［摘要］ 肝纖維化（HF） 是一種臨床上較為常見的肝臟受損后的病理性修復(fù)反應(yīng)，是慢性肝病轉(zhuǎn)向肝硬化的核心環(huán)節(jié)。HF 發(fā)病的分子機(jī)制復(fù)雜，肝臟受損引起多種細(xì)胞釋放一系列細(xì)胞因子，進(jìn)而啟動(dòng)下游通路進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，活化肝星狀細(xì)胞（HSCs） 并使其向肌成纖維細(xì)胞（MFBs） 轉(zhuǎn)化。MFBs可釋放大量細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），進(jìn)而破壞肝臟正常結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致HF 的發(fā)生發(fā)展。HF 相關(guān)治療靶點(diǎn)仍處于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，尚未應(yīng)用于臨床?，F(xiàn)對(duì)HF 發(fā)病機(jī)制中HSCs 和ECM 所涉及的信號(hào)通路及相應(yīng)因子，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β （TGF-β） /Smad 相關(guān)信號(hào)通路、血小板衍生生長(zhǎng)因子（PDGF）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）、金屬蛋白酶組織抑制因子（TIMPs） 和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF） 等進(jìn)行綜述，分析相關(guān)的治療靶點(diǎn)，為治療HF 的新藥研發(fā)提供理論依據(jù)。

［關(guān)鍵詞］ 肝纖維化； 肝星狀細(xì)胞； 細(xì)胞外基質(zhì)； 分子機(jī)制； 治療靶點(diǎn)

［中圖分類號(hào)］ R575. 2 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

肝纖維化（hepatic fibrosis， HF） 是多種復(fù)雜因素如炎癥刺激、病毒感染、酒精中毒、肝毒性藥物、膽汁淤積和自身免疫損傷等引起的慢性肝損傷過程中肝細(xì)胞反復(fù)損傷破壞后再生所致，肝內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）（主要是交聯(lián)的Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白） 彌漫性過度積累和分布異常，肝臟結(jié)締組織異常增生致病理性修復(fù)。若不加以干預(yù)，HF 可進(jìn)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌，成為慢性肝病患者死亡的主要原因。全世界每年死于肝硬化和肝細(xì)胞癌的患者已超過100 萬例［1］，且呈上升趨勢(shì)。HF 對(duì)于人類健康威脅日益增大，但由于HF 病因復(fù)雜、發(fā)病機(jī)制尚未明確，其治療效果不理想。目前國(guó)內(nèi)外HF 治療手段以病因治療、護(hù)肝和中藥輔助治療為主［2］。對(duì)于肝炎病毒感染如乙型肝炎和丙型肝炎引起的HF，通過高效的抗病毒治療可以預(yù)防其進(jìn)展或甚至誘導(dǎo)逆轉(zhuǎn)，但是對(duì)于大多數(shù)晚期酒精性或非酒精性脂肪性肝炎、遺傳性或自身免疫性肝病所致的HF，療效難以達(dá)到預(yù)期。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的不斷成熟和發(fā)展，對(duì)HF發(fā)病機(jī)制和病理生理的認(rèn)識(shí)逐漸深入。現(xiàn)對(duì)近年來有關(guān)肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cells， HSCs） 與ECM 引起HF 的分子機(jī)制及其治療靶點(diǎn)研究進(jìn)行綜述，為HF 靶向藥物研發(fā)提供新的思路。

1 HF 發(fā)病的分子機(jī)制

1. 1 HSCs的活化和增殖

HSCs 占肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的1/3 和肝內(nèi)常駐細(xì)胞總數(shù)的5%～10% ［3］?；罨腍SCs 是最關(guān)鍵的纖維化效應(yīng)細(xì)胞［4］。肝細(xì)胞、庫(kù)普弗細(xì)胞（Kupffer cells， KCs）、 肝 竇 內(nèi) 皮 細(xì) 胞（liversinusoidal endothelial cells，LSECs） 和血小板等在肝臟損傷后可分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β （transforminggrowth factor-beta，TGF-β）、血小板衍生生長(zhǎng)因子（platelet-derived growth factor， PDGF） 和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（connective tissue growth factor，CTGF） 等一系列細(xì)胞因子，使下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活，繼而在HSCs 核中通過上調(diào)促纖維化基因轉(zhuǎn)錄，使HSCs 向具有收縮、增殖及分泌功能的肌成 纖 維 細(xì) 胞（myofibroblasts， MFBs） 轉(zhuǎn) 變。MFBs 活化后可釋放大量ECM 如α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smooth muscle actin， α-SMA） 及Ⅰ 型和Ⅲ型膠原纖維等， 促進(jìn)金屬蛋白酶組織抑制因子（tissue inhibitors of metallo proteinases，TIMPs） 的表 達(dá)， 抑 制 基 質(zhì) 金 屬 蛋 白 酶（matrix metalloproteinase， MMPs） 活性， 使ECM 過度累積并沉積于肝纖維間隙，使間隙增寬，導(dǎo)致肝小葉正常結(jié)構(gòu)破壞， 假小葉形成， 肝臟失去正常功能［5］。因此，HSCs 活化和增殖過程中所涉及的相關(guān)分子均有可能成為HF 分子治療的潛在靶點(diǎn)。

