摘要：目的觀察腦心通膠囊和辛伐他汀對易損斑塊的穩(wěn)定作用。方法：32只兔給予球囊損傷腹主動脈加高脂飼料喂養(yǎng)，12周末30只造模兔隨機分為自然消退組、腦心通組和辛伐他汀組，每組10只。24周末在腹主動脈斑塊處轉(zhuǎn)桌攜帶人野生型P53基因，26周末給予中國斑點蝰蛇毒(CRVV)和組胺觸發(fā)斑塊破裂。于26周末測定血脂、血漿纖維蛋白原、高敏C反應(yīng)蛋白(hs－CRP)和基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP－1)水平，并進行血管內(nèi)超聲檢測。結(jié)果：治療后腦心通組和辛伐他汀組的總膽固醇、低密度脂蛋白、hs－CRP及MMP－1顯著低于自然消退組(P＜0.05和P＜0.01)。與辛伐他汀組比較，腦心通組能顯著降低血漿纖雛蛋白原濃度(P＜0.05)。腦心逮組和辛伐他汀組血管外彈力膜面積(EEMA)、斑塊面積(PA)和管腔面積狹窄(LAS)百分率較之自然消退組顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)。結(jié)論腦心通膠囊和辛伐他汀能通過降低血脂、hs－CRP和MMP－1水平等機制穩(wěn)定易損斑塊。

關(guān)鍵詞：動脈粥樣硬化；血管內(nèi)超聲；腦心通膠囊，辛伐他汀

中圖分類號：R543.1 R289.5 文獻標(biāo)識碼：B 文章編號：1672－1349(2007)09－0825－03

動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是由多種病理過程包括炎細(xì)胞的浸潤、平滑肌細(xì)胞的增殖、細(xì)胞外基質(zhì)的增加及血栓形成等參與的慢性炎癥性疾病。腦心通膠囊是基于中醫(yī)理論研制的新型中藥，具有增加心臟供血、保護血管內(nèi)皮功能及降低和控制心血管疾病危險因素的作用，但它對于易損斑塊的作用尚不明了。因此，本研究擬將較大劑量辛伐他汀和腦心通膠囊應(yīng)用于兔易損斑塊模型中，觀察這兩種藥物穩(wěn)定易損斑塊的療效并探討其可能的機制。

1 材料與萬法

1．1 動物雄性純種新西蘭兔32只，體重1.5 kg－2.5 kg，由山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，合格證號：SCXK(魯)20040013。

1．2 藥物辛伐他汀(商品名舒降之，杭州默沙東制藥有限公司提供，批號040805)，腦心通膠囊，每粒膠囊含生藥0.4 g，由成陽步長制藥有限公司提供，批準(zhǔn)文號：Z20055001。

1．3 試劑與儀器攜帶人野生型P53基因的復(fù)制缺陷型重組腺病毒載體Adv P53由上海醫(yī)元生物基因科技發(fā)展公司提供，中國斑點蝰蛇毒(Chmese Russdll's Viper Venom，CRVV)由廣州蛇毒研究所提供，組胺購目上海三杰生物技術(shù)有限公司。高敏C反應(yīng)蛋白(hs－CRP)和基質(zhì)金屬蛋白酶－1(MMP－1)ELISA試劑盒購自美國Bionewtrans Pharmaciutical Biotechnology公司。

1．4 動物造模所有兔給予球囊損傷腹主動脈加高脂飼料喂養(yǎng)，造模期為12周。

1．5 干預(yù)方法 12周末隨機抽取2只兔病理學(xué)檢測證實AS形成，將剩余實驗兔隨機分為3組，每組10只，均改喂普通飼料，腦心通組加用腦心通膠囊，給藥量為生藥2g/(kg·d)，辛伐他汀組加用舒降之，給藥量為5 mg/(kg·d)；自然消退組不予藥物，干預(yù)時間為12周。

1．6 斑塊局部的基因轉(zhuǎn)染24周末，戊巴比妥鈉麻醉動物，開腹暴露腹主動脈。在高頻線陣探頭的引導(dǎo)下，尋找腹主動脈在右腎動脈分支處與髂總動脈之間血管段(全長2cm－3cm)中的最大斑塊處作為病毒載體的轉(zhuǎn)染部位，經(jīng)導(dǎo)管向轉(zhuǎn)染部位的管腔中注入10μL Adv P53重組載體，注射前結(jié)扎轉(zhuǎn)染部位上下兩端的血管10 min，然后恢復(fù)血供，在結(jié)扎部位做縫線標(biāo)記，關(guān)閉腹腔，靜脈給予抗生素預(yù)防感染，實驗兔繼續(xù)給予普通飼料喂養(yǎng)2周。

1．7 藥物觸發(fā)26周末，對實驗兔進行藥物觸發(fā)。CRW 0.15 mg/kg腹膜下注射，30 min后耳緣靜脈注射組胺0.02 mg/kg，于處死動物前24 h，48 h給予兩次藥物觸發(fā)。

1．8 血液生化檢查于26周末檢測血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)。另一部分以枸櫞酸鈉抗凝，留取血漿測定纖維蛋白原(Rb)。

1．9 血清炎性因子檢測藥物觸發(fā)前抽取兔耳緣靜脈血/4mL，留取血清分裝于Eppendorf管中，于－86℃冰箱中凍存，按試劑盒說明測定血清中hs－CRP和MMP－1的水平。

1．10 血管內(nèi)超聲檢查于26周末藥物觸發(fā)后進行腹主動脈血管內(nèi)超聲檢查，病變部位及參考部位的血管外彈力膜面積(external elasttc membrance area，EEMA)、管腔面積(lumen area，LA)、斑塊面積(plaque area，PA)和管腔面積狹窄百分率(lumenarea stenosis，LAS)。

