摘要" 目的：基于骨髓細(xì)胞白血病序列1（MCL-1）表達(dá)探討經(jīng)顱磁刺激（TMS）對(duì)大腦中動(dòng)脈阻塞（MCAO）模型大鼠腦組織損傷的作用機(jī)制。方法：選擇健康雄性無(wú)特定病原體（SPF）級(jí)SD大鼠30只（3月齡），采用隨機(jī)數(shù)字表法將30只大鼠分為假手術(shù)組、模型組和TMS組，各10只，建模成功后24 h內(nèi)進(jìn)行TMS治療。采用Longa評(píng)分評(píng)估3組神經(jīng)功能缺損程度；采用2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色測(cè)定腦梗死面積；采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TUNEL）檢測(cè)細(xì)胞凋亡；采用蛋白免疫印記法（Western Blot）檢測(cè)MCL-1蛋白表達(dá)水平；采用逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)MCL-1mRNA表達(dá)水平。結(jié)果：假手術(shù)組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積均低于TMS組、模型組，TMS組神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積均低于模型組（P＜0.05）。假手術(shù)組細(xì)胞凋亡指數(shù)低于TMS組、模型組，TMS組細(xì)胞凋亡指數(shù)低于模型組（P＜0.05）。假手術(shù)組MCL-1mRNA高于TMS組、模型組，TMS組MCL-1mRNA高于模型組（P＜0.05）。假手術(shù)組MCL-1蛋白表達(dá)水平高于TMS組、模型組，TMS組MCL-1蛋白表達(dá)水平高于模型組（P＜0.05）。結(jié)論：TMS通過(guò)升高M(jìn)CL-1mRNA表達(dá)，減少細(xì)胞凋亡，抑制MCAO大鼠腦組織損傷。

關(guān)鍵詞" 大腦中動(dòng)脈阻塞；腦組織損傷；骨髓細(xì)胞白血病序列1；經(jīng)顱磁刺激；大鼠；實(shí)驗(yàn)研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.22.010

Mechanism of Transcranial Magnetic Stimulation on Brain Tissue Injury in Rats with Middle Cerebral Artery Occlusion Based on MCL-1 mRNA Expression

WANG Jiamin1， CHEN Keshang1， WU Di2， HUANG Shengrong1， WU Xiyou1

1.Hainan West Central Hospital， Danzhou 571700， Hainan， China; 2.Zhongda Hospital Southeast University

Corresponding Author" CHEN Keshang， E-mail： 65172988@qq.com

Abstract" Objective：To explore the mechanism of transcranial magnetic stimulation（TMS） on brain tissue injury in rats with middle cerebral artery occlusion（MCAO） based on myelocytic leukemia sequence 1（MCL-1）.Methods：Thirty healthy free of specific pathogens（SPF） male SD rats（3 months old） were randomly divided into sham operation group，model group and TMS group，with 10 rats in each group.TMS treatment was performed within 24 h after successful modeling.Longa score was used to evaluate the degree of neurological impairment in 3 groups.The infarct area was measured by 2，3，5-triphenyltetrazolium chloride（TTC） staining.Apoptosis was detected by dUTP notch end labeling（TUNEL） mediated by terminal deoxynucleotide transferase.The protein expression of MCL-1 was detected by Western Blot.The mRNA expression of MCL-1 was detected by reverse transcription real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction（RT-PCR）.Results：The nerve function deficit score and cerebral infarction area of rats in the sham operation group were less than those in the TMS group and model group，and the nerve function deficit score and cerebral infarction area of rats in the TMS group were less than those in the model group（P＜0.05）.The apoptosis index of the sham operation group was less than that of the TMS group and model group，and that of TMS group was less than that of model group（P＜0.05）.The expression of MCL-1mRNA in the sham operation group was more than that in the TMS group and model group，and the expression of MCL-1mRNA in the TMS group was more than that in the model group（P＜0.05）.The levels of MCL-1 protein in the sham operation group were higher than that in the TMS group and model group，and the level of MCL-1 protein in the TMS group was higher than that in the model group（P＜0.05）.Conclusion：TMS could reduce cell apoptosis and inhibit brain tissue injury in MCAO rats by increasing the expression of MCL-1mRNA.

Keywords" middle cerebral artery occlusion; brain tissue injury; myelocytic leukemia sequence 1; transcranial magnetic stimulation; rats; experimental study

基金項(xiàng)目" 海南省衛(wèi)生健康行業(yè)科研項(xiàng)目（No.21A200319）

作者單位" 1.海南西部中心醫(yī)院（海南儋州" 571700）；2.東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院

通訊作者" 陳克尚，E-mail：65172988@qq.com

引用信息" 王佳敏，陳克尚，吳迪，等.基于MCL-1mRNA表達(dá)探討經(jīng)顱磁刺激對(duì)大腦中動(dòng)脈阻塞模型大鼠腦組織損傷的作用機(jī)制［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（22）：4121-4125.

