摘要:對遼寧地區(qū)某豬場發(fā)生的大規(guī)模豬病進行診斷和治療。通過對臨床癥狀、剖檢病理變化的觀察和總結(jié),結(jié)合實驗室熒光PCR技術(shù)、細菌分離培養(yǎng)、藥敏試驗等檢測結(jié)果,認為該場豬群的疾病為豬氣喘病和豬鏈球菌病混合感染。使用土霉素、青霉素聯(lián)合用藥,可較快治愈。
關(guān)鍵詞:豬氣喘?。回i鏈球菌?。粺晒釶CR;藥敏試驗;混合感染
1 豬場發(fā)病情況
1.1 豬場概況
遼寧地區(qū)某豬場為家庭農(nóng)場式飼養(yǎng)模式,該場豬舍共計2棟,以混凝土、鋼結(jié)構(gòu),覆蓋聚乙烯薄膜形式建筑。地理位置遠離居民區(qū)和交通要道,海拔較高且具有天然屏障。主要飼養(yǎng)肥育豬只。
1.2 流行病學調(diào)查
該場原有80日齡肥育豬240余頭,當年11月初由外地購入相近日齡豬只30余頭。原有豬只和新進豬只均已注射口蹄疫、豬瘟、豬圓環(huán)病毒病疫苗。2023年12月初,該場豬只陸續(xù)發(fā)病,3 d內(nèi)蔓延至全場,70%以上存欄豬只出現(xiàn)不同程度的發(fā)病表現(xiàn),體質(zhì)較弱、生長較慢豬只陸續(xù)出現(xiàn)死亡,死亡率約為5%。
1.3 臨床癥狀
發(fā)病豬只精神委頓、廢食、喜飲水,呼吸短頻、喘,嚴重者呈犬坐式;部分病豬出現(xiàn)跛行和不同程度的肘、膝關(guān)節(jié)腫大;癥狀較輕的豬只體溫幾乎正常,癥狀較重的病豬體溫為40~41.5 ℃左右。
1.4 剖檢病理變化
對病死豬只進行剖檢,可見肺部腫大、實質(zhì)化;下頜淋巴結(jié)、縱膈淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)腫大,切面外翻;心肌有不同程度的水腫;脾、腎腫大,出血,心包和胸腔有纖維性炎性滲出物;腫大的關(guān)節(jié)腔內(nèi)有膠凍樣黏液。
根據(jù)病豬的臨床癥狀,結(jié)合剖檢的病理變化,懷疑此次豬群發(fā)生的疾病可能是豬藍耳病、豬瘟、豬支原體肺炎、非洲豬瘟,并繼發(fā)細菌性感染。
2 實驗室檢測
2.1 主要材料
1)病料采集。利用手術(shù)器械,采集病死豬的肺組織、淋巴結(jié)和呼吸道內(nèi)容物;在無菌環(huán)境下,用棉拭子分別采集病死豬只的心包和胸腔的炎性滲出物、關(guān)節(jié)腔內(nèi)黏液,送往實驗室-20 ℃冷凍保存。
2)主要設備儀器:全自動核酸提取儀(上海志昂生物有限公司)、實時定量熒光PCR儀(Roche)、生化培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠)、高速冷凍離心機(北京路科順高新技術(shù)有限公司)。
3)主要檢測試劑:通用病毒核酸提取試劑盒購自濟凡生物科技(北京)有限公司,支原體熒光PCR檢測試劑盒購自北京森康生物技術(shù)開發(fā)有限公司,豬瘟病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司,豬藍耳病熒光RT-PCR檢測試劑盒購自賽諾利康生物技術(shù)(北京)有限公司,非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒購自北京明日達科技發(fā)展有限責任公司,血平板(成品培養(yǎng)基)購自廣東環(huán)凱生物科技有限公司。
