胡躍世 李 征 李明林 楊立新 程雙蕾 陶林靜 王 陽

前列腺癌(PCa)好發(fā)于老年男性群體,多由前列腺上皮惡性增殖所致,早期可無明顯癥狀,在腫瘤進(jìn)展過程中可逐漸出現(xiàn)下尿路梗阻、盆腔不適、勃起功能障礙等多種癥狀,一旦腫瘤擴散或轉(zhuǎn)移至前列腺外,則臨床治療難度更大,會影響患者預(yù)后[1-2]。目前,手術(shù)為PCa的首選方案,及早切除病灶并于術(shù)后開展針對性放化療方案,能夠更好清除殘留的腫瘤細(xì)胞,延長患者生存時間[3-4]。但長期隨訪發(fā)現(xiàn),仍有部分患者術(shù)后存在較高復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險,會再次加重患者痛苦,并降低遠(yuǎn)期存活率。因此,還需尋找能夠評估腫瘤病情及預(yù)后的相關(guān)生物學(xué)標(biāo)志物,以便于實現(xiàn)腫瘤的精準(zhǔn)治療,改善整體預(yù)后。微小RNA-647(miR-647)、微小RNA-122(miR-122)均屬于非編碼小RNA,能參與抑癌基因與癌基因的表達(dá)來調(diào)控腫瘤的發(fā)生及發(fā)展[5]。組蛋白賴氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2D(KMT2D)也可參與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展[6]。但關(guān)于上述生物學(xué)標(biāo)志物在PCa中的表達(dá)及與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系尚不明確。鑒于此,本研究旨在分析PCa組織內(nèi)miR-647、miR-122、KMT2D與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取100例我院2019年至2021年收治的PCa患者作為研究對象,其中年齡55～86歲,平均年齡(65.89±4.24)歲;體重指數(shù)(BMI)18～28 kg/m2,平均BMI(24.25±1.63)kg/m2;腫瘤直徑1.8～5.5 cm,平均腫瘤直徑(3.25±0.34)cm。納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病理確診為PCa;均行手術(shù)為主的綜合治療;心肺功能正常;患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn);肝腎衰竭;存在重癥感染;凝血系統(tǒng)障礙。

1.2 方法

所有患者均開展前列腺根治手術(shù),術(shù)中采集腫瘤標(biāo)本及癌旁正常組織送檢。采用熒光定量PCR技術(shù)檢查組織內(nèi)miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平,先完成組織RNA提取,之后將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA,并稀釋至等量濃度,再配置反應(yīng)體系,之后應(yīng)用Primer 5.0軟件設(shè)計引物序列,之后繪制擴增曲線,計算miR-647、miR-122、KMT2D的相對含量。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平:比較腫瘤組織及癌旁正常組織內(nèi)miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平差異。(2)miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系:分析miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)與腫瘤分期、腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、微血管侵犯等多方面關(guān)系。(3)miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平與預(yù)后關(guān)系:所有患者均隨訪2年,統(tǒng)計患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況,比較復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)間差異。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平

腫瘤組織內(nèi)miR-647表達(dá)水平較癌旁正常組織低,miR-122、KMT2D表達(dá)水平較對照組低(P<0.05),見表1。

表1 兩組miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平對比

2.2 miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

腫瘤分期Ⅲ期、腫瘤直徑≥3 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有微血管侵犯患者miR-647表達(dá)水平低于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及無微血管侵犯患者,miR-122、KMT2D表達(dá)水平高于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及無微血管侵犯患者(P<0.05),見表2。

表2 miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系

2.3 miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系

100例患者術(shù)后隨訪2年,共出現(xiàn)24例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率為24.00%(24/100);復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者miR-647表達(dá)水平低于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者,miR-122、KMT2D表達(dá)水平較未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者高(P<0.05)。見表3。