大腦中動(dòng)脈阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）誘發(fā)的局部腦組織灌注缺血是腦梗死的常見(jiàn)病因，一旦發(fā)病可加重腦組織損傷，表現(xiàn)為偏癱、感覺(jué)障礙等嚴(yán)重臨床癥狀，且病人死亡風(fēng)險(xiǎn)極高［1-3］。1985年，經(jīng)顱磁刺激（transcranial magnetic stimulation，TMS）成功應(yīng)用于人體，逐漸成為臨床常用的神經(jīng)電生理刺激治療技術(shù)，是基于法拉第電磁感應(yīng)定律，應(yīng)用脈沖磁場(chǎng)改變中樞神經(jīng)系統(tǒng)及膜電位，促使其產(chǎn)生感應(yīng)電流，繼而影響腦內(nèi)代謝及神經(jīng)電活動(dòng)，該技術(shù)對(duì)MCAO等缺血性腦損傷疾病有顯著的神經(jīng)保護(hù)功效［4-6］。但TMS治療途徑及具體機(jī)制有待進(jìn)一步明確。

骨髓細(xì)胞白血病序列1（myeloid cell leukemia sequence 1，MCL-1）對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育有重要影響，參與促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的存活機(jī)制［7-8］。陸玉熊等［9］研究報(bào)道，高壓氧治療通過(guò)干預(yù)MCL-1表達(dá)介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，防止腦組織損傷。目前臨床關(guān)于TMS對(duì)MCAO模型大鼠腦組織損傷的機(jī)制尚未規(guī)范統(tǒng)一，尤其是基于MCL-1mRNA表達(dá)的影響機(jī)制仍有待進(jìn)一步論證。本研究基于MCL-1mRNA表達(dá)探討TMS對(duì)MCAO模型大鼠腦組織損傷的作用機(jī)制，以期為今后臨床研究提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1" 材料與方法

1.1" 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康雄性無(wú)特定病原體（SPF）級(jí)SD大鼠30只（3月齡），體質(zhì)量200～300 g，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供［實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證：SCXK（滬）2003-0003］。大鼠飼養(yǎng)環(huán)境：溫度25 ℃，濕度50%，光亮/黑暗各12 h交替培養(yǎng)，自由飲水?dāng)z食。所有動(dòng)物均分籠適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d（5只為一籠），之后用于實(shí)驗(yàn)。本研究經(jīng)動(dòng)物倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)（批準(zhǔn)編號(hào)：2022-0010）。

1.2" 方法

1.2.1" 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器

MCAO栓線購(gòu)自北京西濃科技有限公司；TMS儀購(gòu)自武漢依瑞德醫(yī)療設(shè)備新技術(shù)有限公司；大鼠固定器購(gòu)自重慶奧怡生物科技有限公司；2，3，5-三苯基氯化四氮唑（2，3，5-triphenyltetrazolium chloride，TTC）購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；10%水合氯醛購(gòu)自成都泰盟公司；磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer，PBS）；TRIzol試劑購(gòu)自美國(guó)ThermoFisher公司；MCL-1抗體購(gòu)自美國(guó)Bcam公司；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量試劑盒購(gòu)自Thermo公司；蛋白免疫印記法（Western Blot）試劑購(gòu)自武漢塞維爾生物科技有限公司；放射免疫沉淀法（radio immunoprecipitation assay，RIPA）蛋白抽提裂解液購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司；末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（terminal-deoxynucleotidyltransferase mediated nick end labeling，TUNEL）試劑盒購(gòu)自德國(guó)Roche公司；MCL-1引物合成由上海生工公司完成；逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-PCR）儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司；蛋白電泳裝置及轉(zhuǎn)移系統(tǒng)購(gòu)自Bio-rad公司；鉻菁R（ECR）顯色系統(tǒng)購(gòu)自Gene公司；BI-2000圖像分析系統(tǒng)購(gòu)自泰盟科技；全自動(dòng)數(shù)碼凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自天能公司；臺(tái)式高速離心機(jī)購(gòu)自上海精密儀器儀表公司。

