摘 要：為了研究飼料中添加不同水平的殼寡糖（Chitosan oligosaccharide，β-1，4-寡糖-葡萄糖胺）對異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）非特異性免疫功能的影響，試驗選擇體重約為50 g健康的異育銀鯽480尾，隨機分成4個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)40尾異育銀鯽。各組異育銀鯽分別投喂含有0%（對照組）、0.25%、0.50%和0.75%的殼寡糖的試驗餌料。試驗周期為60 d。結(jié)果顯示，與對照組相比，當(dāng)異育銀鯽養(yǎng)殖中添加0.50%和0.75%的殼寡糖可以使血清中丙二醛水平顯著降低（Plt;0.05），血清溶菌酶活性和超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組和0.25%殼寡糖組（Plt;0.05），血清過氧化氫酶活性顯著高于對照組（Plt;0.05）。研究表明，在異育銀鯽養(yǎng)殖生產(chǎn)中添加適量的殼寡糖可以顯著提高機體的非特異性免疫功能。綜合養(yǎng)殖成本考慮，殼寡糖的最適添加量為0.50%～0.75%。

關(guān)鍵詞：殼寡糖（Chitosan oligosaccharide）；異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）；非特異性免疫

中圖分類號：S965.117文獻標(biāo)志碼：A

殼寡糖（Chitosan oligosaccharide，β-1，4-寡糖-葡萄糖胺）是一種含有大量堿性氨基的多糖，具有安全、高效、易被機體消化吸收的特點[1]。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模的擴大，養(yǎng)殖過程中疾病頻發(fā)，機體免疫力下降，進而影響生長性能及養(yǎng)殖經(jīng)濟效益。而大量研究均表明，殼寡糖在畜禽、水產(chǎn)等養(yǎng)殖中具有改善腸道健康、調(diào)節(jié)機體免疫、促生長的功能[2-4]。蘇鵬等[5]研究了殼寡糖對紅鰭東方鲀血液指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)殼寡糖可以有效提高其機體非特異性免疫功能。

異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）屬于鯉形目（Cypriniformes），鯉科（Cyprinidae），在我國山東、江西、湖北等地區(qū)養(yǎng)殖居多，屬于淡水魚養(yǎng)殖品種之一[6]。異育銀鯽在養(yǎng)殖生產(chǎn)中易受病毒、寄生物、細菌等危害，給異育銀鯽養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大壓力[7-8]。因此，如何通過營養(yǎng)調(diào)控手段提高異育銀鯽機體的非特異性免疫功能及生產(chǎn)效益至關(guān)重要。該試驗探討不同水平殼寡糖對異育銀鯽機體非特異性免疫功能的影響，為異育銀鯽的高效、健康養(yǎng)殖提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用的殼寡糖購買于中泰和（北京）科技發(fā)展有限公司，殼寡糖有效含量大于12%。試驗異育銀鯽中科3號魚種從廣東省廣州聯(lián)豐水產(chǎn)養(yǎng)殖基地引進。

1.2 試驗設(shè)計

試驗在廣西富川縣富陽鎮(zhèn)沙汪村養(yǎng)殖基地內(nèi)進行。試驗選擇規(guī)格整齊、體形正常、鰭鱗完整、體質(zhì)健壯、活潑溯水性強、眼睛水晶體光滑潤澤、體表光滑無寄生蟲、畸形率和損傷率控制在1%以內(nèi)。體重約為50g健康的異育銀鯽480尾，隨機分成4個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)40尾異育銀鯽。各組異育銀鯽分別投喂含有0（對照組）、0.25%、0.50%和0.75%的殼寡糖的試驗餌料。試驗周期為60 d。試驗設(shè)計見表1。試驗異育銀鯽的基礎(chǔ)飼料配方見表2。

1.3 異育銀鯽的養(yǎng)殖管理

試驗開始前30 d，排干池水，干塘暴曬，清除雜物和過多的淤泥，使池底淤泥層保持在10cm左右。苗種下塘前15 d注入新水30cm，按每畝帶水投入茶粕20 kg加生石灰10 kg徹底清塘消毒除害。在異育銀鯽“中科3號”苗種投放前7 d，池塘加注經(jīng)進水管口加裝60目鋼絲篩網(wǎng)過濾水至2.6 m的穩(wěn)定水位后，每畝施發(fā)酵腐熟并經(jīng)漂白粉消毒的雞糞500 kg（雞糞與漂白粉按100∶1充分攪拌均勻），以肥水培養(yǎng)浮游生物。試驗放置12個網(wǎng)箱（1.8 m×1.8 m×2 m）。每日投喂2次，日投餌率為魚體重的0.8%～1.0%。飼料的投喂量還要根據(jù)天氣、水質(zhì)和魚的活動攝食情況靈活掌握，特別是應(yīng)適當(dāng)控制梅雨季節(jié)和魚病多發(fā)季節(jié)的投喂量。pH值7.0～8.1，透明度為31 cm～35 cm，溶解氧5 mg/L以上，氨氮低于0.1 mg/L。

1.4 指標(biāo)的檢測

試驗結(jié)束當(dāng)天，從每個重復(fù)中選擇4尾異育銀鯽，從尾柄靜脈采血，靜置2 h～3 h后，3500 r/min離心10 min，收集血清，用于檢測血清非特異性免疫指標(biāo)。主要檢測溶菌酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶及丙二醛。檢測試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。檢測方法參考試劑盒說明書。

