還原性，對(duì)各種氧自由基、羥自由基、含氮自由基都有強(qiáng)清除能力。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，血清LPO在正常組和高脂模型組之間存在顯著的差異，證實(shí)在高脂狀態(tài)下，大鼠體內(nèi)存在脂質(zhì)過(guò)氧化作用的增強(qiáng)。給予大鼠AVL不同有效部位后，大鼠血中脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的速率相應(yīng)下降(LPO含量降低)，說(shuō)明AVL的總鞣質(zhì)、總黃酮部位均參與影響LPO的代謝過(guò)程，可減輕脂質(zhì)過(guò)氧化物對(duì)動(dòng)脈壁的直接損傷，保護(hù)了內(nèi)皮細(xì)胞的完整性。提示AVL黃酮、鞣質(zhì)的抗氧化作用可能是其抗AS的另一作用機(jī)制。

本實(shí)驗(yàn)研究初步發(fā)現(xiàn)，AVL葉各有效部位及乙醇提取物對(duì)高脂血癥所致的血管損害有明顯的保護(hù)作用，用藥后司保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞和基膜的完整、抑制膠原纖維和內(nèi)膜的增生、減少平滑肌細(xì)胞損害，并有減少動(dòng)脈硬化形成的趨勢(shì)。但粗提物的作用相比較弱，而總鞣質(zhì)與總黃酮有效部位的效果較好，總鞣質(zhì)組尤為明顯，這說(shuō)明前期的純化工藝可以較大程度的富集羅布麻葉中降血脂及抗AS的有效成分，證明了純化工藝的合理性，同時(shí)提示羅布麻葉總鞣質(zhì)與總黃酮在降血脂及預(yù)防AS方面有進(jìn)一步的研究?jī)r(jià)值。

本文編輯 王雅潔