1.2.2" 動(dòng)物分組

采用隨機(jī)數(shù)字表法將30只大鼠分為假手術(shù)組、模型組和TMS組，各10只。假手術(shù)組正常飼養(yǎng)，除不將栓線插入頸內(nèi)動(dòng)脈進(jìn)行左側(cè)腦缺血再灌注操作外，其余操作與模型組、TMS組相同；模型組、TMS組均進(jìn)行MCAO造模，模型組建模成功后給予常規(guī)飼養(yǎng)，TMS組建模成功后24 h內(nèi)進(jìn)行TMS治療。

1.2.3" MCAO大鼠模型制備

參照相關(guān)文獻(xiàn)［10］：采用栓線法造成左側(cè)腦缺血90 min再灌注，選擇4.0尼龍線（0.28 mm）制備栓線，應(yīng)用10%的水合氯醛（0.30 mL/100 g）腹腔注射麻醉，以大鼠停止自主活動(dòng)且肌肉松弛為宜。將大鼠體位調(diào)整為仰臥位并固定，于頸部右側(cè)正中切開(kāi)皮膚及其皮下筋膜，鈍性分離胸鎖乳突肌、胸骨舌骨肌，充分暴露迷走神經(jīng)，再分離頸外、頸內(nèi)動(dòng)脈血管，應(yīng)用非吸收線（距頸外動(dòng)脈遠(yuǎn)心端約為5 mm）進(jìn)行結(jié)扎，于頸內(nèi)外分叉處頸外支進(jìn)行打結(jié)，剪斷頸外動(dòng)脈，插入栓線，經(jīng)頸內(nèi)側(cè)支血管進(jìn)入大腦中動(dòng)脈，插入深度為（18.43±0.25）mm，此時(shí)結(jié)扎止血，剪除導(dǎo)線，固定血管內(nèi)栓線，縫合創(chuàng)口，等待大鼠蘇醒。蘇醒后應(yīng)用Longa評(píng)分評(píng)估神經(jīng)功能缺損程度，總分0～4分，0分表示無(wú)癥狀，4分表示無(wú)法自發(fā)行走且出現(xiàn)意識(shí)喪失，1～3分即造模構(gòu)造成功，可進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)，1.5 h后再次麻醉大鼠，并完成栓線拔除。

1.2.4" 大鼠干預(yù)處理

TMS組在建模成功后24 h內(nèi)進(jìn)行TMS治療，將大鼠預(yù)先置于固定器固定適應(yīng)，固定處于清醒狀態(tài)的大鼠，參數(shù)：實(shí)驗(yàn)線圈（直徑約為6 cm），中心磁場(chǎng)強(qiáng)度3.5 T，頻率參數(shù)100 Hz，刺激頻率10 Hz，選擇左側(cè)腦半球?yàn)榇碳げ课唬瑫r(shí)間2 s（間歇5 s）。其余大鼠均不給予干預(yù)。

1.3" 觀察指標(biāo)

1.3.1" 神經(jīng)功能缺損評(píng)分

于成功建模16 d后，應(yīng)用Longa評(píng)分評(píng)定神經(jīng)功能，Longa評(píng)分越高提示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。

1.3.2" 腦梗死面積的測(cè)量

大鼠麻醉后取俯臥位固定，取出腦組織進(jìn)行冠狀切片（厚度約為2 mm，5片）置2%紅四氮唑溶液中進(jìn)行染色（37 ℃避光），5 h后翻動(dòng)組織塊，10 h后取出該組織，并進(jìn)行拍照保存。采用BI-2000圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行閱片分析，腦梗死區(qū)域呈白色，正常腦組織呈紅色，計(jì)算各組大鼠腦梗死體積百分比（梗死體積與非梗死體積比值）。

1.3.3" TUNEL染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡

取前囟后3～6 mm處腦組織進(jìn)行冰凍切片，于室溫條件下應(yīng)用蛋白酶K孵育30min，應(yīng)用PBS洗滌5 min×3次；應(yīng)用3%過(guò)氧化氫（H2O2）孵育7 min，再次進(jìn)行PBS洗滌（5 min×3次）。加入TUNEL反應(yīng)混合液，于室溫條件下溫育1h，再次進(jìn)行PBS洗滌（5 min×3次）；應(yīng)用3%H2O2甲醇液于室溫狀態(tài)下阻斷10 min；再溫育90 min；加過(guò)氧化物酶轉(zhuǎn)化劑，于室溫狀態(tài)下溫育30 min，再次進(jìn)行PBS洗滌（5 min×3次）；二氨基聯(lián)苯胺（DAB）/H2O2顯色，蘇木素復(fù)染，進(jìn)行常規(guī)脫水，透明，中性樹(shù)膠封固。在200倍視野下隨機(jī)選取5個(gè)缺血半暗帶視野進(jìn)行雙盲計(jì)數(shù)，平均數(shù)即為陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)。