2.2檢測方法
1)分子生物學檢測。根據(jù)檢測試劑和儀器設備使用說明書,采用熒光PCR技術(shù),對豬藍耳病、豬瘟、豬支原體肺炎、非洲豬瘟進行檢測。
2)病原菌分離鑒定。采用馬鮮血瓊脂培養(yǎng)皿和細菌劃線分離培養(yǎng)技術(shù),篩選疑似致病菌。將采集的樣品,涂抹在鮮血瓊脂培養(yǎng)皿中,觀察是否存在溶血菌落;通過細菌劃線培養(yǎng),將溶血菌落純化;通過革蘭氏染色和鏡下檢查初步判定細菌種屬。對疑似病原菌進行藥敏試驗,選用敏感度高的藥物進行治療。
2.3結(jié)果與分析
1)分子生物學檢測結(jié)果。檢測結(jié)果顯示,三類樣品中豬瘟病毒、豬藍耳病病毒和非洲豬瘟病毒均為陰性,支原體均為陽性(詳見圖1)。據(jù)此可判定,引起本次豬群發(fā)病的主要病原為支原體。
2)病原菌分離鑒定結(jié)果。馬鮮血瓊脂培養(yǎng)皿培養(yǎng)結(jié)果顯示,三類樣品中均各存在一種β溶血菌落,將各溶血菌落細菌純化后染色鏡檢,發(fā)現(xiàn)均為革蘭氏陽性鏈狀球菌。藥敏試驗顯示,該細菌對青霉素極為敏感。
3)病原菌藥敏試驗結(jié)果。結(jié)果顯示,在三類樣品中分離出的鏈球菌對土霉素和青霉素表現(xiàn)極敏,對恩諾沙星表現(xiàn)為高敏,對阿莫西林和萬古霉素表現(xiàn)為中敏,對林可霉素不敏(詳見表1)。
通過實驗室檢測結(jié)果,可初步判定本病為支原體和鏈球菌引起的,豬支原體肺炎和豬鏈球菌病混合感染。
3 臨床治療試驗
3.1 豬場消毒
使用2%氫氧化鈉(NaOH)熱溶液對全場的走廊、過道、豬舍墻壁進行噴灑消毒;用稀釋后的過硫酸氫鉀(KHSO5)噴灑圈舍欄桿、地面、食槽及豬體進行帶豬消毒,每2 d進行一次。
3.2 藥物治療
1)藥物選用。根據(jù)實驗室檢測結(jié)果和藥敏試驗結(jié)果,遵循聯(lián)合用藥的原則,以土霉素和青霉素對本病進行治療。具體用法為:鹽酸土霉素注射液,35 mg/kg·bw,肌內(nèi)注射,1次/d[1];肌內(nèi)注射青霉素3萬IU/kg·bw,2次/d[2]。同時,按照500 g/m3水的比例,在飲水中添加70%黃芪多糖可溶性粉,以增強病豬抵抗力。
2)治療結(jié)果。治療2 d后,病豬癥狀明顯減輕,采食量有所增長,日死亡量大幅下降;連續(xù)治療5 d后,已無病豬死亡,癥狀較輕豬只基本恢復正常;連續(xù)用于8 d后,所有豬只基本痊愈,僅余11只嚴重病例,仍有跛行、萎靡、食欲下降等較輕癥狀,需進一步治療。
4 討論
4.1 豬氣喘病的防治措施
豬氣喘病,又稱豬支原體肺炎,是由豬肺炎支原體引起的一種傳染迅速、病程緩慢持久的豬傳染病,在任何季節(jié)均可發(fā)生,并且任何品種和年齡段的豬都可感染[3]。但本病的發(fā)生和傳播往往需要一定的誘導因素,如長途運輸所產(chǎn)生的應激反應、飼養(yǎng)密度大、環(huán)境密閉及空氣不流通等,本次豬群在發(fā)生疾病前,由于飼養(yǎng)管理不當,已滿足了發(fā)病的相應條件。因此,豬場尤其是小型豬場,在生豬養(yǎng)殖過程中,要加強飼養(yǎng)管理,方能預防本病。需要特別注意的是,豬場一旦發(fā)生本病,很難徹底清除環(huán)境中隱藏的豬肺炎支原體,所以本病容易在同個養(yǎng)殖區(qū)域反復發(fā)生,因此,及時接種疫苗便成為預防本病的關(guān)鍵。