黃瑞芬,張青虎,蒙炳超,張 麗,冉 江

1.羅甸縣沫陽(yáng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心,貴州 羅甸 550100 2.羅甸縣養(yǎng)殖發(fā)展中心,貴州 羅甸 550100 3.黔南州養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中心,貴州 都勻 558000 4.羅甸縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì),貴州 羅甸 550100 5.貴州省畜牧獸醫(yī)研究所,貴州 貴陽(yáng) 550005

0 引言

肉牛血液原蟲(chóng)病是一類由巴貝斯蟲(chóng)科和泰勒科單細(xì)胞寄生蟲(chóng)寄生于血液紅細(xì)胞引起的疾病,該病原可破壞肉牛紅細(xì)胞,導(dǎo)致血液循環(huán)障礙、生長(zhǎng)性能下降、貧血、黃疸,嚴(yán)重者會(huì)因血液性缺氧死亡,是影響?zhàn)B牛業(yè)經(jīng)濟(jì)效益的重要因素[1]。貴州省黔南布依族苗族自治州地處東亞季風(fēng)區(qū),屬亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候,長(zhǎng)年溫暖潮濕,非常有利于血液原蟲(chóng)傳播媒介——蜱蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖[2]。因此,對(duì)貴州黔南肉牛血液原蟲(chóng)的感染情況進(jìn)行調(diào)查,對(duì)預(yù)防及控制貴州寄生蟲(chóng)病有重要意義。自2012年馮杰 等[3]對(duì)貴州規(guī)模場(chǎng)肉牛血液寄生蟲(chóng)感染的初步調(diào)查及2019年圖雅 等[4]對(duì)貴州關(guān)嶺牛和安格斯牛血液原蟲(chóng)的感染情況調(diào)查以來(lái),近期未見(jiàn)有關(guān)貴州黔南地區(qū)肉牛血液原蟲(chóng)感染的調(diào)查報(bào)道。

近年來(lái),肉牛養(yǎng)殖業(yè)隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人們飲食結(jié)構(gòu)的改善而得到了較快的發(fā)展,肉牛養(yǎng)殖過(guò)程的一些傳染病、內(nèi)外科病、中毒性及營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病也得到重視并形成防治措施[5-6],但對(duì)肉牛血液原蟲(chóng)病研究報(bào)道較少,為了解貴州黔南地區(qū)肉牛血液原蟲(chóng)的種類、感染情況、分布特征,本研究于2022—2023年對(duì)298頭肉牛進(jìn)行血液涂片染色鏡檢鑒定蟲(chóng)體調(diào)查,建立地區(qū)血液原蟲(chóng)監(jiān)測(cè)庫(kù),以期為肉牛血液原蟲(chóng)病的預(yù)防及控制等綜合防治措施提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要儀器及試劑

主要儀器及試劑包括:邁時(shí)迪生物光學(xué)顯微鏡MSD701、載玻片、蓋玻片、甲醇固定液、姬姆薩染色液、美藍(lán)染色液、瑞氏染色液、無(wú)菌采血管液、染色缸、冰箱。

1.2 試驗(yàn)樣品采集

選擇貴州黔南地區(qū)規(guī)模化肉牛養(yǎng)殖場(chǎng)和放牧式散養(yǎng)戶肉牛群進(jìn)行牛頸靜脈無(wú)菌采血采集,對(duì)每場(chǎng)和每戶的肉牛按1～6月齡犢牛、1～2歲肉牛、3歲以上肉牛這3個(gè)生長(zhǎng)階段進(jìn)行血液樣品收集,現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行單層紅細(xì)胞血推片制片保存待檢,共采集298份血液樣品涂片。

1.3 樣品檢測(cè)方法

1.3.1 血液涂片染色法

血液涂片樣品經(jīng)自然干燥后,甲醇固定液固定5 min,參照寄生蟲(chóng)學(xué)檢測(cè)技術(shù)[7],采用美藍(lán)染色法、姬姆薩染色法或瑞氏染色法對(duì)血液涂片的進(jìn)行染色,晾干等待鏡檢鑒定原蟲(chóng)有無(wú)及種類。

1.3.2 鏡檢和圖片采集

采用生物光學(xué)顯微鏡在高倍鏡下觀察染色后的血涂片,并隨機(jī)采集3個(gè)不同視野的高清圖片。

1.3.3 數(shù)據(jù)記錄

對(duì)圖片上紅細(xì)胞數(shù)總數(shù)、正常紅細(xì)胞數(shù)及被感染的紅細(xì)胞數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù),做好記錄。