1. 1. 1 TGF-β1 TGF-β1 是一種通過自分泌和旁分泌調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、遷移或凋亡的細(xì)胞因子。肝臟中多種實(shí)質(zhì)細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞如肝細(xì)胞、HSCs、KCs 和LSECs 等均可分泌產(chǎn)生TGF- β1。當(dāng)肝臟受損后， 肝組織中TGF-β1 表達(dá)水平升高，通過與HSCs 表面TGF- β1 受體結(jié)合， 激活母親DPP 同源物（mothers against DPP homolog，Smad） 2/3 并使之發(fā)生磷酸化，繼而使Smad2/3 構(gòu)型發(fā)生變化， 與Smad4 結(jié)合形成復(fù)合物， 轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核中， 從而調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)， 產(chǎn)生大量膠原，使ECM 合成過多引起HF［6］。Smad7 在TGF-β1所介導(dǎo)的纖維化中起到負(fù)調(diào)節(jié)作用［7］。TGF-β1 還可以下調(diào)MMPs 活性， 增加TIMPs 表達(dá)水平從而減少ECM 降解，進(jìn)一步促進(jìn)纖維化進(jìn)展。TGF-β1是迄今為止作用最強(qiáng)的促HF 因子［8］，在HF 的發(fā)病中起關(guān)鍵作用。

1. 1. 2 PDGF 及其受體 PDGF 是一種由4 種類型的亞基PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C 和PDGF-D通過二硫鍵連接而成的同源或異源二聚體， 包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC和PDGF-DD。血小板衍生生長(zhǎng)因子受體（plateletderivedgrowth factor receptor， PDGFR） 是一種Ⅲ 型酪氨酸蛋白激酶受體家族的單鏈跨膜糖蛋白，在PDGF 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中起重要作用。當(dāng)PDGFR單體與對(duì)應(yīng)的配體結(jié)合后， 其內(nèi)部的2 種亞基PDGFRα 和PDGFRβ 可形成同源或異源二聚體PDGFRαα、PDGFRαβ 和PDGFRββ， 從而調(diào)控下游通路［9］。人體內(nèi)多種細(xì)胞均可產(chǎn)生并分泌PDGF， 包括肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞。在正常肝臟組織中， PDGF 及PDGFR 表達(dá)較低； 當(dāng)肝臟受損后，PDGF 可由激活的HSCs 和受損的內(nèi)皮細(xì)胞、血小板與巨噬細(xì)胞等大量合成和分泌，與HSCs 膜表面的PDGFR 結(jié)合， 激活Ras-絲裂原活化蛋白激酶（Ras-mitogen-activated protein kinase，Ras-MAPK）、磷脂酰肌醇3 激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K） 和磷脂酶Cγ （phospholipase C gamma，PLCγ） 等信號(hào)通路［10］， 促進(jìn)HSCs 增殖、分化，使ECM 過度沉積，導(dǎo)致HF 形成。

1. 2 ECM的生成增多和降解減少

1. 2. 1 MMPs 和TIMPs MMPs 是一組可降解ECM 的蛋白水解酶，在促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移、分化、凋亡、血管生成、組織修復(fù)和免疫反應(yīng)等方面發(fā)揮作用［11］。MMPs 可由促炎細(xì)胞和子宮胎盤細(xì)胞分泌，根據(jù)底物和結(jié)構(gòu)域可分為膠原酶（MMP-1、MMP-8、MMP-13 和MMP-18）、明膠酶（MMP-2和MMP-9）、間質(zhì)溶解酶（MMP-3、MMP-10 和MMP-11）、基質(zhì)溶解素（MMP-7 和MMP-26）、膜型MMPs （MMP-14、MMP-15 和MMP-16 等）和其他MMPs （MMP-12、MMP-19 和MMP-20等）。研究［12］ 顯示：MMP-1、MMP-2、MMP-3 和MMP-9 等幾種酶的活性與HF 的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)聯(lián)。TIMPs 是MMPs 家族的特異性抑制劑， 合成和分泌TIMPs 的細(xì)胞與產(chǎn)生MMPs 的細(xì)胞一致，且對(duì)大多數(shù)MMPs 均有負(fù)性調(diào)控作用。TIMPs 可與活化的MMPs 以1∶ 1 的比例形成特異復(fù)合物，從而降低MMPs 活性［13］。當(dāng)肝臟受損時(shí)，HSCs 可活化并大量表達(dá)TIMP-1， 使MMPs 活性降低，ECM 降解受到抑制，導(dǎo)致ECM 過量積累，從而導(dǎo)致HF。

