【摘要】目的 探討p53蛋白在乳腺癌不同病理學(xué)特征患者中的表達及其與不同病理學(xué)特征的相關(guān)性。方法 回顧性分析2017年1月至2022年6月青島市城陽區(qū)人民醫(yī)院收治的80例乳腺癌患者的臨床資料。采用免疫組化檢測乳腺癌組織（浸潤性導(dǎo)管癌、浸潤性小葉癌、具有髓樣特征的癌、黏液癌及導(dǎo)管原位癌）及癌旁正常組織中p53蛋白的表達水平，分析p53蛋白表達與乳腺癌患者不同病理學(xué)特征（腫瘤大小、分子亞型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織學(xué)分級）的關(guān)系；通過Spearman秩相關(guān)分析p53蛋白表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級的相關(guān)性。結(jié)果 p53蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率顯著高于癌旁正常組織（Plt;0.05）；p53蛋白陽性表達及陰性表達中年齡、腫瘤大小、分子亞型比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），p53蛋白陽性表達中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級Ⅲ級占比高于p53蛋白陰性表達（Plt;0.05）；經(jīng)Spearman秩相關(guān)性分析顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級與p53蛋白陽性表達呈顯著正相關(guān)（Plt;0.05），與p53蛋白陰性表達無顯著相關(guān)性（Pgt;0.05）。結(jié)論 p53蛋白在乳腺癌組織中呈高表達，其水平與乳腺癌的組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】乳腺癌；病理學(xué)特征；；免疫組織化學(xué)；p53蛋白表達

【中圖分類號】R737.9 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】2096-2665.2023.09.0014.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2023.09.004

Observation and analysis of p53 protein expression in tissue of breast cancer patients with different pathological features

LI Bo

（Pathology Department， Qingdao Chengyang People’s Hospital， Qingdao，266109， Shandong， China）

【Abstract】Objective To explore the expression of p53 protein in different pathological features of breast cancer patients and its correlation with different pathological features. Methods The clinical data of 80 breast cancer patients treated in Qingdao Chengyang People’s Hospital "from January 2017 to June 2022 were retrospectively analyzed. Immunohistochemistry was used to detect the expression level of p53 protein in breast cancer tissue （invasive ductal carcinoma， invasive lobular carcinoma， carcinoma with medullary features， mucinous carcinoma， ductal carcinoma in situ） and adjacent normal tissue， and the relationship between p53 protein expression and different pathological features （tumor size， molecular subtype， lymph node metastasis， histological grade） of breast cancer patients were analyzed. Spearman rank correlation analysis was used to test the correlation between p53 protein expression and lymph node metastasis and histological grade. Results The positive expression rate of p53 protein in breast cancer tissues was significantly higher than that in normal adjacent tissues （Plt;0.05）. There was no significant difference in age， tumor size and molecular subtype between p53 protein positive expression and p53 protein negative expression （Pgt;0.05）. The proportion of lymph node metastasis and histological grade Ⅲ in p53 protein positive expression were higher than that in p53 protein negative expression （Plt;0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that lymph node metastasis and histological grade were significantly positively correlated with p53 protein positive expression （Plt;0.05）， but not significantly correlated with p53 protein negative expression （Pgt; 0.05）. Conclusion p53 protein is highly expressed in breast cancer tissue， and its level is related to the histological grade and lymphatic metastasis of breast cancer.

【Keywords】Breast cancer; Pathological features; Immunohistochemistry; p53 Protein expression