1.4 寄生蟲(chóng)的種屬鑒定

根據(jù)檢出的蟲(chóng)體形態(tài)、位置、大小、染色質(zhì)團(tuán)等,判定有無(wú)血液原蟲(chóng),并依據(jù)相關(guān)資料[8-9]和參考王光雷的蟲(chóng)種鑒定方法[10]進(jìn)行血液原蟲(chóng)的分類種屬鑒定并記錄。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用SPSS 25.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)算血液原蟲(chóng)感染強(qiáng)度、感染率及規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶肉牛感染情況的差異性分析。

感染強(qiáng)度(%)=感染樣品3個(gè)視野感染紅細(xì)胞數(shù)/感染樣品3個(gè)視野紅細(xì)胞總數(shù)×100%;感染率(%)=感染樣品數(shù)/采集樣品總數(shù)×100%。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 肉牛血液原蟲(chóng)感染情況

本次調(diào)查貴州黔南地區(qū)298頭肉牛血液原蟲(chóng)感染情況,并進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,血液原蟲(chóng)感染率為37.9%,其中規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)感染率為32.7%,散養(yǎng)戶感染率為48.5%(見(jiàn)表1),散養(yǎng)戶肉牛感染血液原蟲(chóng)高于規(guī)模場(chǎng),差異性顯著(P<0.05)。血液原蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度為9.82%,其中規(guī)模場(chǎng)肉牛血液原蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度為6.33%,散養(yǎng)戶肉牛血液原蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度為13.19%。不同規(guī)模場(chǎng)或不同區(qū)域的放牧散養(yǎng)戶肉牛血液原蟲(chóng)的感染強(qiáng)度差異較大,感染強(qiáng)度最小為2.11%,最大為25.64%。

血液原蟲(chóng)感染的種類主要有雙芽巴貝斯蟲(chóng)、大巴貝斯蟲(chóng)、牛邊緣邊蟲(chóng)、瑟氏泰勒蟲(chóng)、環(huán)形泰勒蟲(chóng)5種,結(jié)果見(jiàn)表2所示,雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染率最高(39.8%),其次是大巴貝斯蟲(chóng)(29.2%),牛邊緣邊蟲(chóng)、瑟氏泰勒蟲(chóng)、環(huán)形泰勒蟲(chóng)感染率分別為15.9%、14.2%、11.5%。同時(shí),根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知,部分肉牛存在血液原蟲(chóng)多重感染的情況。

表2 血液原蟲(chóng)感染的種類及檢出率

2.2 不同月份肉牛血液原蟲(chóng)感染情況

通過(guò)對(duì)該地區(qū)肉牛2022年1—12月血液原蟲(chóng)感染情況分析,4—9月份為感染高峰期,感染率達(dá)37.9%,其他冬春季節(jié)的月份感染率較低(見(jiàn)表3)。結(jié)合該地區(qū)氣候環(huán)境因素,4—9月份為血液原蟲(chóng)傳播媒介之一蜱蟲(chóng)的繁殖活躍期,說(shuō)明血液原蟲(chóng)的感染率與蜱蟲(chóng)的活躍度呈正相關(guān)。

表3 2022年1—12月肉牛感染血液原蟲(chóng)情況

2.3 肉牛血液原蟲(chóng)感染與其各生長(zhǎng)階段的關(guān)系

不同生長(zhǎng)階段的機(jī)體性能和飼養(yǎng)管理不同,肉牛感染血液原蟲(chóng)種類與感染率也不相同,根據(jù)本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)(見(jiàn)表4)分析可知,日齡越小的肉牛感染率越高,感染的原蟲(chóng)種類也越多。其中,1歲以內(nèi)犢牛感染率達(dá)23.2%,其次是1～2歲肉牛感染率為12.7%,3歲以上肉牛感染率為2.0%。

表4 肉牛血液原蟲(chóng)感染與其各生長(zhǎng)階段的關(guān)系

2.4 肉牛血液原蟲(chóng)多重感染情況

本次采集的298份血液原蟲(chóng)樣品檢測(cè)中共有12份為混合感染,混合感染率為4.0%,通過(guò)分析表3及表4數(shù)據(jù)可知,肉牛血液原蟲(chóng)多重感染情況以雙芽巴貝斯蟲(chóng)和大巴貝斯蟲(chóng)同時(shí)感染類型為主,1歲以內(nèi)犢牛多重感染率較高,多重感染占該生長(zhǎng)階段感染率14.49%,其次是1～2歲肉牛,多重感染占該生長(zhǎng)階段感染率5.3%,3歲以上肉牛未發(fā)現(xiàn)多重感染情況(見(jiàn)圖1)。