曹蕊[4]在研究中認為,針對養(yǎng)殖場的實際情況和地方流行病學選擇適合的疫苗,可有效預防本病;胡少鵬[5]認為做好疫苗接種是防控豬氣喘病的關(guān)鍵措施,及時接種疫苗能幫助生豬獲得抗體,防止疫病發(fā)生。由于豬氣喘病發(fā)展緩慢、病程長,因此本病的根治較為困難。陳國才[6]認為,中藥治療豬氣喘病可以在一定程度上增強生豬的免疫力,降低病原菌的耐藥性,這些優(yōu)勢是抗生素不可替代的。張明[7]研究發(fā)現(xiàn),將中西醫(yī)手段有效結(jié)合治療豬氣喘病能夠達到協(xié)同兼治的效果,同時也能夠縮短治療周期,提高治愈率。
4.2 豬鏈球菌病的防治措施
豬鏈球菌被認為是給養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟損失的細菌性病原體之一,隨著世界范圍內(nèi)預防性抗菌劑的使用逐漸減少,豬鏈球菌病的發(fā)病率呈上升趨勢[8]。由此可見,在發(fā)生疾病后,快速有效地選擇治療方案,變得尤為重要。石元軍[8]等認為,豬鏈球菌病可使用抗生素來治療,但由于鏈球菌容易產(chǎn)生耐藥性,因此要先進行藥敏試驗,再選用藥物。本研究中,豬鏈球菌的發(fā)生,是由于豬場的飼養(yǎng)管理混亂——飼養(yǎng)密度大、新進豬只直接混群、豬舍密閉,所引起的,因此,從飼養(yǎng)管理層面來預防豬鏈球菌病。除此之外,本次豬群疾病中,發(fā)病豬只的豬氣喘病癥狀較重,表現(xiàn)明顯,而豬鏈球菌病則僅在瀕死豬只中病變清晰,筆者懷疑本次發(fā)生的豬鏈球菌病是繼發(fā)于豬氣喘病。由此可見,當豬群發(fā)生疾病時,緊急消毒處理,對預防繼發(fā)感染尤為重要。
4.3 基層分子生物學技術(shù)的推廣與應用
近年來,隨著我國農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展,各農(nóng)業(yè)院校培養(yǎng)的高素質(zhì)獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)人才越來越多,尤其是我國發(fā)生非洲豬瘟疫情后,國家動物疫病監(jiān)督防控機構(gòu),在畜禽養(yǎng)殖量較大縣區(qū)增設了分子生物學實驗室。這些實驗室在建設過程中,加大了資金投入,采購了較為先進的檢測設備,招聘了大量專業(yè)人才,完全可以對常見動物疫病作出專業(yè)診斷。但是,所建成的分子生物學實驗室僅承擔非洲豬瘟、禽流感等重大動物疫病的監(jiān)測檢測工作,如果能夠進一步推廣使用,承擔起常見動物疾病的分子生物學檢測工作,對合理使用藥物、降低養(yǎng)殖成本、減少耐藥菌株的產(chǎn)生等養(yǎng)殖問題具有重要意義。然而,如何協(xié)調(diào)好成本增加和解決問題之間的關(guān)系,則需要國家相關(guān)部門慎重考慮,出臺一系列的法律法規(guī),使之逐步完善,進而使分子生物學技術(shù)推廣、應用到養(yǎng)殖一線。
5 結(jié)論
通過臨床癥狀分析、病死豬解剖檢查和實驗室技術(shù)檢測,認為引起本次豬群發(fā)病的疾病為豬氣喘病和豬鏈球菌病的混合感染。通過藥敏試驗,結(jié)合病原菌特性,使用青霉素和土霉素治療可快速達到治療目的。
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