【摘要】目的 研究直方圖用于乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少（EDTA-PTCP）輔助診斷的價值，為臨床提供參考。方法 選取2022年1月至11月欽州市中醫(yī)醫(yī)院收治的316例血小板計數(shù)（PLT）水平減少患者作為研究對象進行回顧性分析，根據(jù)是否為EDTA-PTCP將患者分為觀察組（24例，EDTA-PTCP）和對照組（292例，真性血小板減少）?；颊呔M行EDTA抗凝和檸檬酸鹽抗凝檢測，比較兩組患者PLT、白細胞計數(shù)（WBC）及血小板聚集體計數(shù)水平，記錄直方圖異常征象，分析直方圖在EDTA-PTCP輔助診斷中的價值。結(jié)果 EDTA抗凝檢測顯示，觀察組患者血小板聚集體計數(shù)顯著高于對照組（Plt;0.05）。觀察組患者血小板聚集報警、血小板直方圖右側(cè)尾部上翹及白細胞直方圖前端異常小峰發(fā)生率均顯著高于對照組（均Plt;0.05）。受試者操作特征（ROC）曲線分析結(jié)果顯示，血小板聚集體計數(shù)、血小板聚集報警、血小板直方圖右側(cè)尾部上翹及白細胞直方圖前端異常小峰對診斷EDTA-PTCP具有一定應(yīng)用價值（Plt;0.05）。血小板聚集體計數(shù)與直方圖異常征象聯(lián)診斷EDTA-PTCP的曲線下面積（AUC）為0.863（SE=0.065，P=0.002，95%CI=0.737～0.990），敏感度和特異度分別為0.875和0.762。結(jié)論 直方圖有助于EDTA-PTCP的輔助診斷，直方圖異常征象與血小板聚集體計數(shù)聯(lián)合診斷EDTA-PTCP準(zhǔn)確性高。

【關(guān)鍵詞】直方圖；乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少；真性血小板減少；診斷價值

【中圖分類號】R446 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】2096-2665.2023.09.0109.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2023.09.035

乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少（EDTA-dependent pseudothrombocytopenia，EDTA-PTCP）是指因使用EDTA抗凝劑引起的非凝血機制障礙的血小板減少現(xiàn)象，雖然EDTA-PTCP無出血風(fēng)險，但可能引起臨床誤診，影響后續(xù)治療和患者預(yù)后[1]。近年來，隨著EDTA抗凝劑的廣泛應(yīng)用，EDTA-PTCP現(xiàn)象增多，逐漸引起臨床重視[2]。EDTA-PTCP在全自動血細胞分析儀上檢測，可見血小板計數(shù)（PLT）假性降低，這易將EDTA-PTCP誤診為真性血小板減少。直方圖能描繪血細胞體積分布，既往已有報道證實血小板直方圖異常與PLT水平相關(guān)[3]，但有關(guān)其在EDTA-PTCP診斷中價值的報道較少。本研究對316例PLT水平減少患者臨床資料進行回顧性分析，探討直方圖對EDTA-PTCP的輔助診斷價值，以供臨床參考，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2022年1月至11月欽州市中醫(yī)醫(yī)院收治的316例PLT水平減少患者作為研究對象進行回顧性分析，根據(jù)是否為EDTA-PTCP將患者分為觀察組（24例，EDTA-PTCP）和對照組（292例，真性血小板減少）。觀察組患者中男性16例，女性8例；年齡24～64歲，平均年齡（48.63±12.72）歲；身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）19～26 kg/m2，平均BMI（21.95±1.74）kg/m2。對照組患者中男性184例，女性108例；年齡27～65歲，平均年齡（49.15±13.09）歲；BMI 18～27 kg/m2，平均BMI（22.13±1.82）kg/m2。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)欽州市中醫(yī)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國成人血小板減少癥診療專家共識》[4]有關(guān)EDTA-PTCP或真性血小板減少的診斷標(biāo)準(zhǔn)，EDTA-PTCP：有EDTA抗凝劑使用史，PLTlt;100×109/L，更換檸檬酸鹽抗凝管取靜脈血后檢測PLT正常[（100～400）×109/L]；真性血小板減少：乙二胺四乙酸二鉀（EDTK-K2）與檸檬酸鹽抗凝管監(jiān)測均可見PLTlt;100×109/L；②年齡gt;18歲，且臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期或哺乳期患者；②合并類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征及甲亢等自身免疫性疾病者；③合并惡性腫瘤、溶血性貧血及白細胞減少癥等其他血液系統(tǒng)疾病者。

