紀鳳卿 陳君穎 藍玉芬

【摘要】 目的 分析評估細菌性陰道病四聯(lián)檢測法在細菌性陰道病（bacterial vaginosis，BV）中的應用情況。方法 選取廈門市中醫(yī)院2022年2—3月收治的1 000例陰道炎患者作為研究對象，同時行白帶常規(guī)鏡檢和細菌性陰道病四聯(lián)檢測法，對檢測結果進行分析。結果 常規(guī)濕片鏡檢診斷線索細胞與胺試驗均陽性118例，四聯(lián)BV Set試劑盒檢出唾液酸酯酶陽性130例。常規(guī)鏡檢結果與BV Set試劑盒檢出結果一致的有118例，濕片鏡檢結果與細菌性陰道病四聯(lián)檢測法結果的符合率達90.77%。BV Set試劑盒檢測中過氧化氫陽性率為92.00%，國內(nèi)首次報道廈門地區(qū)陰道炎患者過氧化氫陽性率92.00%，應引起臨床關注。BV Set試劑盒檢測唾液酸酶陽性率為13.00%，白細胞酯酶陽性率為41.00%，pH陽性率為76.00%。該研究4項指標陽性率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。過氧化氫陽性的920例標本在白帶常規(guī)各級清潔度患者中均有分布，其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度陽性率分別為5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。各清潔度病例中過氧化氫陽性率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 采用細菌性陰道病四聯(lián)檢測法能有效綜合評估女性陰道微生態(tài)環(huán)境，提高BV診斷準確率，為患者帶來益處，提高患者的生活質(zhì)量，值得大力推廣。

【關鍵詞】 細菌性陰道??；陰道清潔度；四聯(lián)檢測法；陰道微生態(tài)

文章編號：1672-1721（2024）01-0112-03 ? ? 文獻標志碼：A ? ? 中國圖書分類號：R446.5

陰道微生態(tài)系統(tǒng)在維持女性生殖道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中發(fā)揮著重要的作用。若女性陰道微生態(tài)失調(diào)，則容易發(fā)生各種類型的陰道炎和生殖系統(tǒng)感染[1]。醫(yī)學數(shù)據(jù)資料顯示，BV以明顯陰道菌群失調(diào)導致多種致病性細菌感染為特征。如果患者沒有得到準確的檢查，很有可能會造成檢測不及時、診斷不準確[2]。目前醫(yī)學界認為，正常的陰道微生物菌群以乳桿菌為優(yōu)勢菌，陰道微生態(tài)評估以陰道乳酸桿菌[3]變化為主。這是臨床診斷最有價值的檢測指標。

本研究回顧性綜合評估細菌性陰道病四聯(lián)檢測法對女性陰道微生態(tài)的檢測結果，分析這一方法在BV診斷中的應用，現(xiàn)將研究結果報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取廈門市中醫(yī)院門診及住院2022年2—3月收治的1 000例陰道炎患者作為研究對象，年齡21～60歲，平均年齡為（32.62±8.36）歲。

1.2 方法與儀器

1.2.1 儀器與試劑

儀器：bPR-2014A陰道炎自動檢測工作站，日本OLYMPUS CX-21 雙目顯微鏡。

試劑：江蘇碩世生物科技股份有限公司細菌性陰道?。˙V）檢測試劑盒，質(zhì)量分數(shù)為10%的KOH溶液。

1.2.2 方法

在本次研究中，所有患者同時行白帶常規(guī)檢查與細菌性陰道病四聯(lián)檢測法。每位患者送檢的2份白帶標本，1份進行Amsel試驗，由實驗室檢驗技師嚴格按照《臨床檢驗操作規(guī)程》第4版操作。另1份用BV 4項試劑盒檢測，由實驗室檢驗技師嚴格按照bPR-2014A陰道炎自動檢測工作站標本操作流程操作。BV 4項檢測內(nèi)容包括H2O2濃度、唾液酸苷酶、白細胞酯酶和pH值，檢測原理均采用干化學酶技術。根據(jù)酶解特異性底物而顯色或者添加顯色液顯色，并且呈色深度與所含酶的濃度成正比，從而輔助診斷細菌性陰道病。

Amsel臨床診斷標準[4]：（1）陰道分泌物稀薄均勻；（2）分泌物pH值＞4.5；（3）胺試驗結果為陽性；（4）涂片染色找到線索細胞。凡檢出線索細胞再加上述任意2條即可診斷為BV。