表3 兩組miR-647、miR-122、KMT2D表達(dá)水平對比

3 討論

PCa病因復(fù)雜,臨床認(rèn)為在年齡、遺傳、基因改變等多種因素的影響下,可造成前列腺上皮細(xì)胞周期紊亂,并出現(xiàn)不可控增殖現(xiàn)象,最終形成腫瘤組織[7-8]。而PCa早期無明顯癥狀,進(jìn)展過程中出現(xiàn)尿頻、尿急等癥狀也易與其他良性前列腺疾病相混淆,不易被患者重視。但PCa侵襲性及轉(zhuǎn)移性強,腫瘤生長過程中可向前列腺外擴散,一旦未能得到及時診治,則可增加死亡風(fēng)險。手術(shù)為當(dāng)前首選治療方案,術(shù)后再輔以放化療等治療,可更好抑制殘留腫瘤細(xì)胞增殖,提高患者遠(yuǎn)期生存率。但惡性腫瘤的較為復(fù)雜,是一種由多基因、多因素相互作用介導(dǎo)的過程,即使經(jīng)過規(guī)范化治療后,仍有部分患者的預(yù)后偏差,易再次復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,降低生存質(zhì)量[9-10]。因此,還需尋找能夠更為精準(zhǔn)評估患者病情及預(yù)后的標(biāo)志物,為臨床治療提供新的方向,實現(xiàn)腫瘤的穩(wěn)定控制。

miRNA是一類非編碼單鏈小分子RNA,可結(jié)合靶基因mRNA的3'-非翻譯區(qū),實現(xiàn)靶基因表達(dá)的負(fù)反饋調(diào)節(jié),并能夠參與基因調(diào)控。miR-647則是miRNA家族重要成員,其腫瘤的調(diào)控中能夠起到抑癌作用,其處于高表達(dá)狀態(tài)時嫩能夠靶向調(diào)控下游基因表達(dá)抑制腫瘤的生長、分化等多個過程,從而阻止腫瘤增殖、擴散或轉(zhuǎn)移,阻斷腫瘤進(jìn)展[11]。反之,其處于低表達(dá)狀態(tài)時,則腫瘤細(xì)胞增殖及分化活性明顯增強。miR-122也是miRNA家族成員,在PCa中存在癌基因作用,其處于高表達(dá)狀態(tài)時,則有助于腫瘤的生長、分化及擴散,能夠促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。KMT2D在調(diào)控胚胎發(fā)育、組織分化及代謝等方面具有重要作用,臨床認(rèn)為其處于沉默狀態(tài)是,會影響體內(nèi)多種基因增強子活性,使得基因表達(dá)受到抑制,從而干擾PI3K/AKT通路,降低腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲及遷移活性,最終抑制腫瘤的進(jìn)展[12]。而其處于高表達(dá)狀態(tài)時,則可起到反向作用,利于腫瘤的擴散、轉(zhuǎn)移及侵襲。本研究結(jié)果顯示,腫瘤組織內(nèi)miR-647表達(dá)水平低于癌旁正常組織,miR-122、KMT2D表達(dá)水平低于對照組;腫瘤分期Ⅲ期、腫瘤直徑≥3 cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及有微血管侵犯患者miR-647表達(dá)水平低于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及無微血管侵犯患者,miR-122、KMT2D表達(dá)水平高于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤直徑<3 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及無微血管侵犯患者;100例患者術(shù)后隨訪2年,共出現(xiàn)24例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率為24.00%(24/100);復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者miR-647表達(dá)水平低于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者,miR-122、KMT2D表達(dá)水平高于未復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者;提示miR-647在PCa中表達(dá)水平低,miR-122、KMT2D表達(dá)水平高,均與臨床病理特征及預(yù)后關(guān)系密切,或可作為臨床治療新靶點。分析原因為,當(dāng)miR-647處于低表達(dá),miR-122、KMT2D處于高表達(dá)狀態(tài)時,則能夠提高腫瘤的分化及侵襲能力,使得腫瘤迅速進(jìn)展,故患者腫瘤分期偏高,易伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等現(xiàn)象,從而增加臨床治療難度,導(dǎo)致預(yù)后偏差,遠(yuǎn)期易出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移現(xiàn)象,降低整體生存率。

綜上所述,miR-647、miR-122、KMT2D在PCa中存在不同表達(dá),但均與臨床病理特征關(guān)系密切,且會影響患者預(yù)后,需加以重視。