1.2 檢測方法 分別采用EDTA-K2真空采血管（瀏陽市三力醫(yī)用科技發(fā)展有限公司，湘械注準(zhǔn)20152220045，批號：220805）和檸檬酸鈉真空采血管（成都瑞琦醫(yī)療科技有限責(zé)任公司，川械注準(zhǔn)20192220020，批號：2022080229）抽取患者空腹肘靜脈血1.6 mL。采用全自動血細胞分析儀[希森美康株式會社，國食藥監(jiān)械（進）字2012第2102484號，型號：XN-10（B3），（B4）]進行檢查，記錄全血PLT、白細胞計數(shù)（WBC）及血小板聚集體計數(shù)水平。根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制直方圖，記錄直方圖異常征象。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較兩組患者血液指標(biāo)水平。指標(biāo)包括全血PLT、WBC及血小板聚集體計數(shù)。②比較兩組患者直方圖異常征象。指標(biāo)包括血小板聚集報警、血小板直方圖右側(cè)尾部上翹及白細胞直方圖前端異常小峰。③分析直方圖異常征象與血小板聚集體計數(shù)診斷EDTA-PTCP的價值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料以（x）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數(shù)資料以[例（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗；預(yù)測價值采用受試者操作特征（ROC）曲線分析，結(jié)果以曲線下面積（AUC）表示，以AUCgt;0.75為準(zhǔn)確性高。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血液指標(biāo)水平比較 EDTA抗凝檢測顯示，兩組患者PLT和WBC水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05）；觀察組患者血小板聚集體計數(shù)水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）。檸檬酸鹽抗凝檢測顯示，觀察組患者PLT水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）；兩組患者WBC和血小板聚集體計數(shù)水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），見表1。

2.2 兩組患者直方圖異常征象比較 EDTA抗凝檢測顯示，觀察組患者血小板聚集報警、血小板直方圖右側(cè)尾部上翹及白細胞直方圖前端異常小峰發(fā)生率均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均Plt;0.05）。檸檬酸鹽抗凝檢測顯示，兩組患者血小板聚集報警、血小板直方圖右側(cè)尾部上翹及白細胞直方圖前端異常小峰發(fā)生率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均Pgt;0.05），見表2。

2.3 直方圖異常征象與血小板聚集體計數(shù)診斷EDTA-PTCP的預(yù)測價值分析 分別以血小板聚集體計數(shù)、直方圖異常征象及聯(lián)合檢測為檢驗變量，以是否為EDTA-PTCP為狀態(tài)變量，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示血小板聚集體計數(shù)、血小板聚集報警、血小板直方圖右側(cè)尾部上翹及白細胞直方圖前端異常小峰對診斷EDTA-PTCP具有一定應(yīng)用價值（Plt;0.05），見圖1。血小板聚集體計數(shù)與直方圖異常征象聯(lián)合預(yù)測EDTA-PTCP的AUC為0.863（SE=0.065，95%CI=0.737～0.990，P=0.002），敏感度和特異度分別為0.875和0.762，見表3。