1. 2. 2 CTGF CTGF 又稱細(xì)胞通信網(wǎng)絡(luò)因子2，是一種具有趨化和有絲分裂活性的富含半胱氨酸的分泌蛋白。CTGF 在多種組織器官中廣泛存在，由間充質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞如HSCs、肝細(xì)胞、MFBs和內(nèi)皮細(xì)胞等合成，多分泌至細(xì)胞微環(huán)境中，發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞增殖分化、遷移、血管生成和組織修復(fù)等作用［14］。當(dāng)肝臟受損后，作為TGF-β1 信號(hào)通路下游的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，CTGF 表達(dá)量增加，通過趨化作用促進(jìn)成纖維細(xì)胞有絲分裂，使成纖維細(xì)胞大量增殖并聚集，分泌過量ECM，導(dǎo)致HF發(fā)生發(fā)展。另外，CTGF 還可以通過下調(diào)MMPs 活性， 促進(jìn)纖溶酶激活物抑制因子和TIMPs 等蛋白酶抑制因子的表達(dá)，使ECM 生成進(jìn)一步增加［15-16］。

2 HF 相關(guān)治療靶點(diǎn)

2. 1 抑制HSCs的活化和增殖

2. 1. 1 TGF-β1 SUN 等［17］ 發(fā)現(xiàn)：采用阿司匹林處理經(jīng)硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA） 誘導(dǎo)的HF 模型大鼠肝組織中α -SMA、Ⅰ 型膠原蛋白、TGF-β1 和Smad2/3 表達(dá)水平降低，表明阿司匹林可能通過抑制TGF-β1/Smad 信號(hào)通路減少膠原產(chǎn)生， 從而減輕HF， 為阿司匹林預(yù)防和治療HF 及新藥開發(fā)提供了新的方向。研究［18］ 顯示：在四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl 4） 誘導(dǎo)的HF 模型小鼠中， 曲美他嗪可以抑制HSCs 增殖， 抑制ECM 蛋白和TGF-β/Smad 信號(hào)通路表達(dá)， 從而抑制HF 發(fā)生發(fā)展，該結(jié)果為HF 的治療提供了依據(jù)。XIANG 等［19］ 從茄科植物中分離出酸漿苦素（physalin D， PD）， 作用于CCl 4 和膽管結(jié)扎（bileduct ligation，BDL） 誘導(dǎo)的HF 小鼠模型，結(jié)果顯示： PD 通過抑制TGF- β/Smad 和Yes 相關(guān)蛋白（Yes-associated protein， YAP） 信號(hào)通路改善了HF，表明PD 具有治療HF 的潛力。然而，TGF-β的生物學(xué)功能多樣，致病途徑復(fù)雜，其受到抑制會(huì)引起機(jī)體許多不良反應(yīng)，且尚未從動(dòng)物研究成功轉(zhuǎn)化為臨床研究。

2. 1. 2 PDGF 及其受體 WANG 等［20］ 的研究顯示： 采用玫瑰毒素B 作用于BDL 誘導(dǎo)的膽汁淤積性HF 小鼠模型后， 玫瑰毒素B 通過破壞PDGF-BB/PDGFRββ 復(fù)合物組裝， 在體外和體內(nèi)阻斷PDGF-B/PDGFRβ途徑，抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的HSCs 活化、增殖和遷移，緩解BDL 引起的肝細(xì)胞損傷程度和膽汁淤積纖維化程度； 且PDGFRβ 可能是HF 中玫瑰毒素B 的直接靶蛋白。CHEN 等［21］采用胸腺素β4 （thymosin beta 4， Tβ4） 作用于經(jīng)BDL 誘導(dǎo)的膽汁淤積性HF 模型小鼠發(fā)現(xiàn)：Tβ4 下調(diào)了小鼠肝組織中PDGFRβ 表達(dá)水平， 緩解了BDL 誘導(dǎo)的膽汁淤積性HF。