乳腺癌是常見的癌癥之一，是女性癌癥相關(guān)死亡的主要原因，在我國，乳腺癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，每年有30余萬女性被診斷出乳腺癌[1]。盡管近年來包括手術(shù)、放療、化療、免疫治療和靶向治療在內(nèi)的治療方法的改進使死亡率下降，但診斷為晚期乳腺癌的患者的預(yù)后仍然較差[2]。隨著對腫瘤基因的不斷研究，發(fā)現(xiàn)許多癌基因和抑癌基因參與了乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展[3]。p53是腫瘤抑制基因，也是人類癌癥中最常見的突變基因，p53蛋白腫瘤抑制因子在癌癥和感染性疾病中起著關(guān)鍵作用，臨床建議在腫瘤治療中使用免疫治療方法，并且研究已經(jīng)證實p53抗體在癌癥診斷和治療中的作用[4]。相關(guān)研究表明，p53突變與乳腺癌中更具侵襲性的疾病和較低的總體生存率相關(guān)[5]?；诖?，本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測p53蛋白在乳腺癌中的表達情況，并探討p53蛋白表達與不同病理特征之間的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2017年1月至2022年6月青島市城陽區(qū)人民醫(yī)院收治的80例乳腺癌患者的臨床資料?；颊呔鶠榕?；年齡21～62歲，平均年齡（48.16±6.93）歲；病變部位：左側(cè)乳房32例，右側(cè)乳房48例；組織類型：浸潤性導(dǎo)管癌55例，浸潤性小葉癌5例，具有髓樣特征的癌11例，黏液癌5例，導(dǎo)管內(nèi)癌4例；腫瘤最大直徑：≤3 cm者30例，gt;3 cm者50例；組織學(xué)分級[6]：Ⅰ級26例，Ⅱ級31例，Ⅲ級23例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例；分子亞型：管腔A（Luminal A）型20例，管腔B（Luminal B）型15例，人類表皮生長因子受體-2（Her-2）過表達型19例，基底樣（Basical-like）型26例。本研究經(jīng)青島市城陽區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《乳腺癌內(nèi)分泌治療的基本共識》[7]中乳腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診為乳腺癌；②術(shù)前未接受過化療或放療；③均為初診原發(fā)乳腺癌；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴重心腦血管疾病者；②伴有嚴重肝、腎功能障礙者；③合并其他惡性腫瘤者；④妊娠期或哺乳期婦女；⑤患有甲狀腺功能亢進癥或糖尿病等內(nèi)分泌疾病者；⑥伴有嚴重泌尿系統(tǒng)疾病者；⑦伴有認知功能障礙者。

1.2 檢驗方法 收集所有患者癌組織及癌旁正常組織，標(biāo)本經(jīng)10%甲醛溶液（湖北興銀合化工有限責(zé)任公司）固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，采用p53蛋白試劑盒（武漢艾迪抗生物科技）行免疫組化法染色，嚴格按照說明書實驗步驟進行實驗操作。p53蛋白陽性切片作為陽性對照組，以磷酸鹽緩沖液（PBS，默克公司）代替一抗作為陰性對照組。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較p53蛋白在乳腺癌及癌旁正常組織中的表達情況。陽性結(jié)果呈棕褐色或棕黃色，p53蛋白陽性物質(zhì)主要定位于細胞核中。根據(jù)切片中陽性細胞與全部細胞占比將其表達結(jié)果[8]分為，陰性：陽性細胞數(shù)lt;10%；弱陽性：陽性細胞數(shù)10%～50%；陽性：陽性細胞數(shù)51%～75%；強陽性：陽性細胞數(shù)gt;75%。陽性表達率=（弱陽性+陽性+強陽性）例數(shù)/總例數(shù)×100%。②分析p53蛋白在乳腺癌組織中的表達與病理學(xué)特征的關(guān)系。病理學(xué)特征包括年齡、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤最大直徑及分子亞型。③分析淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級與p53蛋白表達的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以[例（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，等級資料比較采用秩和檢驗；采用Spearman秩相關(guān)檢驗進行相關(guān)性分析。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 p53蛋白在乳腺癌及癌旁正常組織中的表達比較 p53蛋白在乳腺癌組織中陽性表達率為57.50%，在癌旁正常組織中為15.00%，乳腺癌組織中的p53蛋白陽性表達率顯著高于癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05），見表1、圖1、圖2。

2.2 不同病理學(xué)特征患者p53蛋白在乳腺癌組織中的陽性和陰性表達情況比較 p53蛋白陽性表達及陰性表達中年齡、腫瘤大小、分子亞型比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），p53蛋白陽性表達淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級Ⅲ級占比高于p53蛋白陰性表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05），見表2。

2.3 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級與p53蛋白表達的相關(guān)性分析 Spearman秩相關(guān)性分析顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級與p53蛋白陽性表達呈顯著正相關(guān)性（Plt;0.05），與p53蛋白陰性表達無顯著相關(guān)性（Pgt;0.05），見表3。