圖1 肉牛在不同生長(zhǎng)階段多重感染血液原蟲(chóng)的情況

3 討論

本研究對(duì)貴州黔南地區(qū)規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場(chǎng)及散養(yǎng)戶肉牛采集的298份血液樣品涂片染色進(jìn)行血液原蟲(chóng)感染情況調(diào)查,結(jié)果顯示該地區(qū)肉?？偢腥韭蕿?7.9%,該結(jié)果比2012年馮杰 等[3]調(diào)查貴州規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)肉牛的血液原蟲(chóng)檢出率(76.93%)低,比2019年圖雅 等[4]調(diào)查貴州關(guān)嶺地區(qū)關(guān)嶺牛感染率63.33%及安格斯牛感染率47.06%低,分析其原因可能與本次調(diào)查的時(shí)間、地區(qū)差異有關(guān),同時(shí)也與養(yǎng)殖場(chǎng)/戶加強(qiáng)滅蜱、積極藥物預(yù)防等措施有關(guān)。

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)雙芽巴貝斯蟲(chóng)在該地區(qū)是感染率最高的蟲(chóng)種,總感染率為39.8%,其次是大巴貝斯蟲(chóng)(29.2%)。雙芽巴貝斯蟲(chóng)主要由蜱蟲(chóng)叮咬傳播,感染雙芽巴貝斯蟲(chóng)的雌蜱,可以通過(guò)卵將病原體傳給它們的幼蜱,甚至可以在蜱體內(nèi)傳遞、保存達(dá)3個(gè)世代之久。因此,幼蜱開(kāi)始吸血時(shí),就能夠使牛感染牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)病,1年內(nèi)可暴發(fā)數(shù)次,預(yù)防雙芽巴貝斯蟲(chóng)病的方法是盡量減少野外放牧,以舍飼為主,同時(shí)注意滅蜱,改善飼養(yǎng)管理水平,使用藥物進(jìn)行預(yù)防并及時(shí)治療。

對(duì)該地區(qū)肉牛2022年1—12月血液原蟲(chóng)感染情況分析,4—9月為感染高峰期,感染率達(dá)37.9%,冬春季節(jié)的感染率較低,結(jié)合該地區(qū)氣候環(huán)境因素,4—9月為血液原蟲(chóng)傳播媒介之一蜱蟲(chóng)的繁殖活躍期,作為主要感染源的5種血液原蟲(chóng)均可通過(guò)蜱蟲(chóng)進(jìn)行傳播,說(shuō)明血液原蟲(chóng)的感染率與蜱蟲(chóng)的活躍度呈正相關(guān)。

不同生長(zhǎng)階段的機(jī)體性能和飼養(yǎng)管理不同,肉牛感染血液原蟲(chóng)的種類與感染率也不同。日齡越小的肉牛感染率越高,感染的原蟲(chóng)種類也越多,其中,1歲以內(nèi)犢牛感染率最高,其次是1～2歲肉牛,3歲以上肉牛感染率最低。

多重感染增加了疾病的嚴(yán)重程度,肉牛血液原蟲(chóng)多重感染情況以雙芽巴貝斯蟲(chóng)和大巴貝斯蟲(chóng)同時(shí)感染類型為主,1歲以內(nèi)犢牛多重感染率較高,多重感染占該生長(zhǎng)階段感染率14.49%,3歲以上肉牛未發(fā)現(xiàn)多重感染情況,多重感染提示完善藥物預(yù)防的配伍及飼養(yǎng)管理水平的必要性。

4 結(jié)束語(yǔ)

本研究調(diào)查了貴州黔南地區(qū)肉牛血液原蟲(chóng)的種類、感染情況、分布特征,建立該地區(qū)血液原蟲(chóng)監(jiān)測(cè)庫(kù),以期為貴州黔南地區(qū)養(yǎng)牛業(yè)科學(xué)驅(qū)蟲(chóng)程序提供指導(dǎo),為牛血液原蟲(chóng)病的防治提供理論依據(jù)。