2. 1. 3 大麻素受體（cannabinoid receptor，CB） CB 是一類存在于細(xì)胞膜或細(xì)胞中的G 蛋白偶聯(lián)受體。人體內(nèi)存在2 種大麻素受體CB1 和CB2。CB1 主要位于腦、脊髓與外周神經(jīng)系統(tǒng)中，又稱中樞型CB，其激活主要與精神活動(dòng)相關(guān)；CB2 主要在外周免疫器官中表達(dá)，又稱為外周型CB，通過調(diào)控免疫系統(tǒng)內(nèi)外的細(xì)胞因子釋放和免疫細(xì)胞遷移來發(fā)揮作用［22］。研究［23］顯示：正常肝組織中幾乎不表達(dá)CB。當(dāng)肝臟受損后，CB1 與CB2 表達(dá)開始上調(diào)， 但是兩者對(duì)纖維化的發(fā)生發(fā)展表現(xiàn)出相反作用，CB1 對(duì)纖維化有促進(jìn)作用，CB2 對(duì)纖維化有抑制作用，兩者以CB1 為主導(dǎo)。ZHANG 等［24］研究顯示：將CB1 拮抗劑AM251作用于從大鼠體內(nèi)分離培養(yǎng)后的HSCs，AM251 能夠明顯抑制細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular"regulated protein kinases， ERK） 和c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinases， JNK） 的磷酸化，減少HSCs 增殖， 從而抑制HF。姜黃素也可以通過抑制CB1 激動(dòng)劑和協(xié)同CB1 拮抗劑從而抑制HSCs 活化及增殖， 減少ECM 合成， 降低纖維化程度。LONG 等［25］ 通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：CB2 激動(dòng)劑AM1241 可以降低TGF-β1 誘導(dǎo)的HSC-T6 細(xì)胞增殖和活化程度，并促進(jìn)其凋亡，從而抑制HF。

2. 1. 4 法尼醇X 受體（farnesoid X receptor，F(xiàn)XR） FXR 是一種屬于激素核受體超家族的配體激活轉(zhuǎn)錄因子，在肝臟、腸道和腎臟等組織中均表達(dá)，主要生理功能是保持膽汁酸和膽固醇之間的穩(wěn)定，調(diào)控膽汁酸合成和運(yùn)輸相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，同時(shí)在葡萄糖代謝、甘油三酯代謝、炎癥和凝血等方面也發(fā)揮重要作用［26］。研究［27］ 顯示：FXR 被激活后可誘導(dǎo)小異二聚體伴侶受體和HSCs 中過氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferator-activitedreceptor，PPAR） γ 的表達(dá)，從而下調(diào)HSCs 對(duì)促纖維化介質(zhì)的反應(yīng)和炎癥介質(zhì)的表達(dá)，減少ECM 產(chǎn)生，增加ECM 降解，進(jìn)而抑制HF 發(fā)生發(fā)展。FAN 等［28］ 證實(shí)了奧貝膽酸可以通過FXR 和Smad3 之間的相互作用來預(yù)防經(jīng)CCl 4 誘導(dǎo)的HF，且FXR 激動(dòng)劑奧貝膽酸已進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)，有望成為臨床上新的抗HF 治療手段。SCHWABL 等［29］發(fā)現(xiàn)： 非甾體FXR 激動(dòng)劑Cilofexor 作用于經(jīng)膽堿缺乏的高脂肪飲食加腹膜內(nèi)亞硝酸鈉注射誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis，NASH） 模型大鼠后，大鼠HF 程度降低。

2. 1. 5 PPARγ PPAR 是一種可以被過氧化物酶體增殖物激活的核轉(zhuǎn)錄因子， 分為PPARα、PPARδ （β） 和PPARγ 3 種類型。PPAR 在多種細(xì)胞生長(zhǎng)分化過程中均起重要作用，其中PPARγ 在HSCs 和巨噬細(xì)胞中表達(dá)，具有調(diào)控脂肪代謝、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡、抑制炎癥反應(yīng)及抗HF 等多種生物學(xué)功能［30］。研究［31］ 顯示： PPARγ 通過調(diào)控HSCs 增殖、活化以及相關(guān)細(xì)胞因子分泌發(fā)揮抗纖維化作用。PPARγ 表達(dá)水平與HSCs 狀態(tài)有關(guān)，靜息狀態(tài)時(shí)PPARγ 表達(dá)水平升高，活化狀態(tài)時(shí)PPARγ 表達(dá)水平開始急速降低；提高PPARγ 表達(dá)水平能夠?qū)SCs 激活、增生起抑制作用，誘導(dǎo)細(xì)胞周期滯停和細(xì)胞凋亡，從而降低HF 程度。ALATAS 等［32］ 采用PPARγ 激動(dòng)劑噻唑烷二酮（thiazolidinedione， TZD） 作用于經(jīng)BDL 誘導(dǎo)的HF 模型小鼠， 結(jié)果顯示： 與未治療組比較，TZD 組小鼠TGF-β1、PDGF 和CTGF 等表達(dá)水平均降低， 表明調(diào)控PPARγ 活性可能是控制HF 的新靶點(diǎn)。CHHIMWAL 等［33］ 采用藏紅花素作用于經(jīng)CCl 4或酒精誘導(dǎo)的HF 模型大鼠發(fā)現(xiàn)：大鼠肝組織中PPARγ 表達(dá)水平升高，表明其可激活PPARγ信號(hào)并在預(yù)防HF 方面具有潛在作用。