3 討論

真性血小板減少是因血小板生成障礙或破壞消耗過多引起，而假性血小板減少則是因EDTA、肝素等抗凝劑引起的血小板聚集異常，血小板體積變大，導(dǎo)致機器檢測超過設(shè)定閾值所致，其中以EDTA-PTCP多見[5]。EDTA-PTCP是由于用EDTA抗凝全血后血小板聚集而導(dǎo)致用血液細胞分析儀檢測血小板數(shù)量時，發(fā)生血小板數(shù)量假性減少的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象的發(fā)生是由于陽離子螯合劑EDTA導(dǎo)致了血

小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa構(gòu)象發(fā)生改變，暴露出抗原表位，從而可以被自身抗體所識別而造成的，其將給臨床造成很大的困擾，同時也給血細胞分析儀檢測血小板造成極大干擾[6]。EDTA-PTCP經(jīng)檸檬酸鹽抗凝檢查卻未見PLT異常，也無明顯血小板聚集異常現(xiàn)象。因而，EDTA-PTCP本身無顯著臨床病理意義，部分健康人群也可見EDTA-PTCP[7]。但若不能及時鑒別篩查，不僅可增加患者精神心理壓力，還可造成誤診，影響醫(yī)療決策，導(dǎo)致過度醫(yī)療，增加醫(yī)療事故風(fēng)險[8]。

直方圖分別以體積和相對頻數(shù)作為橫縱坐標(biāo)，能反映血小板體積大小和異質(zhì)性[9]。正常情況下，白細胞直方圖存在小細胞峰、中間細胞峰及大細胞峰，其中小細胞峰高陡，中間細胞峰平坦，大細胞峰低寬。血小板直方圖是呈偏態(tài)分布的單個高峰，并帶有擬合曲線[10]。在EDTA-PTCP發(fā)生后，血小板抗體與血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa結(jié)合[11]，使血小板大量異常聚集，且體積偏大，在進行檢測時可能將聚集體誤認為是白細胞，造成白細胞計數(shù)假性升高，因而在白細胞直方圖前端可見異常小峰[12]。黃亮等[13]也認為EDTA與血清免疫球蛋白（Ig）相互作用，并發(fā)生非特異性結(jié)合，出現(xiàn)血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，造成檢測時將血小板誤診為白細胞，進而出現(xiàn)EDTA-PTCP。另外，隨著血小板聚集的發(fā)生發(fā)展，大體積血小板數(shù)量增加，使血小板體積異常分布[14]，這使血小板直方圖無法擬合曲線，而表現(xiàn)為尾端上翹。此外，檢測儀器發(fā)生血小板聚集報警時，應(yīng)引起重視，警惕EDTA-PTCP的發(fā)生，這對于EDTA-PTCP的早期篩查具有重要意義[15]。本研究也顯示，血小板聚集體計數(shù)診斷EDTA-PTC的敏感度為0.750。周東銘等[16]還認為血小板聚集程度與白細胞直方圖前端峰值相關(guān)，這與本研究結(jié)果一致。但也應(yīng)注意部分非EDTA-PTCP患者可見白細胞直方圖前端異常小峰，造成誤診[17]。因而，單純直方圖征象診斷也存在一定局限性。

除直方圖異常征象外，臨床也有研究將血小板聚集體計數(shù)用于EDTA-PTCP的診斷[18]，且血小板聚集體計數(shù)實現(xiàn)量化，兩者結(jié)合將顯著提高EDTA-PTCP的檢出率和診斷準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果也顯示，聯(lián)合預(yù)測的AUC為0.863，提示直方圖用于EDTA-PTCP輔助診斷具有可行性。直方圖配合血小板聚集體計數(shù)方案排除了人為因素影響[19]，且操作較為簡便，檢查速度快，因而其在EDTA-PTCP鑒別診斷中具有較大應(yīng)用潛力。但本研究為回顧性研究，且樣本量有限，結(jié)論還有待今后進一步驗證。

綜上所述，直方圖有助于EDTA-PTCP的輔助診斷，直方圖異常征象與血小板聚集體計數(shù)聯(lián)合診斷EDTA-PTCP準(zhǔn)確性高。

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