1.3.4" Western Blot檢測(cè)MCL-1蛋白表達(dá)水平

大鼠麻醉后，于冰上分離腦組織，在液氮下保存，提取大腦皮質(zhì)梗死邊緣區(qū)組織蛋白。應(yīng)用預(yù)冷的PBS溶液進(jìn)行洗滌，連續(xù)3次，剪碎組織后加入適量組織裂解液，并進(jìn)行離心操作（離心速度12 000 r/min，4 ℃，10 min），取上層血清，BCA蛋白試劑盒檢測(cè)蛋白濃度。應(yīng)用12%丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳分離，并將其轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上，加脫脂奶粉進(jìn)行封膜，持續(xù)4 h，加入MCL-1一抗（1∶1 000），4 ℃下孵育過(guò)夜，應(yīng)用PBS溶液洗滌3次（每次10 min），加入二抗（1∶3 000）室溫狀態(tài)下孵育30 min，再次洗膜。加入電化學(xué)發(fā)光（ECL）顯色，以GAPDH作為內(nèi)參，采用膠成像系統(tǒng)檢測(cè)灰度值，檢測(cè)MCL-1蛋白表達(dá)水平。

1.3.5" RT-PCR法檢測(cè)MCL-1mRNA表達(dá)水平

采用TRIzol試劑提取大腦皮質(zhì)梗死邊緣區(qū)組織RNA，應(yīng)用OD260/OD280 分光光度法進(jìn)行RNA定量檢測(cè)。20μL的PCR體系∶構(gòu)成1 μL逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物（1∶5）＋0.5 μL有義引物＋0.5 μL通用逆轉(zhuǎn)錄引物＋10 μL混合緩沖液，加入雙蒸水至20 μL，于特定反應(yīng)條件下進(jìn)行（94 ℃ 3 min，94 ℃、58 ℃循環(huán)20 s，40次，72 ℃ 20 s），各反應(yīng)循環(huán)3次，應(yīng)用天能凝膠成像系統(tǒng)分析目的條帶亮度，計(jì)算目的基因相對(duì)表達(dá)量2－△△Ct。

1.4" 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布和方差齊性的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用單因素方差分析、SNK-q檢驗(yàn)及重復(fù)測(cè)量方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2" 結(jié)" 果

2.1" 3組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分及腦梗死面積比較

3組神經(jīng)功能缺損評(píng)分及腦梗死面積比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；假手術(shù)組神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積均低于TMS組、模型組，TMS組神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積均低于模型組（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

2.2" TMS對(duì)MCAO大鼠細(xì)胞凋亡的影響

假手術(shù)組、模型組、TMS組細(xì)胞凋亡指數(shù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；假手術(shù)組細(xì)胞凋亡指數(shù)為（2.45±0.32）%，低于TMS組的（15.38±3.28）%及模型組的（24.77±4.35）%，TMS組細(xì)胞凋亡指數(shù)低于模型組（P＜0.05）。細(xì)胞凋亡染色圖見(jiàn)圖1。

2.3" 3組大鼠MCL-1mRNA及蛋白表達(dá)水平比較

假手術(shù)組大鼠MCL-1mRNA高于TMS組、模型組大鼠，TMS組MCL-1mRNA高于模型組（P＜0.05）；假手術(shù)組大鼠MCL-1蛋白表達(dá)水平高于TMS組、模型組大鼠，TMS組MCL-1蛋白表達(dá)水平高于模型組（P＜0.05）。詳見(jiàn)表2、圖2。

3" 討" 論

MCAO后將導(dǎo)致側(cè)支循環(huán)代償變差，激發(fā)氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)元凋亡壞死等持續(xù)性病理生理變化，加重腦組織損傷，產(chǎn)生不良預(yù)后結(jié)局［11］。如何減輕MCAO后腦組織損傷，促使病人病理轉(zhuǎn)歸是臨床研究的重要課題［12］。TMS是通過(guò)一定頻率及強(qiáng)度的磁脈沖刺激，直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，調(diào)控腦損傷核心區(qū)域及靶區(qū)存在功能連接的區(qū)域，激活突觸可塑性，改善皮層興奮性，重建皮層功能［13-14］。有研究報(bào)道，TMS通過(guò)促進(jìn)核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）信號(hào)通路的激活，作用于抗氧化蛋白（如血紅素加氧酶-1和超氧化物歧化酶1）表達(dá)，減少氧化應(yīng)激損傷，并對(duì)腦組織發(fā)揮保護(hù)作用［15］。戈蕾等［16］研究報(bào)道，TMS通過(guò)參與蛋白激酶A（PKA）/環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）信號(hào)通路發(fā)揮改善神經(jīng)功能的作用。研究治療策略的具體機(jī)制對(duì)尋找治療靶點(diǎn)具有重要的臨床意義［17-18］。目前關(guān)于TMS對(duì)模型大鼠腦組織損傷具體影響機(jī)制尚未明確，有待更多研究進(jìn)行證實(shí)。