2. 1. 6 酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinases，TKs） TKs 是一種能催化含酪氨酸殘基的底物蛋白發(fā)生磷酸化的特異性蛋白激酶。研究［34］ 顯示：細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移、凋亡和新生血管形成離不開TKs。發(fā)生器官纖維化時(shí)， 纖維化器官中TKs 表達(dá)水平過高，TKs 通過與配體結(jié)合，使下游促纖維化相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活， 引起成纖維細(xì)胞向MFBs 轉(zhuǎn)變，導(dǎo)致膠原分泌增加與降解減少，ECM 過度沉積，并出現(xiàn)HF，表明TKs 有可能成為纖維化治療的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。TKs 抑制劑是一種可與TKs 競(jìng)爭(zhēng)性 結(jié) 合 底 物 的 抑 制 劑， 通 過 與 三 磷 酸 腺 苷（adenosine triphosphate，ATP） 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，使結(jié)合ATP 的TKs 水平降低，從而降低TKs 活性，減少細(xì)胞增殖。迄今為止，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局已批準(zhǔn)30 多種TKs 抑制劑上市。研究［35］ 顯示：TKs 抑制劑通過阻礙成纖維細(xì)胞增殖和血管生成，起到抗纖維化的作用，且其在動(dòng)物模型和纖維化疾病患者中均有正面的治療作用。

研究［36］ 顯示：在CCl 4、BDL 和二甲基亞硝胺等誘導(dǎo)的HF 模型中，索拉非尼均顯示出抗HF 作用。索拉菲尼通過阻止HSCs 增殖，加快HSCs 凋亡，調(diào)控膠原形成和降解、血管重塑和成熟及炎性因子等機(jī)制，從而降低HF 程度。LIU 等［37］ 證實(shí)：治療特發(fā)性肺纖維化的TKs 抑制劑尼達(dá)尼布可以抑制HF 進(jìn)展。在CCl4 誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠模型中，尼達(dá)尼布可以下調(diào)Ⅰ型膠原蛋白、黏連蛋白、TIMP-1、α-SMA 和炎癥因子的表達(dá)水平，抑制肝內(nèi)炎癥反應(yīng)和血管再生，從而抑制HF 發(fā)生發(fā)展。

2. 2 抑制ECM合成和促進(jìn)ECM降解

2. 2. 1 MMPs 和TIMPs HASSAN 等［38］ 發(fā)現(xiàn)：采用美洛昔康作用于經(jīng)CCl 4誘導(dǎo)的HF 模型大鼠可下調(diào)TIMP-1 和TGF-β 表達(dá)水平，減少膠原沉積，繼而降低HF 程度。KARIMI 等［39］ 研究顯示： 尼洛替尼和氯沙坦聯(lián)用后，經(jīng)CCl 4誘導(dǎo)的HF 模型大鼠肝組織中MMP-2 和MMP-9 表達(dá)水平升高， 表明其增強(qiáng)了抗HF 作用。盡管抗HF 的藥物試驗(yàn)效果良好，但是多局限于動(dòng)物模型和體外實(shí)驗(yàn)，最終的療效和安全性還需要通過嚴(yán)格而細(xì)致的臨床試驗(yàn)來驗(yàn)證。MMPs/TIMPs 是HF 進(jìn)展過程中ECM 調(diào)節(jié)因素之一， 如何精準(zhǔn)維持MMPs/TIMPs 平衡，調(diào)控MMPs 活性和闡明MMPs/TIMPs 平衡機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。

2. 2. 2 CTGF NIE 等［40］ 在經(jīng)輻射誘導(dǎo)的放射性肝纖維化（radiation-induced liver fibrosis， RILF）模型大鼠中發(fā)現(xiàn)： RILF 模型大鼠肝組織中HSCs被激活并產(chǎn)生促纖維化蛋白質(zhì)， 采用金線蓮苷（kinsenoside，KD）治療后，肝組織中HSCs、TGF-β1和α-SMA 表達(dá)水平降低，說明KD 通過抑制輻射后激活的TGF- β1/Smad/CTGF 通路抑制RILF， 該結(jié)果為使用靶向TGF-β1 通路和CTGF 的試劑防治RILF 提供了依據(jù)。CUI 等［41］ 從經(jīng)酒精誘導(dǎo)的HF模型大鼠中提取HSC-T6 細(xì)胞， 采用小干擾RNA（small interference RNA，siRNA） 技術(shù)沉默細(xì)胞中CTGF 基因，結(jié)果顯示：細(xì)胞中CTGF、HSCs 及Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)水平均降低，HF 進(jìn)程被抑制，該結(jié)果為抑制HF 的研究提供了新思路。