BV 4項試劑盒判斷標準：（1）H2O2濃度。不顯色或者淡黃色為陽性，顯粉紅色表示弱陽性，顯紅色或者紫紅色為陰性。（2）唾液酸苷酶。顯紅色或紫紅色為陽性，顯粉紅色表示弱陽性，不顯色或者淡黃色為陰性。（3）白細胞酯酶。顯藍色或綠色為陽性，顯淡藍色表示弱陽性，不顯色為陰性。（4）pH值。試劑顏色由黃色—青色—綠色—藍色變化，表示pH值在3.8～5.4變化。正常pH值參考范圍為3.8～4.5，當pH值＞4.5時代表分泌物細菌性陰道病為陽性。

陰道分泌物涂片清潔度判定標準見表1。

1.3 觀察指標

在整個過程中，主要觀察指標為：（1）不同檢測方法陽性檢驗結果；（2）細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢查4項

指標陽性率；（3）過氧化氫陽性標本白帶常規(guī)清潔度。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以百分比表示，行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同檢測方法陽性檢驗結果

1 000例標本中，白帶常規(guī)鏡檢檢出線索細胞與胺試驗均陽性為118例，細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢出唾液酸酯酶陽性130例。常規(guī)鏡檢結果與BV Set試劑盒檢出結果一致的有118例，白帶常規(guī)鏡檢結果與細菌性陰道病四聯(lián)檢測法結果的符合率達90.76%，該部分患者可判斷為BV，見表2。

2.2 細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢查4項指標陽性率

1 000例標本行細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢查4項指標（過氧化氫、唾液酸酶、白細胞酯酶、pH值），陽性率結果見表3。

研究病例4項指標中陽性率比較，χ2=1 503.660，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）。其中，過氧化氫陽性率最高，達到92.00%。此為首次報道廈門本地區(qū)細菌性陰道炎患者過氧化氫陽性率如此之高，應引起臨床關注。

2.3 過氧化氫陽性標本白帶常規(guī)清潔度

記錄過氧化氫陽性的920例標本的白帶常規(guī)清潔度，見表4。

隨著患者清潔度惡化，過氧化氫陽性率也逐步提高。各清潔度病例中過氧化氫陽性率比較，χ2=596.823，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）。

3 討論

BV是由陰道內(nèi)乳桿菌減少或消失、兼性厭氧菌及厭氧菌增多導致的常見陰道感染性疾病之一，具有臨床癥狀不典型、復發(fā)率高的特點。BV與婦科術后感染、盆腔炎癥、早產(chǎn)或產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎、反復流產(chǎn)等不良妊娠結局及淋病、HIV等性傳播疾病的發(fā)病風險具有相關性，實驗室診斷主要依據(jù)革蘭染色Nugent評分標準和臨床Amsel標準[5]。面對育齡期婦女患病率4.96%～36.00%、婦科門診發(fā)病率高達50.40%的情況，臨床迫切希望對該病進行及時準確的診斷。近年細菌性陰道病四聯(lián)檢測法應運而生，成為BV檢測的另一種補充方式。BV的實驗室檢測一直以傳統(tǒng)Amsel法為主，費力費時，容易受主觀因素干擾影響。比如近期性生活和陰道沖洗均可導致pH值升高；胺試驗的氣味鑒別結果因人而異；線索細胞的判別受標本采集部位、操作者的涂片方式、經(jīng)驗等影響，不易做到標準化。雖然革蘭染色Nugent評分法準確性高，但操作復雜、周期長，不適于作為常規(guī)檢測方法。而采用細菌性陰道病四聯(lián)檢測法應用bPR-2014A陰道炎自動檢測工作站進行檢測的方法更容易標準化，克服Amsel法、革蘭染色Nugent評分法諸多缺陷。

實驗室BV試劑盒共檢測4項指標，即pH值、過氧化氫濃度、白細胞酯酶、唾液酸苷酶。其中pH值用以判斷陰道整體酸堿度情況，輔助診斷是否存在陰道病原體感染影響環(huán)境酸堿度。國內(nèi)學者曹建英[6]研究顯示，白帶pH值≤4.5，可以有效控制細菌性陰道病的發(fā)病率。臨床不可忽視pH值這一檢測項目。過氧化氫由陰道中的正常菌群乳酸桿菌產(chǎn)生，且其濃度與乳酸桿菌數(shù)量成正比。過氧化氫水平可作為陰道乳酸桿菌狀態(tài)的檢測指標，與BV診斷有很強相關性。乳酸桿菌從多方面維持陰道微生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定[7]，即與致病菌競爭黏附在陰道上皮細胞；酵解糖原產(chǎn)生乳酸，維持陰道酸堿度；乳酸桿菌及其代謝產(chǎn)物激發(fā)陰道上皮細胞的免疫功能，抑制致病菌菌群的生長繁殖；產(chǎn)生廣譜抗菌因子過氧化氫。當發(fā)生感染時，白細胞酯酶通過陰道上皮細胞黏膜滲透到分泌物中，檢測白細胞酯酶活性可間接反映白細胞數(shù)量。然而BV試劑盒無法檢測不產(chǎn)生白細胞酯酶的免疫細胞，比如淋巴細胞、單核細胞，此時需要結合人工鏡檢白帶常規(guī)涂片進行輔助確認。唾液酸苷酶是一種存在于溶酶體、細胞質(zhì)和細胞膜上的酶蛋白，研究表明其活性與BV密切相關。