MCL-1屬于抗凋亡蛋白，在促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤（MM）、急性髓系白血?。ˋML）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）、惡性腫瘤等疾病的細(xì)胞存活方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用［19-20］。相關(guān)研究顯示，MCL-1通過(guò)線粒體途徑發(fā)揮抗細(xì)胞凋亡及促進(jìn)細(xì)胞存活的功效，通過(guò)下調(diào)MCL-1表達(dá)水平促進(jìn)缺血缺氧狀態(tài)神經(jīng)細(xì)胞凋亡［21］。另有研究報(bào)道，MCL-1水平在腦膠質(zhì)瘤的中均有表達(dá)，可用于評(píng)估診斷腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展［22］。有研究顯示，MCL-1在多巴胺能神經(jīng)元損失和運(yùn)動(dòng)障礙中具有重要作用［23］。

基于上述研究結(jié)果，MCAO為常見(jiàn)的缺血缺氧腦損傷疾病，TMS通過(guò)影響某特定因子或機(jī)制參與MCAO的治療。MCL-1參與了腦損傷疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程，對(duì)缺血缺氧狀態(tài)下神經(jīng)細(xì)胞凋亡有重要影響，TMS可能通過(guò)影響MCL-1進(jìn)而治療MCAO疾病。本研究將MCAO模型大鼠分為3組（假手術(shù)組、模型組、TMS組），并觀察不同處理方法對(duì)MCAO模型大鼠腦組織損傷的直接影響，結(jié)果顯示，TMS組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積均低于模型組（P＜0.05）。提示TMS治療可促進(jìn)神經(jīng)功能缺損恢復(fù)，減小腦梗死面積。分析原因可能與神經(jīng)系統(tǒng)可塑性為TMS調(diào)控提供了治療依據(jù)有關(guān)；TMS治療是通過(guò)脈沖磁場(chǎng)刺激大腦，繼而對(duì)神經(jīng)突觸的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)及長(zhǎng)時(shí)程抑制產(chǎn)生影響，實(shí)現(xiàn)不同腦區(qū)功能興奮及抑制調(diào)控作用，加速神經(jīng)功能缺損康復(fù)，改善大腦功能及病理狀態(tài)。本研究從細(xì)胞層面分析不同處理方法對(duì)MCAO模型大鼠腦組織損傷的影響，結(jié)果顯示，TMS組細(xì)胞凋亡指數(shù)低于模型組（P＜0.05），說(shuō)明TMS治療可減少細(xì)胞凋亡。進(jìn)一步證實(shí)TMS治療可能通過(guò)影響細(xì)胞凋亡水平，繼而減輕腦組織損傷。本研究觀察對(duì)具體靶點(diǎn)（MCL-1蛋白及mRNA）的影響，以明確TMS治療的影響機(jī)制。結(jié)果顯示，TMS組MCL-1mRNA、蛋白表達(dá)高于模型組（P＜0.05）。說(shuō)明TMS治療通過(guò)上調(diào)MCL-1蛋白及mRNA表達(dá)，有效抑制細(xì)胞凋亡，證實(shí)了MCL-1可作為TMS治療的重要干預(yù)靶點(diǎn)。MCL-1與MCAO大鼠腦組織損傷發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān)，腦組織損傷后，機(jī)體出現(xiàn)MCL-1對(duì)抗損傷。TMS治療通過(guò)影響MCL-1途徑，干預(yù)其介導(dǎo)的信號(hào)通路，抑制細(xì)胞凋亡［24-25］，繼而對(duì)腦組織及細(xì)胞損傷機(jī)制產(chǎn)生影響。

本研究為TMS抑制MCAO大鼠腦組織損傷效果提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，影響MCL-1表達(dá)發(fā)揮理想治療效果。綜上所述，TMS通過(guò)升高M(jìn)CL-1mRNA表達(dá)，減少細(xì)胞凋亡，減輕MCAO大鼠腦組織損傷。

參考文獻(xiàn)：

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（收稿日期：2023-04-03）

（本文編輯薛妮）