2. 2. 3 賴氨酰氧化酶（lysyl oxidase，LOX） LOX是一種細(xì)胞外銅依賴性胺氧化酶，包括LOX 和賴氨酰氧化酶樣蛋白1～4 （lysyl oxidase like 1～4，LOXL 1～4）共5 種類型酶。LOX 的主要作用是催化纖維化器官中膠原和彈性蛋白在ECM 中的共價(jià)交聯(lián)，使產(chǎn)生的ECM 更穩(wěn)定，促進(jìn)纖維化進(jìn)展并延緩纖維分解。研究［42］ 顯示：正常肝組織中LOX表達(dá)水平較低，而纖維化肝組織中LOX 表達(dá)水平明顯升高， 提示LOX 與HF 發(fā)展可能密切相關(guān)，LOX 有望成為一種新型抗纖維化藥物靶點(diǎn)。

ZHAO 等［43］ 發(fā)現(xiàn)：抑制LOXL1 活性可以減少經(jīng)CCl 4 誘導(dǎo)的HF 小鼠彈性蛋白交聯(lián)，減少HSCs活化， 下調(diào)體外彈性蛋白表達(dá)水平， 從而減弱CCl 4 誘發(fā)的HF 程度。IKENAGA 等［44］ 采用特異性LOXL2 單克隆抗體治療經(jīng)TAA 誘導(dǎo)的HF 模型小鼠，結(jié)果顯示：小鼠肝組織中纖維間隔變薄，細(xì)纖維增多，HF 程度減輕，而對(duì)照組和安慰劑組小鼠則未出現(xiàn)上述變化，表明LOXL2 單克隆抗體對(duì)HF 有一定的抑制作用。LOXL2 通過調(diào)控細(xì)胞信號(hào)通路參與纖維化發(fā)生發(fā)展，其抑制劑的不良反應(yīng)和療效等問題尚未完全闡明。

3 展 望

HF 是一個(gè)動(dòng)態(tài)的發(fā)展過程， 在HF 不同病理階段是否應(yīng)當(dāng)針對(duì)不同靶點(diǎn)進(jìn)行治療是今后值得探索的課題之一。目前，盡管許多具有抗HF 作用的候選藥物經(jīng)動(dòng)物研究證實(shí)有效，但其在臨床試驗(yàn)方面尚無突破性進(jìn)展，未來需要考慮進(jìn)行雙靶點(diǎn)或多靶點(diǎn)聯(lián)合治療。臨床上檢測(cè)HF 治療效果仍以肝臟活檢為主，缺乏高效、敏感且無創(chuàng)的檢測(cè)手段。為此，繼續(xù)尋找潛在的治療靶點(diǎn)，研發(fā)更高效更全面的新型候選藥物并用于臨床是今后開展抗HF 藥物研制的重要方向。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：廖昭輝參與文獻(xiàn)檢索、論文撰寫和論文修改，謝正元參與選題設(shè)計(jì)和論文修改。

[參考文獻(xiàn)]

［1］ MOON A M， SINGAL A G， TAPPER E B.

Contemporary epidemiology of chronic liver disease and

cirrhosis［J］. Clin Gastroenterol Hepatol， 2020， 18（12）：

2650-2666.

［2］ 張雪萍， 尚小飛， 李秀惠. 肝纖維化的中西醫(yī)結(jié)合診治

進(jìn)展［J］. 臨床肝膽病雜志， 2023， 39（2）： 284-289.

［3］ KAMM D R， MCCOMMIS K S. Hepatic stellate cells

in physiology and pathology［J］. J Physiol， 2022，

600（8）： 1825-1837.

［4］ TRAUTWEIN C， FRIEDMAN S L， SCHUPPAN D，

et al. Hepatic fibrosis： concept to treatment［J］. J Hepatol，

2015， 62（1 Suppl）： S15-S24.

［5］ 阿比丹·拜合提亞爾， 郭津生. 肝纖維化發(fā)生時(shí)活化肝

星狀細(xì)胞的代謝改變［J］. 中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)， 2021，

43（10）： 2054-2060.

［6］ XU F Y， LIU C W， ZHOU D D， et al. TGF-β/SMAD

pathway and its regulation in hepatic fibrosis ［J］.

J Histochem Cytochem， 2016， 64（3）： 157-167.