1．11 統(tǒng)計學(xué)處理計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，3組間各指標(biāo)的比較應(yīng)用單因素方差分析，應(yīng)用SPSS軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

藥物干預(yù)階段腦心通組和辛伐他汀組因腹瀉各死亡1只，自然消退組死亡2只，原因分別為尿潴留和上呼吸道感染。

2．1 血漿纖維蛋白原與血清炎性因子檢測 與辛伐他汀組比較，腦心通膠囊能顯著降低血漿纖維蛋白原濃度(P＜0.05)。與自然消退組比較，治療后腦心通組和辛伐他汀組血清hs－CRP及MMP－1的水平均顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)。

2．2 血脂檢測與自然消退組比較，治療后腦心通組和辛伐他汀組TC和LDL－C水平均顯著降低，辛伐他汀組分別降低TC和LDL－C 68.61％和73.65％，腦心通膠囊降低TC 34.28％和LDL－C 32.04％．其中辛伐他汀降低血脂的效果更顯著。

2．3 血管內(nèi)超聲檢測藥物觸發(fā)前血管內(nèi)超聲未見斑塊破裂及血栓形成，藥物觸發(fā)后辛伐他汀組和腦心通組各死亡1例，自然消退組死亡2例，死亡原因推測為急性心腦血管事件。與自然消退組比較，腦心通組和辛伐他汀組實驗兔EEMA，PA，LAS顯著下降(P＜0.05或P＜0.01)，腦心通組和辛伐他汀組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

3 討 論

AS本身是一個炎癥與免疫反應(yīng)的過程，AS易損斑塊具有薄的纖維帽，大量炎性細(xì)胞浸潤以及脂質(zhì)聚集等明顯的形態(tài)學(xué)特點。穩(wěn)定易損斑塊的治療主要在于降脂、抗炎、促進平滑肌及膠原的增殖。

本研究將辛伐他汀和腦心通膠囊分別應(yīng)用于免易損斑塊模型中。在REVERSAL和PROVEIT試驗中證實了大劑量他汀抑制斑塊增長和減低心血管事件的作用。本研究中辛伐他汀和腦心通膠囊顯著降低血清TC和LDL－C水平，其中辛伐他汀降低血脂的效果更顯著，證明兩種藥物均可以通過降低血脂水平穩(wěn)定易損斑塊。

Ross提出AS是一種炎癥性疾病，炎癥過程中最具標(biāo)志性的因子C反應(yīng)蛋白是目前發(fā)現(xiàn)的最重要的急性冠脈綜合征(ACS)的炎性標(biāo)志物，是AS發(fā)生發(fā)展中具有重要預(yù)后意義的指標(biāo)。本研究證實辛伐他汀和腦心通膠囊可顯著降低血hs－CRP濃度，表明這是二者穩(wěn)定斑塊的主要機制。纖維蛋白原水平升高預(yù)示自發(fā)性缺血、心肌梗死和死亡的危險性增加。腦心通膠囊能顯著降低血漿纖維蛋白原濃度(P＜0.05)，在一定程度上降低血液的高凝狀態(tài)，而辛伐他汀在這方面無顯著作用。

AS斑塊纖維帽的降解是導(dǎo)致斑塊易損性的最重要因素，基質(zhì)金屬蛋白酶具有廣譜底物選擇性，本研究中12周治療后腦心通組和辛伐他汀組MMP－1的水平均顯著下降(P＜0.01)，這可能是兩種藥物穩(wěn)定斑塊的主要作用機制。血管內(nèi)超聲檢測證實腦心通組和辛伐他汀組實驗兔EEMA，PA，LAS顯著下降(P＜0.01或P＜0.05)，進一步提供了兩種藥物穩(wěn)定易損斑塊的證據(jù)。

許多動物實驗及臨床研究已經(jīng)證實腦心通具有調(diào)脂、抗氧化等多種作用，現(xiàn)代藥理研究證明，黃芪對血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的保護作用、改變血液流變學(xué)，其作用機制涉及多方面，川芎的有效成分川芎嗪具有抗凝、抑制血小板集聚、擴張血管、改善微循環(huán)、抗內(nèi)皮素、保護血管內(nèi)皮、抗氧化和鈣拮抗等藥理作用，川芎嗪抑制核轉(zhuǎn)錄因子－κB(NF-κB)激活從而抑制炎癥反應(yīng)；丹參及其有效成分可通過降血脂、抗氧化作用、抗凝血等多種途徑抗AS，更為重要的是，它具有明顯的抗炎作用。本研究證實腦心通膠囊能通過降低血脂、hs－CRP和MMP－1水平等機制穩(wěn)定易損斑塊。

根據(jù)中醫(yī)理論，氣虛血瘀為AS的主要病機，治療以益氣活血為主要治則，改善心肌缺血，穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊，抑制血栓形成，減少冠狀動脈事件的發(fā)生。黃芪有補氣開陽、益衛(wèi)解表、利水消腫、養(yǎng)血安神之功效；丹參、紅花有活血祛瘀、涼血消腫、養(yǎng)血安神之功效；當(dāng)歸、川芎、赤芍清熱涼血、祛瘀止痛、補氣活血行氣；乳香、沒藥活血止痛、消腫生??；桂枝、地龍清熱熄風(fēng)、溫陽通經(jīng)、利尿通絡(luò)，全蝎、水蛭有破血逐瘀、熄風(fēng)止痙、解毒散結(jié)、通經(jīng)止痛之功效，諸藥合用，標(biāo)本兼治，共奏益氣活血、化瘀通絡(luò)之效。

本文編輯 王雅潔