1.5 數(shù)據(jù)處理

各組異育銀鯽的非特異性免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)使用SPSS 28分析顯著性，Plt;0.05表示數(shù)據(jù)具有顯著性差異。

2 結(jié)果

不同水平殼寡糖對異育銀鯽血清非特異性免疫指標(biāo)的影響見表3。

從表3數(shù)據(jù)可見，當(dāng)異育銀鯽養(yǎng)殖中添加0.50%和0.75%的殼寡糖可以使血清中丙二醛水平顯著降低，顯著高于對照組（Plt;0.05），血清溶菌酶活性顯著高于對照組和0.25%殼寡糖組（Plt;0.05），血清超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組和0.25%殼寡糖組（Plt;0.05），血清過氧化氫酶活性顯著高于對照組（Plt;0.05）。

3 討論

魚類機體血清中的超氧化物歧化酶、丙二醛、過氧化氫及溶菌酶等是其非特異性免疫系統(tǒng)的重要指標(biāo)。丙二醛是脂質(zhì)氧化的最終產(chǎn)物，代表機體氧化程度。過氧化氫酶可以清除機體的過氧化氫，使機體免受其損傷。超氧化物歧化酶是機體重要的抗氧化酶，可以清除機體產(chǎn)生的過量的自由基。溶菌酶在防御機體病原微生物的入侵方面發(fā)揮重要作用。該試驗中，與對照組相比，當(dāng)異育銀鯽養(yǎng)殖中添加0.50%和0.75%的殼寡糖可以使血清中丙二醛水平顯著降低（Plt;0.05），血清溶菌酶活性和超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組和0.25%殼寡糖組（Plt;0.05），血清過氧化氫酶活性顯著高于對照組（Plt;0.05），表明在異育銀鯽養(yǎng)殖生產(chǎn)中添加適量的殼寡糖可以顯著提高機體的非特異性免疫功能。孫飛等[9]研究了殼寡糖對異育銀鯽生長、免疫及腸道形態(tài)的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)殼寡糖添加量為0.04%時，異育銀鯽機體的非特異性免疫力最強，并提高了生長性能，改善了腸道形態(tài)。陳勇等[10]也研究了殼寡糖對異育銀鯽機體非特異性免疫功能的影響，發(fā)現(xiàn)0.5%的殼寡糖顯著提高了血清中T3含量，降低了皮質(zhì)醇水平，增強了機體的非特異性免疫力。以上研究結(jié)果均表明，適量的殼寡糖可以提高異育銀鯽的非特異性免疫力，但是添加劑量有所不同，可能是因為殼寡糖的純度不同、養(yǎng)殖環(huán)境不同導(dǎo)致的。

4 結(jié)論

該試驗結(jié)果表明，在異育銀鯽養(yǎng)殖生產(chǎn)中添加適量的殼寡糖可以提高血清中溶菌酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛水平，增強了機體的非特異性免疫功能，且殼寡糖的適宜添加水平為0.50%～0.75%。

參考文獻：

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[5]蘇鵬，潘金露，韓雨哲，等.殼寡糖對紅鰭東方鲀血液指標(biāo)和非特異性免疫指標(biāo)的影響[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報，2016，31（1）：37-43.

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[8]林秀秀，葉元土，吳萍，等.鯉皰疹Ⅱ型病毒（CyHV-2）感染對異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）組織器官的損傷作用[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2016，35（3）：587-594.

[9]孫飛，何杰，葉元土，等.殼寡糖對異育銀鯽生長性能、腸道組織結(jié)構(gòu)和非特異性免疫功能的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2018，30（12）：5153-5163.

[10]陳勇，華雪銘，周洪琪，等.殼聚糖和益生菌對異育銀鯽非特異免疫功能及血清甲狀腺激素、皮質(zhì)醇水平的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報，2010，34（05）：711-718.

Effects of feed supplementation with chitosan on the non-specific immune function of Carassius auratus gibelio

PENG Ruiming

Abstract：The aim of the experiment was to investigate the effects of adding different levels of Chitosan oligosaccharide （β-1，4-oligosaccharide-glucosamine） to the feed of Carassius auratus gibelio on its non-specific immune function. A total of 480 healthy Carassius auratus gibelio weighing about 50 g were randomly divided into four treatments， with three replicates of 40 Carassius auratus gibelio in each treatment. Each group of Carassius auratus gibelio was fed with test baits containing 0% （control group）， 0.25%， 0.50% and 0.75% chitosan， respectively. The experimental period was 60 day. The results showed that compared with the control group， when 0.50% and 0.75% chitosan was added to the heterotrophic crucian carp culture， the serum malondialdehyde level was significantly reduced （Plt;0.05）; serum lysozyme activity and superoxide dismutase activity were significantly higher than those in the control group and the group with 0.25% chitosan （Plt;0.05）; and serum catalase activity was significantly higher than that in the control group （Plt;0.05）. Studies have shown that the addition of appropriate amount of chitosan in Carassius auratus gibelio culture production can significantly improve the non-specific immune function of the organism， and the optimal amount of chitosan is 0.50% to 0.75% considering the comprehensive cost of culture.

Keywords：Chitosan oligosaccharide; Carassius auratus gibelio; non-specific immunity

作者簡介：彭瑞明（1978-）男，漢族，廣西賀州人。富川瑤族自治縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站工程師。主要從事水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)推廣工作。E-mail：119763414@qq.com。