［7］ TSUCHIDA T， FRIEDMAN S L. Mechanisms of

hepatic stellate cell activation［J］. Nat Rev Gastroenterol

Hepatol， 2017， 14（7）： 397-411.

［8］ DEWIDAR B， MEYER C， DOOLEY S， et al. TGF-β

in hepatic stellate cell activation and liver fibrogenesisupdated

2019［J］. Cells， 2019， 8（11）： 1419.

［9］ KAZLAUSKAS A. PDGFs and their receptors［J］.

Gene， 2017， 614： 1-7.

［10］KLINKHAMMER B M， FLOEGE J， BOOR P.

PDGF in organ fibrosis［J］. Mol Aspects Med， 2018，

62： 44-62.

［11］CUI N， HU M， KHALIL R A. Biochemical and

biological attributes of matrix metalloproteinases ［J］.

Prog Mol Biol Transl Sci， 2017， 147： 1-73.

［12］ROBERT S， GICQUEL T， VICTONI T， et al.

Involvement of matrix metalloproteinases （MMPs） and

inflammasome pathway in molecular mechanisms of

fibrosis［J］. Biosci Rep， 2016， 36（4）： e00360.

［13］郭爭(zhēng)榮， 孫殿興， 李兵順. 基質(zhì)金屬蛋白酶與肝纖維化

的基因治療［J］. 國(guó)際消化病雜志， 2015， 35（1）： 5-7.

［14］RAMAZANI Y， KNOPS N， ELMONEM M A， et al.

Connective tissue growth factor （CTGF） from basics to

clinics［J］. Matrix Biol， 2018， 68/69： 44-66.

［15］DROPPELMANN C A， GUTIéRREZ J， VIAL C，

et al. Matrix metalloproteinase-2-deficient fibroblasts

exhibit an alteration in the fibrotic response to connective

tissue growth factor/CCN2 because of an increase in the

levels of endogenous fibronectin［J］. J Biol Chem， 2009，

284（20）： 13551-13561.

［16］PARDALI E， SANCHEZ-DUFFHUES G， GOMEZPUERTO

M C， et al. TGF- β -induced endothelialmesenchymal

transition in fibrotic diseases［J］. Int J Mol

Sci， 2017， 18（10）： 2157.

［17］SUN Y M， LIU B Y， XIE J P， et al. Aspirin attenuates

liver fibrosis by suppressing TGF-β1/Smad

signaling［J］. Mol Med Rep， 2022， 25（5）： 181.

［18］DING W W， ZHOU D H， ZHANG S M， et al.

Trimetazidine inhibits liver fibrosis and hepatic stellate

cell proliferation and blocks transforming growth factor- β

（TGFβ）/Smad signaling in vitro and in vivo ［J］.

Bioengineered， 2022， 13（3）： 7147-7156.

［19］XIANG D J， ZOU J， ZHU X Y， et al. Physalin D

attenuates hepatic stellate cell activation and liver fibrosis

by blocking TGF- β/Smad and YAP signaling ［J］.

Phytomedicine， 2020， 78： 153294.

［20］WANG X Q， GAO Y Z， LI Y， et al. Roseotoxin B

alleviates cholestatic liver fibrosis through inhibiting

PDGF-B/PDGFR-β pathway in hepatic stellate cells［J］.

Cell Death Dis， 2020， 11（6）： 458.

［21］CHEN C， LI X K， WANG L. Thymosinβ4 alleviates

cholestatic liver fibrosis in mice through downregulating

PDGF/PDGFR and TGFβ/Smad pathways［J］. Dig

Liver Dis， 2020， 52（3）： 324-330.

［22］CRISTINO L， BISOGNO T， MARZO V D.

Cannabinoids and the expanded endocannabinoid system

in neurological disorders［J］. Nat Rev Neurol， 2020，

16（1）： 9-29.

［23］MBOUMBA BOUASSA R S， SEBASTIANI G，

MARZO V D， et al. Cannabinoids and chronic liver

diseases［J］. Int J Mol Sci， 2022， 23（16）： 9423.

［24］張自力， 張 涉， 郭 瑤， 等. 大麻素受體在肝星狀細(xì)

胞活化中的作用及姜黃素干預(yù)效應(yīng)［J］. 中國(guó)藥理學(xué)通

報(bào)， 2013， 29（5）： 626-631.

［25］龍翠珍， 舒遠(yuǎn)輝， 何 萍， 等. 大麻素受體2 激動(dòng)劑

AM1241對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的HSC-T6增殖、活化及凋亡的

影響［J］. 天津醫(yī)藥， 2020， 48（7）： 606-610.

［26］JIANG L Y， ZHANG H J， XIAO D S， et al. Farnesoid

X receptor （FXR）： structures and ligands［J］. Comput

Struct Biotechnol J， 2021， 19： 2148-2159.