3 討論

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，是由各種癌癥因素引起的乳腺上皮細胞不受控制地擴散的現(xiàn)象。乳腺癌早期癥狀表現(xiàn)為乳房腫塊、乳頭溢液及腋窩淋巴結(jié)腫大等癥狀，晚期可因癌細胞發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，出現(xiàn)多器官病變，直接威脅患者生命[9]。乳腺癌可分為浸潤性導(dǎo)管癌、浸潤性小葉癌、具有髓樣特征的癌、黏液癌及導(dǎo)管原位癌，乳腺癌的病因尚未明確，大多數(shù)乳腺癌的早期癥狀并不明顯，導(dǎo)致診治不及時[10]。因此，高危人群應(yīng)強調(diào)乳腺癌篩查，定期乳房自查和臨床檢查，做到早發(fā)現(xiàn)早治療。相關(guān)研究表明，多種腫瘤分子標(biāo)記物的聯(lián)合檢測可為醫(yī)生在乳腺癌臨床治療中提供重要參考[11]。p53是一種腫瘤抑制因子，在細胞周期停滯中起重要作用，p53蛋白可以通過激活P21和P27等各種靶基因的轉(zhuǎn)錄來發(fā)揮其作為腫瘤抑制因子的抗腫瘤作用[12]。p53蛋白通過細胞周期停滯、衰老和凋亡等不同的機制在抑制癌細胞增殖中發(fā)揮關(guān)鍵作用，可誘導(dǎo)細胞凋亡、細胞周期停滯、衰老和其他生物過程以介導(dǎo)癌細胞對治療的反應(yīng)。

p53基因可分為突變基因和野生基因，突變型p53基因是一種抑癌基因，可抑制癌細胞的分化和轉(zhuǎn)移，而野生型p53基因則是一種致癌基因，因其半衰期短及濃度低從而通常使其難以測量，因此在本實驗中檢測的p53基因為突變基因。目前臨床認為，p53蛋白具有誘導(dǎo)細胞周期阻滯、DNA修復(fù)和促進細胞凋亡的作用[13]。本研究結(jié)果顯示，p53蛋白在乳腺癌中陽性表達率為57.50%，在癌旁正常組織中為15.00%，p53蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率顯著高于癌旁正常組織，p53蛋白陽性表達組在組織學(xué)分級Ⅲ級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移占比較高，且p53蛋白陽性表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)性，說明p53基因在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中具有一定作用，與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，可作為評估乳腺細胞癌變及預(yù)后的一項檢測指標(biāo)。相關(guān)研究顯示，p53蛋白在乳腺癌癌組織中呈高表達，且與其臨床各病理特征及預(yù)后有關(guān)[14]。雖然與本研究具有部分差異，但本研究中p53蛋白陽性表達率在腫瘤gt;3 cm的患者中占比高，而組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能是由于樣本量較少、檢測方式差異所致。

乳腺癌患者的大多數(shù)死亡與癌細胞轉(zhuǎn)移有關(guān)。轉(zhuǎn)移形成是一個復(fù)雜的過程，與原發(fā)腫瘤內(nèi)的細胞可塑性和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化密切相關(guān)。相關(guān)研究顯示，在乳腺癌細胞中，突變型p53蛋白能夠抑制上皮標(biāo)記物，例如E-鈣黏蛋白，并誘導(dǎo)一些調(diào)節(jié)間充質(zhì)表型的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，例如Twist、ZEB-1和ZEB-2等，從而使突變p53提高乳腺癌細胞的轉(zhuǎn)移潛能[15]。另一項研究顯示，與攜帶野生型p53基因的乳腺癌細胞和組織相比，攜帶突變型p53基因的乳腺癌細胞和組織對這些藥物具有更高的耐藥性[16]。因此，突變型p53基因可作為乳腺癌的藥物靶點。

綜上所述，乳腺癌患者p53蛋白表達與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)性，說明乳腺癌癌組織中p53蛋白陽性率越高，分化程度越差，越容易發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移。但目前對乳腺癌與p53蛋白表達的研究相關(guān)性仍然較少，還需進一步研究。

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