本研究發(fā)現(xiàn)，1 000例標本中經(jīng)白帶常規(guī)濕片鏡檢檢出線索細胞與胺試驗均陽性的118例，用細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢出唾液酸酯酶陽性130例。常規(guī)鏡檢結果與細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢出結果一致的有118例，濕片鏡檢結果與細菌性陰道病四聯(lián)檢測法結果的符合率達90.76%。同時本研究發(fā)現(xiàn)，細菌性陰道病四聯(lián)檢測法檢查中過氧化氫陽性率為92.00%，唾液酸酶陽性率為13.00%，白細胞酯酶陽性率為41.00%，并且pH值陽性率為76.00%。本研究病例4項指標陽性率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。過氧化氫呈陽性的920例標本在白帶常規(guī)各級清潔度患者中均有分布，其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度陽性率分別為5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。這表明隨著患者清潔度惡化，過氧化氫陽性率也逐步提高。各清潔度病例中過氧化氫陽性率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。本研究也是在國內(nèi)首次報道廈門地區(qū)陰道炎患者過氧化氫陽性率高達92.00%，應引起臨床關注。多年來，對無癥狀陰道炎患者是否需要臨床干預治療存在一定爭議[8]。

本研究隨訪了幾位主診的婦產(chǎn)科醫(yī)生，對于如此高的過氧化氫陽性率，大部分婦產(chǎn)科醫(yī)生認為單項過氧化氫陽性的病患若無任何臨床癥狀，可暫不予以治療，留觀隨訪即可。目前本地區(qū)婦女人群中過氧化氫陽性率極高，發(fā)現(xiàn)可能與不良生活習慣等因素有關，諸如性生活頻率過度、內(nèi)褲與其他衣物同洗、盆浴、陰道沖洗、非經(jīng)期使用護墊，導致陰道優(yōu)勢菌群變化，過氧化氫乳酸桿菌減少，其他球菌增多。亦可能與該研究病例選取的南方潮濕春季病患有關，春季沿海地區(qū)濕冷氣候有利于各種陰道病原菌滋生生長。pH值的升高對內(nèi)部環(huán)境有嚴重的影響，可導致大量的線索細胞存在。加德納細菌黏附可削弱陰道上皮防御功能，讓有害細菌順勢進入陰道，最終可能導致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、反復盆腔炎等疾病[9]。目前醫(yī)學界統(tǒng)一認為，導致霉菌感染的關鍵因素也是細菌陰道感染[10-11]。BV的抗生素療法耐藥日益嚴重。臨床治療婦產(chǎn)科疾病的過程使用各種抗生素、滅滴蟲藥物，在殺菌殺蟲的同時也殺滅了乳酸桿菌，致使陰道微生態(tài)失衡，造成各種婦產(chǎn)科疾病復發(fā)甚至再次感染。有研究表明，經(jīng)過抗菌治療后用乳菌桿菌治療重建陰道微生態(tài)平衡，復發(fā)率遠遠低于單一的抗生素治療。鑒于此，靶向陰道菌群以恢復陰道健康的微生態(tài)療法越來越受到臨床和研究人員的關注。

目前已有較多文獻報道將益生菌用于治療BV。張瑞等[8]研究亦表明，益生菌是改善育齡期無癥狀BV預后安全、有效的措施。醫(yī)學界認為，陰道菌群的異常變化是臨床診斷最有價值的形態(tài)學研究指標[12]。BV Set試劑盒的過氧化氫指標亦可以應用于評估陰道微生態(tài)菌群是否恢復重建。細菌性陰道病四聯(lián)檢測法剛好從陰道酸堿環(huán)境、乳酸桿菌數(shù)量、是否存在陰道加德納菌感染及是否存在炎癥感染方面評估陰道微生態(tài)環(huán)境，有利于BV的防治。該試劑盒的使用還能有效彌補白帶常規(guī)檢測臨床取材問題、檢驗技師鏡檢水平差異導致的漏檢、誤診現(xiàn)象。為此提倡采用4項BV Set試劑盒檢查，提高BV診斷效果。

綜上所述，采用細菌性陰道病四聯(lián)檢測法能從陰道酸堿環(huán)境、乳酸桿菌數(shù)量、是否存在陰道加德納菌感染及是否存在炎癥感染方面評估陰道微生態(tài)環(huán)境，提高BV診斷效果，從而提高患者的生活質(zhì)量，為患者帶來益處，值得大力推廣。

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（編輯：許 琪）