［27］蒲詩(shī)云， 任常諭. 核受體FXR在肝星狀細(xì)胞及肝纖維化

中的作用［J］. 生理科學(xué)進(jìn)展， 2022， 53（1）： 19-23.

［28］FAN Y Y， DING W， ZHANG C， et al. Obeticholic

acid prevents carbon tetrachloride-induced liver fibrosis

through interaction between farnesoid X receptor and

Smad3［J］. Int Immunopharmacol， 2019， 77： 105911.

［29］SCHWABL P， HAMBRUCH E， BUDAS G R， et al.

The non-steroidal FXR agonist cilofexor improves portal

hypertension and reduces hepatic fibrosis in a rat NASH

mode［l J］. Biomedicines， 2021， 9（1）： 60.

［30］MIRZA A Z， ALTHAGAFI I I， SHAMSHAD H.

Role of PPAR receptor in different diseases and their

ligands： physiological importance and clinical

implications［J］. Eur J Med Chem， 2019， 166： 502-513.

［31］HAN X， WU Y L， YANG Q， et al. Peroxisome

proliferator-activated receptors in the pathogenesis and

therapies of liver fibrosis［J］. Pharmacol Ther， 2021，

222： 107791.

［32］ALATAS F S， MATSUURA T， PUDJIADI A H，

et al. Peroxisome proliferator-activated receptor gamma

agonist attenuates liver fibrosis by several fibrogenic

pathways in an animal model of cholestatic fibrosis［J］.

Pediatr Gastroenterol Hepatol Nutr， 2020， 23（4）：

346-355.

［33］CHHIMWAL J， SHARMA S， KULURKAR P， et al.

Crocin attenuates CCl4-induced liver fibrosis via PPAR-γ

mediated modulation of inflammation and fibrogenesis in

rats［J］. Hum Exp Toxicol， 2020， 39（12）： 1639-1649.

［34］BEYER C， DISTLER J H W. Tyrosine kinase

signaling in fibrotic disorders： translation of basic

research to human disease［J］. Biochim Biophys Acta，

2013， 1832（7）： 897-904.

［35］張杉杉， 李海龍， 李曉平， 等. 酪氨酸激酶抑制劑與器

官纖維化研究進(jìn)展［J］. 中國(guó)藥學(xué)雜志， 2022， 57（2）：

96-101.

［36］QU K， HUANG Z C， LIN T， et al. New insight into

the anti-liver fibrosis effect of multitargeted tyrosine

kinase inhibitors ： from molecular target to clinical

trials［J］. Front Pharmacol， 2015， 6： 300.

［37］LIU F， BAYLISS G， ZHUANG S G. Application of

nintedanib and other potential anti-fibrotic agents in

fibrotic diseases［J］. Clin Sci， 2019， 133（12）： 1309-

1320.

［38］KARIMI J， MOHAMMADALIPOUR A， SHEIKH N，

et al. Protective effects of combined Losartan and

Nilotinib on carbon tetrachloride （CCl4）-induced liver

fibrosis in rats［J］. Drug Chem Toxicol， 2020， 43（5）：

468-478.

［39］HASSAN M H， GHOBARA M M. Antifibrotic effect

of meloxicam in rat liver： role of nuclear factor kappa B，

proinflammatory cytokines， and oxidative stress ［J］.

Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol， 2016，

389（9）： 971-983.

［40］NIE X Q， YU Q Q， LI L， et al. Kinsenoside protects

against radiation-induced liver fibrosis via

downregulating connective tissue growth factor through

TGF- β1 signaling［J］. Front Pharmacol， 2022， 13：

808576.

［41］崔小偉， 劉曉智. 沉默結(jié)締組織生長(zhǎng)因子對(duì)酒精性肝纖

維化干預(yù)效果的研究［J］. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志， 2018， 34（13）：

2132-2136.

［42］CHEN W， YANG A T， JIA J D， et al. Lysyl oxidase

（LOX） family members： rationale and their potential as

therapeutic targets for liver fibrosis［J］. Hepatology，

2020， 72（2）： 729-741.

［43］ZHAO W S， YANG A T， CHEN W， et al. Inhibition

of lysyl oxidase-like 1 （LOXL1） expression arrests liver

fibrosis progression in cirrhosis by reducing elastin

crosslinking［J］. Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis，

2018， 1864（4 Pt A）： 1129-1137.

［44］IKENAGA N， PENG Z W， VAID K A， et al.

Selective targeting of lysyl oxidase-like 2 （LOXL2）

suppresses hepatic fibrosis progression and accelerates its

reversa［l J］. Gut， 2017， 66（9）： 1697-1708.